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RSV来源的vsiRNA调控水稻内源基因表达的研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 文献综述第8-16页
    1.1 水稻条纹病毒概述第8-11页
        1.1.1 RSV基因组结构第8-10页
        1.1.2 RSV的危害第10-11页
    1.2 病毒影响植物的生理第11-13页
        1.2.1 病毒影响植物光合作用第11-12页
        1.2.2 病毒影响植物呼吸作用第12-13页
        1.2.3 病毒影响激素及酶活性第13页
    1.3 vsiRNA调控内源基因表达第13-15页
        1.3.1 植物RNA干扰第13-14页
        1.3.2 vsiRNA的产生机制第14-15页
    1.4 研究目的与意义第15-16页
第二章 引言第16-17页
第三章 材料与方法第17-33页
    3.1 实验材料第17-18页
        3.1.1 材料和毒源第17页
        3.1.2 实验菌株与载体第17页
        3.1.3 试剂第17-18页
        3.1.4 仪器第18页
    3.2 实验方法第18-33页
        3.2.1 RSV接种本氏烟第18-20页
        3.2.2 高通量测序分析第20-21页
        3.2.3 沉默载体的构建第21-24页
        3.2.4 双元表达载体的构建第24-25页
        3.2.5 农杆菌浸润本氏烟第25-26页
        3.2.6 实时荧光定量分析(Real-time PCR)第26-27页
        3.3.7 Western blot检测第27-28页
        3.2.8 Northern blot检测第28-30页
        3.2.9 microRNA Northern blot检测第30-31页
        3.2.10 5’RACE第31-32页
        3.2.11 超表达植株DNA检测第32页
        3.2.12 转基因植株RT-PCR检测第32-33页
第四章 实验结果与分析第33-45页
    4.1 RSV引起内源基因变化第33-34页
        4.1.1 本氏烟人工接种RSV第33-34页
    4.2 植株内源T1基因表达下调参与RSV的症状表现第34-35页
        4.2.1 沉默载体的构建第34页
        4.2.2 本氏烟T1基因的VIGS分析第34-35页
    4.3 生物信息学分析第35-36页
    4.4 amiRNA方法表达vsiRNA导致T1基因表达下调第36-39页
        4.4.1 瞬时表达载体构建第36-38页
        4.4.2 vsiRNA与靶基因的相互作用第38-39页
    4.5 病毒载体表达vsiRNA导致T1基因下调第39-40页
    4.6 在本氏烟中超表达T1基因能延缓RSV的侵染第40-45页
第五章 讨论第45-48页
第六章 结论与展望第48-49页
    6.1 结论第48页
        6.1.1 T1基因的下调表达参与RSV的症状表现第48页
        6.1.2 病毒来源的vsiRNA能靶向作用于T1基因第48页
        6.1.3 超表达T1基因能够延缓RSV的侵染及其症状的发生第48页
    6.2 展望第48-49页
参考文献第49-55页
附录A:英文缩略表第55-57页
附录B:研究中用的培养基及缓冲液配制第57-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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