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依赖DNA序列的核小体定位的实验研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
引言第9-11页
1 文献综述第11-25页
    1.1 表观遗传学及染色质结构第11-16页
        1.1.1 表观遗传学第11-13页
        1.1.2 染色质第13-14页
        1.1.3 核小体第14-16页
    1.2 核小体定位的意义及进展第16-19页
        1.2.1 核小体定位及意义第16-17页
        1.2.2 核小体定位的研究进展第17-19页
    1.3 体外组装染色质的目的第19页
    1.4 染色质体外组装及检测的方法第19-21页
        1.4.1 盐透析方法装配染色质模板第19-20页
        1.4.2 利用纯化的蛋白体系(NAP1、ACF)进行的染色体体外组装第20页
        1.4.3 DNA 标记检测第20-21页
        1.4.4 微球菌核酸酶的检测第21页
    1.5 (RRRRRYYYYY)n 理论研究第21-25页
2 实验材料与方法第25-40页
    2.1 组蛋白的表达纯化与组蛋白八聚体的装配第25-27页
        2.1.1 材料与方法第25页
        2.1.2 蛋白标准曲线绘制第25-26页
        2.1.3 组蛋白的表达第26页
        2.1.4 组蛋白的纯化第26页
        2.1.5 纯化后鉴定第26-27页
        2.1.6 组蛋白八聚体的装配第27页
        2.1.7 组蛋白八聚体的装配后鉴定第27页
    2.2 DNA 重复序列的核小体定位特性第27-34页
        2.2.1 材料与方法第27页
        2.2.2 pUC601 质粒的构建第27-29页
        2.2.3 核小体的组装第29-31页
        2.2.4 微球菌核酸酶酶切第31-34页
    2.3 R5Y5 DNA 序列体外形成核小体的能力第34-40页
        2.3.1 理论设计 DNA 序列第34-35页
        2.3.2 目的片段的获得第35-37页
        2.3.3 核小体的组装第37-39页
        2.3.4 EB 检测第39页
        2.3.5 Biotin 标记检测第39-40页
3.结果与分析第40-53页
    3.1 组蛋白的表达纯化与组蛋白八聚体的装配第40-43页
        3.1.1 组蛋白各组分的纯化与鉴定第40页
        3.1.2 蛋白标准曲线的制作第40-41页
        3.1.3 组蛋白浓度测定第41页
        3.1.4 组蛋白八聚体的体外构建第41-42页
        3.1.5 蛋白标准曲线的制作第42页
        3.1.6 组蛋白浓度测定第42-43页
    3.2 DNA 重复序列的核小体定位特性第43-47页
        3.2.1 重组质粒的构建第43-44页
        3.2.2 组蛋白与 DNA 组装最适比例的确定第44-45页
        3.2.3 最适酶量的确定第45页
        3.2.4 最适酶切时间的确定第45-46页
        3.2.5 不同质粒形成核小体能力的比较第46-47页
    3.3 R5Y5 DNA 序列体外形成核小体的能力第47-53页
        3.3.1 质粒的检测第47-48页
        3.3.2 质粒酶切鉴定第48页
        3.3.3 PCR第48-50页
        3.3.4 胶回收第50页
        3.3.5 DNA 片段浓度检测第50-51页
        3.3.6 核小体体外组装第51-53页
4 讨论第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-64页
在学研究成果第64页
在学期间参加的科研项目第64-65页
致谢第65页

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