| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 鸭腺病毒研究现状 | 第13-20页 |
| 1.1 鸭腺病毒在腺病毒中的分类地位 | 第13页 |
| 1.2 鸭腺病毒的形态结构 | 第13-14页 |
| 1.3 鸭腺病毒基因组结构和功能 | 第14页 |
| 1.4 鸭腺病毒理化性质 | 第14-15页 |
| 1.5 鸭腺病毒感染禽类引起的疾病 | 第15-18页 |
| 1.5.1 鸡减蛋综合征 | 第15-17页 |
| 1.5.2 鸭腺病毒病 | 第17-18页 |
| 1.6 检测鸭腺病毒感染的方法 | 第18-20页 |
| 1.6.1 病原分离鉴定 | 第18页 |
| 1.6.2 血清学方法 | 第18-19页 |
| 1.6.3 分子生物学方法 | 第19-20页 |
| 2 蜂胶及其应用 | 第20-22页 |
| 2.1 蜂胶 | 第20-21页 |
| 2.1.1 蜂胶的免疫佐剂作用 | 第20-21页 |
| 2.1.2 蜂胶佐剂提高体液免疫功能 | 第21页 |
| 2.1.3 蜂胶佐剂提高细胞免疫功能 | 第21页 |
| 2.1.4 蜂胶对免疫器官的作用 | 第21页 |
| 2.1.5 蜂胶的安全性 | 第21页 |
| 2.2 蜂胶佐剂的应用 | 第21-22页 |
| 3 选题目的 | 第22-23页 |
| 第二章 鸭腺病毒蜂胶灭活苗的研制及其免疫原性研究 | 第23-51页 |
| 1 试验材料 | 第23-25页 |
| 1.1 试验毒株 | 第23页 |
| 1.2 参考毒(菌)株 | 第23页 |
| 1.3 试验动物 | 第23页 |
| 1.4 主要试验试剂及配方 | 第23-24页 |
| 1.4.1 血凝及血凝抑制试验试剂 | 第23-24页 |
| 1.4.2 ELISA试验试剂 | 第24页 |
| 1.4.3 MTT试验试剂 | 第24页 |
| 1.5 试验仪器 | 第24-25页 |
| 1.6 其他试验材料 | 第25页 |
| 2 试验方法 | 第25-34页 |
| 2.1 研制鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗 | 第25-27页 |
| 2.1.1 制备种毒 | 第25-26页 |
| 2.1.2 制备蜂胶灭活苗 | 第26-27页 |
| 2.2 检测鸭腺病毒抗体的间接ELISA方法的建立 | 第27-30页 |
| 2.2.1 抗原的制备与纯化 | 第27页 |
| 2.2.2 阴性血清制备 | 第27页 |
| 2.2.3 阴性鸭IgG的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.4 酶标二抗最佳稀释度的确定 | 第28页 |
| 2.2.5 抗原和血清最佳稀释度的确定 | 第28-29页 |
| 2.2.6 血清最佳作用时间的确定 | 第29页 |
| 2.2.7 鸭腺病毒阴性血清临界值的确定 | 第29页 |
| 2.2.8 间接ELISA操作程序 | 第29页 |
| 2.2.9 特异性试验 | 第29-30页 |
| 2.2.10 敏感性试验 | 第30页 |
| 2.2.11 重复性试验 | 第30页 |
| 2.3 鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗免疫种鸭及免疫应答监测 | 第30-34页 |
| 2.3.1 鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗免疫种鸭 | 第30-31页 |
| 2.3.2 鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗免疫实验鸭的抗体监测 | 第31-32页 |
| 2.3.3 鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗免疫实验鸭的细胞免疫监测 | 第32-34页 |
| 3 试验结果 | 第34-44页 |
| 3.1 研制鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗 | 第34-35页 |
| 3.1.1 测定半数感染量(EID_(50)) | 第34页 |
| 3.1.2 种毒检验 | 第34页 |
| 3.1.3 蜂胶含量测定 | 第34-35页 |
| 3.1.4 疫苗性状、疫苗的无菌检验和安全性检验 | 第35页 |
| 3.2 检测鸭腺病毒抗体的间接ELISA方法的建立 | 第35-39页 |
| 3.2.1 抗原制备与纯化 | 第35页 |
| 3.2.2 阴性血清制备 | 第35页 |
| 3.2.3 阴性鸭IgG的提取 | 第35页 |
| 3.2.4 HRP-羊抗鸭IgG最佳稀释度 | 第35-36页 |
| 3.2.5 抗原和血清最佳稀释度 | 第36-37页 |
| 3.2.6 血清最佳作用时间 | 第37页 |
| 3.2.7 鸭腺病毒阴性血清临界值 | 第37-38页 |
| 3.2.8 特异性试验结果 | 第38页 |
| 3.2.9 敏感性试验结果 | 第38页 |
| 3.2.10 重复性试验结果 | 第38-39页 |
| 3.3 鸭腺病毒蜂胶灭活疫苗免疫种鸭及免疫应答监测 | 第39-44页 |
| 3.3.1 种鸭免疫后血清抗体ELISA效价测定 | 第39-40页 |
| 3.3.2 种鸭免疫后血清抗体血凝抑制(HI)效价测定 | 第40-41页 |
| 3.3.3 鸭淋巴细胞转化试验结果 | 第41-42页 |
| 3.3.4 白细胞吞噬试验 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-50页 |
| 4.1 疫苗的研制 | 第44-45页 |
| 4.2 间接ELISA方法的建立 | 第45-46页 |
| 4.2.1 抗原的纯化 | 第45页 |
| 4.2.2 抗原和血清稀释度 | 第45-46页 |
| 4.2.3 酶标二抗浓度的确定 | 第46页 |
| 4.2.4 临界值的确定 | 第46页 |
| 4.3 疫苗对种鸭体液免疫的影响 | 第46-48页 |
| 4.3.1 间接ELISA试验 | 第46-47页 |
| 4.3.2 血凝试验和血凝抑制试验 | 第47-48页 |
| 4.4 疫苗对种鸭细胞免疫的影响 | 第48-50页 |
| 4.4.1 疫苗对鸭外周血T淋巴细胞转化效果的影响(MTT法) | 第48-49页 |
| 4.4.2 白细胞吞噬试验 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第60页 |
