摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写索引 | 第13-15页 |
1 绪论 | 第15-27页 |
1.1 流感病毒的特征 | 第15-17页 |
1.1.1 流感病毒的形态特征 | 第15-16页 |
1.1.2 流感病毒的抗原性变异 | 第16-17页 |
1.2 流感流行病学特征 | 第17-18页 |
1.2.1 H5N1、H9N2型流感的临床表现 | 第17页 |
1.2.2 H5N1、H9N2型流感的流行情况 | 第17-18页 |
1.3 病毒样颗粒 | 第18-20页 |
1.3.1 病毒样颗粒的结构及免疫机制 | 第18-19页 |
1.3.2 病毒样颗粒表达系统 | 第19-20页 |
1.4 流感疫苗的研究进展 | 第20-23页 |
1.4.1 灭活疫苗 | 第20-21页 |
1.4.2 减毒活疫苗 | 第21页 |
1.4.3 DNA疫苗 | 第21-22页 |
1.4.4 亚单位疫苗 | 第22页 |
1.4.5 病毒样颗粒疫苗 | 第22-23页 |
1.5 佐剂 | 第23-24页 |
1.5.1 微球 | 第23-24页 |
1.5.2 脂质体 | 第24页 |
1.6 课题研究内容及意义 | 第24-27页 |
1.6.1 研究内容 | 第24-25页 |
1.6.2 技术路线 | 第25-26页 |
1.6.3 课题研究意义及立项依据 | 第26-27页 |
2 H5N1/H9N2型病毒样颗粒的表达及鉴定 | 第27-41页 |
2.1 实验材料 | 第27-30页 |
2.1.1 主要实验细胞及病毒 | 第27页 |
2.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
2.1.3 实验仪器 | 第28-29页 |
2.1.4 试剂的配制 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-33页 |
2.2.1 Sf9细胞培养 | 第30页 |
2.2.2 重组杆状病毒的增殖 | 第30页 |
2.2.3 重组杆状病毒TCID50测定 | 第30-31页 |
2.2.4 病毒样颗粒的表达及纯化 | 第31页 |
2.2.5 病毒样颗粒的分子鉴定 | 第31-32页 |
2.2.6 VLP血凝效价及HA含量的测定 | 第32-33页 |
2.3 实验结果 | 第33-38页 |
2.3.1 H9N2与H5N1重组杆状病毒的增殖 | 第33页 |
2.3.2 H9N2与H5N1重组杆状病毒TCID50测定 | 第33-34页 |
2.3.3 病毒样颗粒的分子鉴定 | 第34-36页 |
2.3.4 VLP血凝效价及HA含量的测定 | 第36-38页 |
2.4 本章讨论 | 第38-41页 |
3 H5N1/H9N2型二价疫苗的制备与质量检定 | 第41-59页 |
3.1 实验材料 | 第41-44页 |
3.1.1 实验动物 | 第41页 |
3.1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
3.1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
3.1.4 试剂的配制 | 第43-44页 |
3.2 实验方法 | 第44-50页 |
3.2.1 脂质体制备的工艺优化和质量评价标准 | 第44-45页 |
3.2.2 BCA法检测蛋白浓度标准曲线 | 第45-46页 |
3.2.3 脂质体工艺的单因素实验 | 第46页 |
3.2.4 脂质体工艺的正交实验 | 第46-47页 |
3.2.5 疫苗的研制 | 第47-48页 |
3.2.6 二价脂质体VLP疫苗的质量评价 | 第48-49页 |
3.2.7 二价油乳佐剂VLP疫苗质量评价 | 第49页 |
3.2.8 二价微球佐剂VLP疫苗质量评价 | 第49页 |
3.2.9 二价VLP疫苗的无菌试验 | 第49页 |
3.2.10 二价VLP疫苗的安全试验 | 第49-50页 |
3.3 实验结果 | 第50-56页 |
3.3.1 脂质体工艺的单因素实验 | 第50-51页 |
3.3.2 脂质体工艺的正交实验 | 第51-52页 |
3.3.3 二价疫苗的研制 | 第52页 |
3.3.4 二价脂质体VLP疫苗冻干制剂质量评价 | 第52-54页 |
3.3.5 二价油乳佐剂VLP疫苗质量评价 | 第54-55页 |
3.3.6 二价微球佐剂VLP疫苗质量评价 | 第55页 |
3.3.7 二价疫苗的无菌试验 | 第55-56页 |
3.3.8 二价疫苗的安全试验 | 第56页 |
3.4 本章讨论 | 第56-59页 |
4 H5N1/H9N2型二价VLP疫苗的免疫效果评价 | 第59-75页 |
4.1 实验材料 | 第59-61页 |
4.1.1 实验动物及细胞 | 第59页 |
4.1.2 实验试剂 | 第59-60页 |
4.1.3 实验仪器 | 第60页 |
4.1.4 试剂的配制 | 第60-61页 |
4.2 实验方法 | 第61-63页 |
4.2.1 实验动物免疫 | 第61-62页 |
4.2.2 实验动物体液免疫水平测定 | 第62-63页 |
4.2.3 实验动物细胞免疫水平测定 | 第63页 |
4.2.4 统计学处理 | 第63页 |
4.3 实验结果 | 第63-72页 |
4.3.1 实验动物体液免疫水平测定 | 第63-69页 |
4.3.2 实验动物细胞免疫水平测定 | 第69-72页 |
4.4 实验讨论 | 第72-75页 |
5 全文总结 | 第75-77页 |
5.1 全文总结 | 第75-76页 |
5.2 不足之处 | 第76页 |
5.3 后续工作计划 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
附录 | 第83-85页 |
附录 1 ELISA法测鸡血凝素(HA)含量 | 第83-85页 |
个人简历、在校期间发表的学术论文及取得的研究成果 | 第85页 |