| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 牡蛎免疫研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 软体动物免疫研究进展 | 第12页 |
| 1.1.2 贝类免疫研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.2.1 贝类的细胞免疫 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 贝类的体液免疫 | 第14-15页 |
| 1.1.2.3 化学递质 | 第15-16页 |
| 1.2 溶菌酶研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 溶菌酶的简介 | 第16页 |
| 1.2.2 溶菌酶的分类 | 第16页 |
| 1.2.3 溶菌酶的制备 | 第16-17页 |
| 1.2.4 溶菌酶的功能 | 第17页 |
| 1.3 溶菌酶的应用 | 第17-20页 |
| 1.3.1 在食品保藏上的应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1.1 在乳制品中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.1.2 在肉制品保鲜中的应用 | 第18页 |
| 1.3.1.3 在水果保鲜上的应用 | 第18页 |
| 1.3.1.4 在其它食品中的应用 | 第18-19页 |
| 1.3.2 在医学上的应用 | 第19页 |
| 1.3.3 在饲料中的应用 | 第19页 |
| 1.3.4 在生物工程中的应用 | 第19-20页 |
| 1.4 溶菌酶的研究意义及展望 | 第20页 |
| 1.5 外源基因在原核细胞中的表达 | 第20-22页 |
| 1.6 课题研究的主要内容、目的、意义和技术路线 | 第22-25页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第22页 |
| 1.6.2 研究目的 | 第22-23页 |
| 1.6.3 研究意义 | 第23页 |
| 1.6.4 技术路线 | 第23-25页 |
| 1.6.4.1 牡蛎溶菌酶基因的克隆 | 第23-24页 |
| 1.6.4.2 牡蛎溶菌酶基因的原核表达 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-44页 |
| 2.1 太平洋牡蛎溶菌酶基因的克隆与序列分析 | 第25-37页 |
| 2.1.1 材料与仪器 | 第25-27页 |
| 2.1.1.1 材料 | 第25页 |
| 2.1.1.2 菌株与质粒 | 第25页 |
| 2.1.1.3 特异引物 | 第25页 |
| 2.1.1.4 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.1.5 培养基 | 第26页 |
| 2.1.1.6 常用溶液及缓冲液 | 第26-27页 |
| 2.1.1.7 主要仪器 | 第27页 |
| 2.1.2 方法与步骤 | 第27-37页 |
| 2.1.2.1 保守区序列的克隆 | 第27-32页 |
| 2.1.2.2 开放阅读框序列的克隆 | 第32-33页 |
| 2.1.2.3 表达区序列的克隆 | 第33-36页 |
| 2.1.2.4 系统发育树构建 | 第36-37页 |
| 2.2 太平洋牡蛎溶菌酶基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第37-44页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第37-39页 |
| 2.2.1.1 质粒与菌株 | 第37-38页 |
| 2.2.1.2 酶与试剂 | 第38页 |
| 2.2.1.3 培养基 | 第38页 |
| 2.2.1.4 常用溶液及缓冲液 | 第38-39页 |
| 2.2.2 方法与步骤 | 第39-44页 |
| 2.2.2.1 重组表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 2.2.2.2 重组蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第41-42页 |
| 2.2.2.3 重组太平洋牡蛎溶菌酶的纯化 | 第42-44页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第44-58页 |
| 3.1 CgLys基因的克隆与序列分析 | 第44-54页 |
| 3.1.1 总RNA检测 | 第44-45页 |
| 3.1.2 RT-PCR扩增CgLys保守区序列 | 第45页 |
| 3.1.3 菌落PCR | 第45-46页 |
| 3.1.4 CgLys保守区序列分析 | 第46-48页 |
| 3.1.5 RT-PCR扩增CgLys开放阅读框序列 | 第48页 |
| 3.1.6 菌落PCR | 第48-49页 |
| 3.1.7 序列比对 | 第49-50页 |
| 3.1.8 RT-PCR扩增CgLys表达区序列 | 第50-51页 |
| 3.1.9 pMD18T-CgLys重组质粒构建与鉴定 | 第51-52页 |
| 3.1.10 重组子序列测定 | 第52页 |
| 3.1.11 系统发育树的构建 | 第52-54页 |
| 3.2 CgLys基因的表达 | 第54-58页 |
| 3.2.1 pET32a(+)-CgLys重组子的构建及鉴定 | 第54-55页 |
| 3.2.2 重组蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第55-56页 |
| 3.2.3 重组蛋白的纯化 | 第56-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录A | 第63-64页 |
| 附录B | 第64-65页 |
| 附录C | 第65页 |
