| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 研究概述 | 第13-20页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 微囊藻毒素MCs的简介和危害 | 第13-16页 |
| 1.2.1 藻毒素的简介 | 第13-14页 |
| 1.2.2 藻毒素的种类 | 第14-15页 |
| 1.2.3 藻毒素的毒性 | 第15-16页 |
| 1.3 微囊藻毒素MCs的降解方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 物理法 | 第16页 |
| 1.3.2 化学法 | 第16-17页 |
| 1.3.3 细菌降解法 | 第17-18页 |
| 1.3.4 酶降解法 | 第18页 |
| 1.4 选题意义 | 第18-20页 |
| 第二章 MCs降解酶家族的分子克隆 | 第20-35页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验原理 | 第20-21页 |
| 2.3 实验部分 | 第21-34页 |
| 2.3.1 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.3.2 主要实验药品 | 第22-23页 |
| 2.3.3 常用溶液的配置 | 第23-24页 |
| 2.3.4 载体构建 | 第24-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 MCs降解酶家族蛋白的表达纯化 | 第35-47页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验部分 | 第35-36页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第35页 |
| 3.2.2 主要实验药品 | 第35页 |
| 3.2.3 常用溶液的配置 | 第35-36页 |
| 3.3 pMAL-C2X-mlrA蛋白表达 | 第36-41页 |
| 3.3.1 菌体的诱导和收集 | 第36-37页 |
| 3.3.2 MBP亲和层析柱的再生 | 第37页 |
| 3.3.3 mlrA的蛋白纯化 | 第37-38页 |
| 3.3.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测mlrA蛋白的纯度 | 第38-39页 |
| 3.3.5 用Bradford方法测定pMAL-C2X-MBP蛋白含量 | 第39-41页 |
| 3.4 pCold-opt-mlrA的蛋白表达 | 第41-42页 |
| 3.4.1 菌体的诱导和收集 | 第41-42页 |
| 3.5 mlrB、mlrC、mlrD的蛋白表达及纯化 | 第42-46页 |
| 3.5.1 菌体的诱导和收集 | 第42页 |
| 3.5.2 His亲和层析柱的再生 | 第42页 |
| 3.5.3 mlrB、mlrC、mlrD蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| 3.5.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测mlrB、mlrC、mlrD蛋白的纯度 | 第43-45页 |
| 3.5.5 用Bradford方法测定mlrB和mlrC的蛋白含量 | 第45-46页 |
| 3.6 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 MCs降解酶家族的酶学性质的研究 | 第47-61页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 主要实验仪器和试剂 | 第47页 |
| 4.3 藻毒素降解酶mlrA酶学性质的测定 | 第47-56页 |
| 4.3.1 MC-RR和MC-LR标准曲线的测定 | 第47-49页 |
| 4.3.2 藻毒素降解酶mlrA比活力的测定 | 第49-51页 |
| 4.3.3 藻毒素降解酶mlrA的最适反应温度 | 第51-52页 |
| 4.3.4 藻毒素降解酶mlrA的最适pH | 第52-53页 |
| 4.3.5 金属离子对mlrA活性的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.6 MBP标签对藻毒素降解酶mlrA活性的影响 | 第54-56页 |
| 4.4 藻毒素降解酶mlrB酶活性质的测定 | 第56-57页 |
| 4.5 藻毒素降解酶mlrC酶学性质的测定 | 第57-60页 |
| 4.5.1 藻毒素降解酶mlrC的活性测定 | 第57-58页 |
| 4.5.2 温度对藻毒素降解酶mlrC活性的影响 | 第58-60页 |
| 4.6 本章小结 | 第60-61页 |
| 第五章 藻毒素降解酶的降解机理的探索 | 第61-73页 |
| 5.1 引言 | 第61页 |
| 5.2 实验部分 | 第61-64页 |
| 5.2.1 主要仪器 | 第61-62页 |
| 5.2.2 主要实验试剂 | 第62页 |
| 5.2.3 主要检测方法 | 第62页 |
| 5.2.4 藻毒素降解酶mlrA降解机理的研究 | 第62-63页 |
| 5.2.5 藻毒素降解酶mlrB降解机理的研究 | 第63页 |
| 5.2.6 藻毒素降解酶mlrC降解机理的研究 | 第63-64页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第64-71页 |
| 5.3.1 mlrA对底物MC-RR/MC-LR降解活性及机理的检测结果 | 第64-66页 |
| 5.3.2 mlrB对底物A-RR/A-LR降解活性的检测结果 | 第66-69页 |
| 5.3.3 mlrC对底物A-RR/A-LR降解活性及机理的检测结果 | 第69-71页 |
| 5.4 本章小结 | 第71-73页 |
| 第六章 全文总结及展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录1 | 第81-85页 |
| 附录2 | 第85-89页 |
| 研究生期间发表的论文和专利 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
