摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
引言 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 表观遗传学及染色质结构 | 第11-16页 |
1.1.1 表观遗传学 | 第11-13页 |
1.1.2 染色质 | 第13-14页 |
1.1.3 核小体 | 第14-16页 |
1.2 核小体定位的意义及进展 | 第16-19页 |
1.2.1 核小体定位及意义 | 第16-17页 |
1.2.2 核小体定位的研究进展 | 第17-19页 |
1.3 体外组装染色质的目的 | 第19页 |
1.4 染色质体外组装及检测的方法 | 第19-21页 |
1.4.1 盐透析方法装配染色质模板 | 第19-20页 |
1.4.2 利用纯化的蛋白体系(NAP1、ACF)进行的染色体体外组装 | 第20页 |
1.4.3 DNA 标记检测 | 第20-21页 |
1.4.4 微球菌核酸酶的检测 | 第21页 |
1.5 (RRRRRYYYYY)n 理论研究 | 第21-25页 |
2 实验材料与方法 | 第25-40页 |
2.1 组蛋白的表达纯化与组蛋白八聚体的装配 | 第25-27页 |
2.1.1 材料与方法 | 第25页 |
2.1.2 蛋白标准曲线绘制 | 第25-26页 |
2.1.3 组蛋白的表达 | 第26页 |
2.1.4 组蛋白的纯化 | 第26页 |
2.1.5 纯化后鉴定 | 第26-27页 |
2.1.6 组蛋白八聚体的装配 | 第27页 |
2.1.7 组蛋白八聚体的装配后鉴定 | 第27页 |
2.2 DNA 重复序列的核小体定位特性 | 第27-34页 |
2.2.1 材料与方法 | 第27页 |
2.2.2 pUC601 质粒的构建 | 第27-29页 |
2.2.3 核小体的组装 | 第29-31页 |
2.2.4 微球菌核酸酶酶切 | 第31-34页 |
2.3 R5Y5 DNA 序列体外形成核小体的能力 | 第34-40页 |
2.3.1 理论设计 DNA 序列 | 第34-35页 |
2.3.2 目的片段的获得 | 第35-37页 |
2.3.3 核小体的组装 | 第37-39页 |
2.3.4 EB 检测 | 第39页 |
2.3.5 Biotin 标记检测 | 第39-40页 |
3.结果与分析 | 第40-53页 |
3.1 组蛋白的表达纯化与组蛋白八聚体的装配 | 第40-43页 |
3.1.1 组蛋白各组分的纯化与鉴定 | 第40页 |
3.1.2 蛋白标准曲线的制作 | 第40-41页 |
3.1.3 组蛋白浓度测定 | 第41页 |
3.1.4 组蛋白八聚体的体外构建 | 第41-42页 |
3.1.5 蛋白标准曲线的制作 | 第42页 |
3.1.6 组蛋白浓度测定 | 第42-43页 |
3.2 DNA 重复序列的核小体定位特性 | 第43-47页 |
3.2.1 重组质粒的构建 | 第43-44页 |
3.2.2 组蛋白与 DNA 组装最适比例的确定 | 第44-45页 |
3.2.3 最适酶量的确定 | 第45页 |
3.2.4 最适酶切时间的确定 | 第45-46页 |
3.2.5 不同质粒形成核小体能力的比较 | 第46-47页 |
3.3 R5Y5 DNA 序列体外形成核小体的能力 | 第47-53页 |
3.3.1 质粒的检测 | 第47-48页 |
3.3.2 质粒酶切鉴定 | 第48页 |
3.3.3 PCR | 第48-50页 |
3.3.4 胶回收 | 第50页 |
3.3.5 DNA 片段浓度检测 | 第50-51页 |
3.3.6 核小体体外组装 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
在学研究成果 | 第64页 |
在学期间参加的科研项目 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |