| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第14-49页 |
| 1.1 防御素的研究进展 | 第14-42页 |
| 1.1.1 防御素分子家族的发现简况 | 第14页 |
| 1.1.2 防御素的分类 | 第14页 |
| 1.1.3 防御素的生物合成 | 第14-15页 |
| 1.1.4 防御素的分子特征 | 第15-21页 |
| 1.1.5 防御素的分布 | 第21-26页 |
| 1.1.6 防御素的基因结构及表达调节 | 第26-30页 |
| 1.1.7 防御素的生物学活性 | 第30-38页 |
| 1.1.8 防御素的应用前景 | 第38-41页 |
| 1.1.9 今后防御素的研究方向 | 第41-42页 |
| 1.2 雌激素、孕激素及其受体和受体抑制剂 | 第42-48页 |
| 1.2.1 雌激素、孕激素来源 | 第42页 |
| 1.2.2 雌激素和孕激素的生理作用 | 第42-45页 |
| 1.2.3 雌激素受体 | 第45-46页 |
| 1.2.4 孕激素受体 | 第46-47页 |
| 1.2.5 雌激素和孕激素的抑制剂及抑制剂机理 | 第47-48页 |
| 1.3 本研究的目的、意义 | 第48-49页 |
| 2 实验一 蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素（sBD-1）的组织表达 | 第49-63页 |
| 2.1 材料与方法 | 第49-55页 |
| 2.1.1 实验动物及组织 | 第49-50页 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 | 第50页 |
| 2.1.3 PCR 引物的设计及合成 | 第50页 |
| 2.1.4 蒙古绵羊雌性生殖道各组织总 RNA 的提取及检测 | 第50-51页 |
| 2.1.5 RT-PCR 反应 | 第51-52页 |
| 2.1.6 sBD-1 基因cDNA 的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第52-55页 |
| 2.1.7 RT-PCR 产物cDNA 的序列测定 | 第55页 |
| 2.1.8 序列分析 | 第55页 |
| 2.2 结果 | 第55-60页 |
| 2.2.1 蒙古绵羊雌性生殖道各组织总 RNA 的检测结果 | 第55-56页 |
| 2.2.2 蒙古绵羊雌性生殖道各组织 RT-PCR 扩增结果 | 第56-57页 |
| 2.2.3 蒙古绵羊输卵管组织PCR 产物的克隆、筛选及鉴定 | 第57-58页 |
| 2.2.4 蒙古绵羊输卵管组织PCR 产物的序列分析结果 | 第58-60页 |
| 2.3 讨论 | 第60-62页 |
| 2.3.1 β-防御素的分布范围 | 第60-61页 |
| 2.3.2 蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素的表达情况 | 第61-62页 |
| 2.4 小结 | 第62-63页 |
| 3 实验二 蒙古绵羊输卵管β-防御素（sBD-1）的表达定位 | 第63-73页 |
| 3.1 材料与方法 | 第63-68页 |
| 3.1.1 实验动物及其组织 | 第63页 |
| 3.1.2 主要仪器和试剂 | 第63页 |
| 3.1.3 输卵管sBD-1 RT-PCR 产物的合成、回收与核酸探针的合成 | 第63-66页 |
| 3.1.4 原位杂交 | 第66-68页 |
| 3.2 结果 | 第68-70页 |
| 3.2.1 输卵管sBD-1 RT-PCR 产物的回收 | 第68-69页 |
| 3.2.2 输卵管原位杂交检测结果 | 第69-70页 |
| 3.3 讨论 | 第70-72页 |
| 3.3.1 β–防御素的定位 | 第70-71页 |
| 3.3.2 原位杂交方法 | 第71-72页 |
| 3.4 小结 | 第72-73页 |
| 4 实验三 蒙古绵羊输卵管上皮细胞培养及特征鉴定 | 第73-87页 |
| 4.1 材料和方法 | 第73-76页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第73页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第73页 |
| 4.1.3 实验药品 | 第73-74页 |
| 4.1.4 输卵管上皮细胞培养方法的建立 | 第74页 |
| 4.1.5 细胞形态学鉴定 | 第74页 |
| 4.1.6 培养细胞的染色体核型分析 | 第74-75页 |
| 4.1.7 细胞免疫组化法鉴定 | 第75-76页 |
| 4.2 结果 | 第76-83页 |
| 4.2.1 细胞培养结果 | 第76-79页 |
