| 论文主要创新点 | 第5-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| 缩写表 | 第18-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-43页 |
| 1.1 高等植物的生殖发育 | 第19-27页 |
| 1.1.1 拟南芥雄配子的发育 | 第19-24页 |
| 1.1.1.1 拟南芥的花粉发育 | 第19-23页 |
| 1.1.1.2 生长素在拟南芥的花粉发育中的作用 | 第23-24页 |
| 1.1.2 拟南芥雌配子的发育 | 第24-27页 |
| 1.1.2.1 拟南芥的胚珠发育 | 第24-25页 |
| 1.1.2.2 生长素在拟南芥的胚珠发育中的作用 | 第25-27页 |
| 1.2 拟南芥根的发育 | 第27-32页 |
| 1.2.1 根顶端分生组织静止中心的维持 | 第27-28页 |
| 1.2.2 生长素在根顶端的极性运输 | 第28-30页 |
| 1.2.3 拟南芥根毛的发生 | 第30-32页 |
| 1.3 拟南芥叶的形态发育 | 第32-34页 |
| 1.4 磷脂酶 | 第34-42页 |
| 1.4.1 磷脂的结构 | 第34-35页 |
| 1.4.2 磷脂和磷脂酶 | 第35-36页 |
| 1.4.3 磷脂酶的研究进展 | 第36-42页 |
| 1.4.3.1 磷脂酶D的研究进展 | 第36-38页 |
| 1.4.3.2 磷脂酶A的研究进展 | 第38-39页 |
| 1.4.3.3 磷脂酶C的研究进展 | 第39-42页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
| 2 材料和方法 | 第43-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-50页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第43页 |
| 2.1.3 引物名称和序列 | 第43-45页 |
| 2.1.4 所用工具酶和试剂盒 | 第45-46页 |
| 2.1.5 抗体 | 第46页 |
| 2.1.6 培养基 | 第46-48页 |
| 2.1.7 其他主要生物学试剂 | 第48-50页 |
| 2.2 实验方法 | 第50-60页 |
| 2.2.1 拟南芥植株的培养和各种株系的构建 | 第50-52页 |
| 2.2.1.1 拟南芥的培养方法 | 第50页 |
| 2.2.1.2 拟南芥突变体的鉴定方法 | 第50页 |
| 2.2.1.3 农杆菌的电激转化 | 第50-51页 |
| 2.2.1.4 转基因植株的构建 | 第51页 |
| 2.2.1.5 突变体互补植株的构建 | 第51页 |
| 2.2.1.6 plc2/plc2纯合体杂交株系的构建 | 第51-52页 |
| 2.2.2 突变体表型的分析 | 第52-55页 |
| 2.2.2.1 胚胎的透明观察 | 第52页 |
| 2.2.2.2 花粉的离体萌发 | 第52页 |
| 2.2.2.3 花粉的DAPI染色 | 第52-53页 |
| 2.2.2.4 花粉管的苯胺蓝染色 | 第53页 |
| 2.2.2.5 花药和胚囊自发荧光的观察 | 第53页 |
| 2.2.2.6 叶脉形态的观察 | 第53-54页 |
| 2.2.2.7 叶表皮细胞和根顶端分生组织的PI染色观察 | 第54页 |
| 2.2.2.8 IAA,NAA,NPA对根毛生长影响的观察 | 第54页 |
| 2.2.2.9 冷冻扫描电子显微镜观察 | 第54-55页 |
| 2.2.2.10 半薄超薄切片及其观察 | 第55页 |
| 2.2.3 分子生物学与生化实验方法 | 第55-60页 |
| 2.2.3.1 基因克隆与载体构建 | 第55页 |
| 2.2.3.2 质粒的提取 | 第55页 |
| 2.2.3.3 植物基因组DNA提取 | 第55-56页 |
| 2.2.3.4 植物总RNA的提取 | 第56页 |
| 2.2.3.5 基因芯片分析 | 第56页 |
