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盾壳霉氮代谢调控基因cmareA的功能研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表(Abbreviation)第11-13页
第一章 文献综述第13-26页
    1 核盘菌研究现状第13-14页
        1.1 核盘菌生物学特性第13页
        1.2 菌核病的危害与防治第13-14页
    2 盾壳霉的研究现状第14-19页
        2.1 盾壳霉的生长形态和相关生物学特性第14-15页
        2.2 盾壳霉的生态学特性第15页
        2.3 盾壳霉与核盘菌的互作研究第15-19页
            2.3.1 重寄生作用第15-16页
            2.3.2 抗生作用第16-18页
            2.3.3 草酸毒素降解作用第18-19页
    3 氮源代谢调控机制研究进展第19-24页
        3.1 氮源代谢调控因子第19-21页
        3.2 areA氮源代谢调控因子第21-23页
        3.3 AreA调控氮源代谢的机制(镰孢菌属)第23-24页
    4 研究意义和主要研究内容第24-26页
        4.1 研究意义第24-25页
        4.2 主要研究内容第25-26页
第二章 盾壳霉cmareA基因的克隆与功能分析第26-47页
    1 材料和方法第26-37页
        1.1 试验材料第26-27页
            1.1.1 供试菌株第26页
            1.1.2 主要试剂第26-27页
            1.1.3 主要仪器设备第27页
        1.2 试验方法第27-37页
            1.2.1 核酸提取第27页
            1.2.2 盾壳霉cmareA基因同源序列的克隆第27-28页
            1.2.3 盾壳霉cmareA基因全长及侧翼的克隆第28-31页
            1.2.4 盾壳霉cmareA基因的表达模式第31页
            1.2.5 原生质体的制备第31-32页
            1.2.6 cmareA敲除和互补突变体的获得第32-36页
            1.2.7 cmareA敲除后的生物学特性分析第36-37页
    2 结果与分析第37-46页
        2.1 盾壳霉cmareA基因的全长序列克隆第37-38页
        2.2 盾壳霉cmareA基因序列分析第38-39页
        2.3 盾壳霉cmareA基因的表达模式第39-40页
        2.4 cmareA敲除和互补突变体的筛选第40-42页
        2.5 敲除cmareA后的相关生物学特性第42-46页
            2.5.1 PDA培养基上的菌丝生长速率和产孢量的测定第42-44页
            2.5.2 不同氮源营养条件下菌丝速率的测定第44-46页
    3 讨论第46-47页
第三章 cmareA对盾壳霉重寄生、降解草酸和抗生作用的影响第47-67页
    1 材料和方法第47-53页
        1.1 试验材料第47-48页
            1.1.1 供试菌株第47页
            1.1.2 主要试剂和仪器设备第47-48页
        1.2 试验方法第48-53页
            1.2.1 突变体和互补突变体寄生核盘菌能力检测第48-49页
            1.2.2 盾壳霉重寄生相关酶活性分析第49-52页
            1.2.3 盾壳霉降解草酸盐的定量检测第52-53页
            1.2.4 盾壳霉产生抗真菌物质(AFS)检测第53页
    2 结果与分析第53-65页
        2.1 cmare敲除后对寄生核盘菌菌丝和菌核的影响第53-56页
            2.1.1 cmareA对寄生核盘菌菌丝的影响第53-55页
            2.1.2 cmareA对寄生核盘菌菌核的影响第55-56页
        2.2 cmareA对重寄生相关酶产生的影响第56-58页
            2.2.1 cmareA对胞外蛋白酶产生的影响第56-57页
            2.2.2 cmareA对葡聚糖酶产生的影响第57页
            2.2.3 cmareA对几丁质酶产生的影响第57-58页
        2.3 cmareA对降解草酸能力的影响第58-60页
        2.4 cmareA对产生抗真菌物质的影响第60-64页
        2.5 cmareA和pH对产抗生物质的交互影响第64-65页
    3 讨论第65-67页
第四章 结论和展望第67-69页
    1 结论第67-68页
    2 展望第68-69页
参考文献第69-78页
附录1 试验方法、培养基及试剂第78-90页
附录2 本试验所涉及的引物序列第90-91页
附录3 本试验克隆得到的序列第91-96页
附录4 本试验涉及到的载体第96-98页
致谢第98-99页

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