| 4.2.2 传代输卵管上皮细胞吉姆萨染色形态 | 第79-81页 |
| 4.2.3 染色体核型分析结果 | 第81页 |
| 4.2.4 免疫组化结果 | 第81-83页 |
| 4.3 讨论 | 第83-85页 |
| 4.3.1 上皮细胞的培养 | 第83-84页 |
| 4.3.2 上皮细胞的鉴定 | 第84-85页 |
| 4.4 小结 | 第85-87页 |
| 5 实验四 17-β-雌二醇和孕酮对培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的影响 | 第87-109页 |
| 5.1 材料和方法 | 第88-93页 |
| 5.1.1 实验材料处理同本论文4.1.1 | 第88页 |
| 5.1.2 实验材料 | 第88页 |
| 5.1.3 仪器及试剂 | 第88页 |
| 5.1.4 PCR 引物的设计及合成 | 第88页 |
| 5.1.5 实验设计 | 第88-89页 |
| 5.1.6 细胞总 RNA 的提取 | 第89页 |
| 5.1.7 荧光定量RT-PCR 检测培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的定量方法 | 第89-93页 |
| 5.2 结果 | 第93-105页 |
| 5.2.1 荧光定量RT-PCR 检测培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达定量方法的确定 | 第93-97页 |
| 5.2.2 添加17-β-雌二醇对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第97-100页 |
| 5.2.3 添加孕酮对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第100-103页 |
| 5.2.4 模拟妊娠期、发情期处理结果 | 第103-105页 |
| 5.3 讨论 | 第105-108页 |
| 5.3.1 生理状态下雌激素、孕激素浓度的变化和实验中17-β-雌二醇、孕酮的浓度确定 | 第105-106页 |
| 5.3.2 17-β-雌二醇对sBD-1 表达的影响 | 第106-107页 |
| 5.3.3 孕酮对sBD-1 表达的影响 | 第107页 |
| 5.3.4 孕酮和17-β-雌二醇综合添加对防御素表达的影响 | 第107-108页 |
| 5.4 小结 | 第108-109页 |
| 6 实验五 17-β-雌二醇、孕酮二者拮抗剂对培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的影响 | 第109-116页 |
| 6.1 材料和方法 | 第109-111页 |
| 6.1.1 实验材料处理同本论文4.1.1 | 第109页 |
| 6.1.2 实验材料实验材料为蒙古绵羊输卵管上皮细胞的第一代传代细胞。处理方法同本论文4.1.4 | 第109页 |
| 6.1.3 仪器及试剂实验仪器及试剂同本论文5.1.3 | 第109-110页 |
| 6.1.4 PCR 引物的设计及合成 | 第110页 |
| 6.1.5 实验设计 | 第110页 |
| 6.1.6 细胞总RNA 的提取同本论文5.1.6 | 第110页 |
| 6.1.7 荧光定量RT-PCR 检测培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的定量方法 | 第110-111页 |
| 6.1.8 荧光定量RT-PCR 同本论文5.1.7.2 和5.1.7.3 | 第111页 |
| 6.1.9 实验数据处理 | 第111页 |
| 6.2 结果 | 第111-114页 |
| 6.2.1 添加17-β雌二醇拮抗剂他莫昔芬对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第111-112页 |
| 6.2.2 添加孕酮拮抗剂米非司酮对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第112-114页 |
| 6.3 讨论 | 第114-115页 |
| 6.3.1 雌激素受体、孕激素受体、他莫昔芬和米非司酮在本研究中的意义 | 第114-115页 |
| 6.3.2 添加17-β雌二醇拮抗剂他莫昔芬与防御素表达相关性 | 第115页 |
| 6.3.3 添加孕酮拮抗剂米非司酮与防御素表达相关性 | 第115页 |
| 6.4 小结 | 第115-116页 |
| 7 结论 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-135页 |
| 附录 | 第135-136页 |
| 作者简介 | 第136页 |
