| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写索引 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 NDV病原学 | 第13-16页 |
| 1.1.1 病毒的形态特征 | 第13页 |
| 1.1.2 NDV基因组及其编码的蛋白 | 第13-16页 |
| 1.2 新城疫病毒检测技术 | 第16-18页 |
| 1.2.1 荧光定量RT- PCR技术 | 第16-17页 |
| 1.2.2 基因芯片技术 | 第17页 |
| 1.2.3 胶体金试纸 | 第17页 |
| 1.2.4 免疫荧光微球技术 | 第17-18页 |
| 1.3 光纤光栅传感器 | 第18-21页 |
| 1.3.1 光纤光栅的分类 | 第18-19页 |
| 1.3.2 极大角度（>80°）倾斜光纤光栅 | 第19-21页 |
| 第2章 新城疫病毒F基因的原核表达与鉴定 | 第21-37页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要设备 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 NDV-F表达基因的构建 | 第22-26页 |
| 2.2.2 原核表达NDV-F重组质粒并纯化 | 第26-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-35页 |
| 2.3.1 病毒效价 | 第29页 |
| 2.3.2 目的基因PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.3.3 重组质粒pET32a(+)-NDV-F的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 比对测序前后的序列 | 第31页 |
| 2.3.5 重组质粒pET32a(+)-NDV-F的诱导表达及可溶性 | 第31-33页 |
| 2.3.6 重组菌pET32a(+)-NDV-F/BL21(DE3)诱导条件的优化 | 第33-34页 |
| 2.3.7 重组蛋白pET32a(+)-NDV-F纯化 | 第34页 |
| 2.3.8 重组蛋白pET32a(+)-F的Western-Blot鉴定 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 抗新城疫病毒单克隆抗体的制备 | 第37-49页 |
| 3.1 材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验动物及细胞 | 第37页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.4 主要试剂配置 | 第37-38页 |
| 3.2 方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 动物免疫 | 第38页 |
| 3.2.2 最佳包被浓度及血清效价的测定 | 第38-39页 |
| 3.2.3 饲养细胞的制备 | 第39页 |
| 3.2.4 小鼠骨髓瘤细胞SP2/0 的制备 | 第39页 |
| 3.2.5 制备脾细胞 | 第39页 |
| 3.2.6 细胞融合 | 第39-40页 |
| 3.2.7 筛选杂交瘤细胞 | 第40页 |
| 3.2.8 阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第40-41页 |
| 3.2.9 小鼠腹水制备单克隆抗体 | 第41页 |
| 3.2.10 单抗型腹水的纯化 | 第41页 |
| 3.2.11 单克隆抗体的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-48页 |
| 3.3.1 抗原最佳包被浓度的确定 | 第42页 |
| 3.3.2 细胞融合结果 | 第42-43页 |
| 3.3.3 杂交瘤细胞的筛选及亚克隆 | 第43-44页 |
| 3.3.4 单抗的纯化 | 第44-45页 |
| 3.3.5 单抗纯度鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3.6 单抗浓度测定 | 第46页 |
| 3.3.7 亚型鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.8 效价测定 | 第47页 |
| 3.3.9 Western-Blot检测 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 第4章 新城疫病毒免疫传感器检测的初步研究 | 第49-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 抗体及抗原 | 第50页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第50页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第50页 |
| 4.1.4 主要溶液配制 | 第50-51页 |
| 4.2 方法 | 第51-56页 |
| 4.2.1 金黄色葡糖球菌蛋白A的提取 | 第51页 |
| 4.2.2 SPA的纯化及鉴定 | 第51-52页 |
| 4.2.3 检测平台的搭建 | 第52-53页 |
| 4.2.4 Ex-TFG表面洁净化处理 | 第53页 |
| 4.2.5 Ex-TFG表面羟基化 | 第53页 |
| 4.2.6 Ex-TFG表面硅烷化处理 | 第53-54页 |
| 4.2.7 Ex-TFG光纤表面SPA生物敏感膜的制备 | 第54-55页 |
| 4.2.8 抗体的固定与检测 | 第55页 |
| 4.2.9 Ex-TFG免疫传感器对NDV抗原的检测 | 第55页 |
| 4.2.10 Ex-TFG免疫传感器的解离 | 第55页 |
| 4.2.11 Ex-TFG免疫传感器特异性检测 | 第55-56页 |
| 4.2.12 Ex-TFG免疫传感器重复性实验 | 第56页 |
| 4.3 实验结果 | 第56-63页 |
| 4.3.1 SPA蛋白的鉴定结果 | 第56-57页 |
| 4.3.2 Ex-TFG表面修饰 | 第57-58页 |
| 4.3.3 Ex-TFG谐振频谱监测光栅表面的变化 | 第58-59页 |
| 4.3.4 抗体的固定与检测 | 第59-60页 |
| 4.3.5 Ex-TFG免疫传感器对抗原检测 | 第60-61页 |
| 4.3.6 Ex-TFG免疫传感器的解离 | 第61-62页 |
| 4.3.7 Ex-TFG免疫传感器的特异性检测 | 第62-63页 |
| 4.3.8 Ex-TFG免疫传感器重复性测试分析 | 第63页 |
| 4.4 总结 | 第63-65页 |
| 第5章 总结与展望 | 第65-67页 |
| 5.1 全文总结 | 第65页 |
| 5.2 展望 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及取得的研究成果 | 第73-74页 |
