| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 轮状病毒分类及主要结构蛋白 | 第11-14页 |
| 1.2.1 分类 | 第11-12页 |
| 1.2.2 主要结构蛋白 | 第12-14页 |
| 1.3 轮状病毒分子流行病学 | 第14-16页 |
| 1.3.1 人轮状病毒流行病学 | 第14-15页 |
| 1.3.2 动物轮状病毒流行病学 | 第15-16页 |
| 1.4 轮状病毒的临诊症状、诊断、治疗及防控 | 第16-17页 |
| 1.4.1 轮状病毒临诊症状 | 第16页 |
| 1.4.2 轮状病毒的诊断 | 第16页 |
| 1.4.3 轮状病毒的疾病治疗 | 第16页 |
| 1.4.4 轮状病毒疾病的防控 | 第16-17页 |
| 1.5 轮状病毒受体 | 第17-22页 |
| 1.5.1 唾液酸 | 第18-19页 |
| 1.5.2 整合素 | 第19-21页 |
| 1.5.3 热休克蛋白hsc70 | 第21-22页 |
| 1.5.4 脂筏 | 第22页 |
| 1.6 轮状病毒侵入细胞的复杂过程 | 第22-24页 |
| 1.7 病毒侵入细胞的机制 | 第24-25页 |
| 1.8 研究的意义 | 第25-27页 |
| 第二章 轮状病毒VP6多克隆抗体的制备 | 第27-49页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 病毒、细胞、质粒及菌株 | 第27页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-39页 |
| 2.2.1 引物的设计与合成 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞培养及轮状病毒UK株的扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.3 TRIzol法提取RNA | 第29页 |
| 2.2.4 反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.5 PCR | 第30页 |
| 2.2.6 轮状病毒UK株VP6基因亚克隆 | 第30-32页 |
| 2.2.7 碱裂解法小量提取质粒 | 第32-33页 |
| 2.2.8 重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.9 重组质粒在大肠杆菌的表达 | 第34-35页 |
| 2.2.10 重组蛋白的大量表达及纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.11 纯化后蛋白的浓缩 | 第36页 |
| 2.2.12 浓缩后蛋白的定量 | 第36-37页 |
| 2.2.13 纯化后蛋白的Western-blotting分析 | 第37页 |
| 2.2.14 多克隆抗体的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.15 多克隆抗体的检测 | 第38-39页 |
| 2.3 结果 | 第39-46页 |
| 2.3.1 轮状病毒UK株VP6基因的扩增 | 第39-40页 |
| 2.3.2 重组质粒的鉴定 | 第40页 |
| 2.3.3 轮状病毒VP6表达产物的SDS-PAGE结果分析 | 第40-41页 |
| 2.3.4 纯化后重组蛋白的Glycine-SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
| 2.3.5 Western blotting结果分析 | 第42页 |
| 2.3.6 Western blotting检测多克隆抗体的反应性 | 第42-43页 |
| 2.3.7 ELISA检测多克隆抗体的效价 | 第43-44页 |
| 2.3.8 间接免疫荧光检测抗体与病毒的反应性 | 第44-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 网格蛋白和内体酸化对轮状病毒侵入的影响 | 第49-67页 |
| 3.1 材料 | 第49页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 3.1.2 病毒及细胞 | 第49页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第49页 |
| 3.2 方法 | 第49-52页 |
| 3.2.1 病毒的浓缩 | 第49-50页 |
| 3.2.2 间接免疫荧光实验 | 第50-51页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR | 第51-52页 |
| 3.3 结果 | 第52-65页 |
| 3.3.1 网格蛋白被抑制结果 | 第52-53页 |
| 3.3.2 抑制网格蛋白对轮状病毒侵入的影响 | 第53-57页 |
| 3.3.3 抑制内体酸化对轮状病毒侵入的影响 | 第57-61页 |
| 3.3.4 实时定量PCR结果 | 第61-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 全文结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