| 2.2.3.6 半定量RT-PCR和荧光定量RT-PCR | 第56-57页 |
| 2.2.3.7 GUS染色的组织化学分析 | 第57页 |
| 2.2.3.8 In situ原位杂交 | 第57-58页 |
| 2.2.3.9 PIN蛋白的免疫荧光观察 | 第58页 |
| 2.2.3.10 根毛细胞的Ca~(2+)染色 | 第58-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-110页 |
| 3.1 PI-PLC家族基因在拟南芥各组织中表达的特点 | 第60页 |
| 3.2 拟南芥PLC2缺失突变体的筛选和鉴定 | 第60-62页 |
| 3.3 PLC2基因在拟南芥生殖发育过程中的功能 | 第62-80页 |
| 3.3.1 plc2/plc2杂合体部分胚珠中胚胎的发育呈现异常 | 第62-63页 |
| 3.3.2 plc2/plc2杂合体植株中雄配子的育性明显降低 | 第63-65页 |
| 3.3.3 plc2/plc2纯合体植株呈现不育的表型 | 第65-67页 |
| 3.3.4 plc2/plc2纯合体植株花器官发育异常 | 第67-68页 |
| 3.3.5 plc2/plc2纯合体花药发育异常花药开裂受到影响 | 第68-69页 |
| 3.3.6 plc2/plc2纯合体花粉萌发严重受阻 | 第69-70页 |
| 3.3.7 plc2/plc2纯合体花粉形态异常 | 第70-71页 |
| 3.3.8 plc2/plc2纯合体中异常的小孢子和花粉的发育 | 第71-72页 |
| 3.3.9 plc2/plc2纯合体花粉粒的内壁呈现凹凸不平的结构 | 第72-73页 |
| 3.3.10 plc2/plc2纯合体植株中生长素的分布发生了改变 | 第73-74页 |
| 3.3.11 plc2/plc2纯合体雌配子体完全不育 | 第74-75页 |
| 3.3.12 plc2/plc2纯合体胚囊发育受阻 | 第75-76页 |
| 3.3.13 plc2/plc2纯合体胚珠中生长素集中分布于珠孔端 | 第76-77页 |
| 3.3.14 生长素合成基因在plc2/plc2纯合体花序中的表达增强 | 第77-80页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第80-84页 |
| 3.4.1 小结 | 第80-81页 |
| 3.4.2 讨论 | 第81-84页 |
| 3.5 PLC2基因在拟南芥营养组织发育过程中的作用 | 第84-105页 |
| 3.5.1 PLC2主要定位于细胞质膜中 | 第84-85页 |
| 3.5.2 PLC2基因影响叶形态的发育 | 第85-88页 |
| 3.5.3 PLC2参与调控了生长素在叶片中的分布 | 第88页 |
| 3.5.4 PLC2基因影响叶表皮细胞的形态建成 | 第88-90页 |
| 3.5.5 PLC2基因对主根发育的影响 | 第90页 |
| 3.5.6 plc2/plc2纯合体中主根的向重性降低 | 第90-91页 |
| 3.5.7 plc2/plc2纯合体中主根的顶端分生组织逐渐解体 | 第91-93页 |
| 3.5.8 plc2/plc2纯合体主根中生长素的含量逐渐降低 | 第93-94页 |
| 3.5.9 PLC的活性与生长素在根中的分布密切相关 | 第94-95页 |
| 3.5.10 PLC2参与了生长素调节的根毛的发育 | 第95-97页 |
| 3.5.11 PLC2参与了生长素的运输 | 第97-100页 |
| 3.5.12 PLC2基因的缺失直接影响了拟南芥细胞中的Ca~(2+)信号 | 第100-101页 |
| 3.5.13 PLC2基因的缺失改变了拟南芥细胞中生长素、钙离子信号相关基因的转录水平 | 第101-105页 |
| 3.6 小结与讨论 | 第105-110页 |
| 3.6.1 小结 | 第105-106页 |
| 3.6.2 讨论 | 第106-110页 |
| 4 参考文献 | 第110-128页 |
| 5 在读期间发表和整理的文章 | 第128-129页 |
| 6 致谢 | 第129页 |
