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以PEI衍生物为载体构建肿瘤基因递送体系:从小分子到大分子的修饰

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
中英文缩略词对照表第12-13页
第1章 绪论第13-29页
    1.1 基因治疗第13-14页
        1.1.1 基因治疗的概念第13-14页
        1.1.2 基因治疗的发展历程及现状第14页
    1.2 肿瘤基因传输体系第14-15页
    1.3 基因载体第15-18页
        1.3.1 什么是基因载体第15页
        1.3.2 基因载体的必要性第15页
        1.3.3 理想基因传输载体的要求第15页
        1.3.4 基因载体的分类第15-18页
    1.4 阳离子聚合物基因载体第18-21页
        1.4.1 阳离子聚合物载体介导的基因传递过程第19页
        1.4.2 聚阳离子基因载体的种类及研究现状第19-21页
    1.5 聚乙烯亚胺的特征及改性研究第21-27页
        1.5.1 聚乙烯亚胺的特征第21-23页
        1.5.2 聚乙烯亚胺的改性第23-27页
    1.6 本课题设计思路及主要研究内容第27-29页
第2章 N-乙酰-L-亮氨酸修饰PEI25K 衍生物的构建及介导脱氧核酶递送.第29-46页
    2.1 前言第29-30页
    2.2 实验材料第30页
        2.2.1 细胞株第30页
        2.2.2 主要试剂第30页
        2.2.3 主要设备第30页
    2.3 实验方法第30-34页
        2.3.1 N-Ac-L-Leu-PEI 的合成第30-31页
        2.3.2 N-Ac-L-Leu-PEI 的表征第31页
        2.3.3 N-Ac-L-Leu-PEI 质子缓冲能力的测定第31页
        2.3.4 N-Ac-L-Leu-PEI/pDNA 的凝胶阻滞电泳第31-32页
        2.3.5 BSA 蛋白吸附测定第32页
        2.3.6 溶血实验第32页
        2.3.7 N-Ac-L-Leu-PEI 的细胞毒性测定第32-33页
        2.3.8 细胞转染的评价第33页
        2.3.9 N-Ac-L-Leu-PEI 与 DNAzyme 结合能力的测定第33页
        2.3.10 N-Ac-L-Leu-PEI/DNAzyme 复合物的胞吞能力测定以及在细胞内的分布第33-34页
        2.3.11 N-Ac-L-Leu-PEI/DNAzyme 复合物对细胞的影响第34页
    2.4 结果与讨论第34-45页
        2.4.1 N-Ac-L-Leu-PEI 的合成与表征第34-41页
        2.4.2 N-Ac-L-Leu-PEI/DNAzyme 的表征第41-45页
    2.5 本章结论第45-46页
第3章 嗜热组蛋白-PEI 杂合基因传输载体的构建第46-72页
    3.1 非病毒载体组蛋白简介第46-49页
        3.1.1 组蛋白的性质与作用机制第46-47页
        3.1.2 嗜热组蛋白基因传输载体第47-48页
        3.1.3 嗜热细菌 Geobacillus kastophilus HTA426 简介第48-49页
        3.1.4 协同效应第49页
    3.2 实验材料第49-50页
        3.2.1 菌株与载体第49页
        3.2.2 主要试剂第49-50页
        3.2.3 主要仪器第50页
        3.2.4 培养基第50页
    3.3 实验方法第50-56页
        3.3.1 G. kaustophilus HTA426 的复苏及培养第50页
        3.3.2 G. kaustophilus HTA426 基因组 DNA 的提取第50-51页
        3.3.3 重组嗜热组蛋白基因的克隆第51-53页
        3.3.4 GK2215 基因的表达与纯化第53-54页
        3.3.5 重组嗜热组蛋白的 Tricine-SDS-PAGE 鉴定第54页
        3.3.6 重组嗜热组蛋白的分子量测定第54页
        3.3.7 重组嗜热组蛋白的稳定性分析第54页
        3.3.8 京尼平交联嗜热组蛋白-PEI(HGP)的合成第54-55页
        3.3.9 红外吸收光谱第55页
        3.3.10 紫外可见吸收光谱第55页
        3.3.11 荧光显微镜第55页
        3.3.12 凝胶阻滞电泳实验第55页
        3.3.13 细胞毒性实验第55-56页
        3.3.14 细胞转染实验第56页
    3.4 结果与讨论第56-70页
        3.4.1 嗜热组蛋白基因 GK2215 的克隆第56-57页
        3.4.2 嗜热组蛋白的表达与纯化第57-62页
        3.4.3 嗜热组蛋白的热稳定性分析第62-63页
        3.4.4 嗜热组蛋白-PEI 杂合基因传输载体(HGP)的合成第63-66页
        3.4.5 凝胶阻滞分析第66-67页
        3.4.6 细胞毒性分析第67页
        3.4.7 细胞转染实验第67-70页
    3.5 本章结论第70-72页
第4章 硫酸软骨素修饰 PEI 构建 CD44 靶向基因纳米传递体系第72-85页
    4.1 前言第72-73页
    4.2 试剂和方法第73-76页
        4.2.1 主要试剂第73页
        4.2.2 主要方法第73-76页
    4.3 结果与讨论第76-84页
        4.3.1 PEI-CSMA 的合成第76-78页
        4.3.2 凝胶阻滞第78页
        4.3.3 载体毒性实验第78-79页
        4.3.4 CD44 表达水平及靶向的检测第79-80页
        4.3.5 激光共聚焦对载体靶向验证第80-81页
        4.3.6 miR-34a 抑制肿瘤细胞生长及诱导凋亡第81-82页
        4.3.7 Caspase-3 活力检测第82页
        4.3.8 Western blotting 检测第82-83页
        4.3.9 肿瘤细胞迁移实验第83-84页
    4.4 本章结论第84-85页
第5章 结论第85-86页
创新点第86-87页
参考文献第87-94页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第94-95页
致谢第95页

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