| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 名词略词表（Abbreviations） | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 植物MAPK信号级联途径组成和分类 | 第12-13页 |
| 1.2 植物MPAK级联途径的鉴定 | 第13-18页 |
| 1.2.1 MAPK途径在生物逆境中的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.2 MAPK途径在非生物逆境中的作用 | 第14-16页 |
| 1.2.3 MAPK途径在植物激素信号转导中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.4 MAPK途径在植物生长发育中的作用 | 第17-18页 |
| 1.3 水稻MAPK途径的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-40页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 培养基 | 第21-24页 |
| 2.1.4 酶与试剂 | 第24页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-40页 |
| 2.2.1 候选基因的克隆 | 第24-28页 |
| 2.2.2 酵母转化 | 第28-29页 |
| 2.2.3 β-半乳糖苷酶活性检测 | 第29-30页 |
| 2.2.4 酵母双杂交验证蛋白互作 | 第30-31页 |
| 2.2.5 亚细胞定位与BiFC | 第31-32页 |
| 2.2.6 原核表达蛋白的诱导与纯化 | 第32-34页 |
| 2.2.7 蛋白激酶的自磷酸化检测 | 第34-35页 |
| 2.2.8 表达载体转化农杆菌 | 第35-36页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的水稻愈伤组织的转化 | 第36-37页 |
| 2.2.10 CTAB法提取水稻DNA | 第37页 |
| 2.2.11 阳性转基因植株的鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.12 野生型和转基因植株萌发期低温处理 | 第38页 |
| 2.2.13 野生型和OsMKK1转基因植株苗期低温处理 | 第38页 |
| 2.2.14 野生型和OsMKK6转基因植株苗期盐害处理 | 第38页 |
| 2.2.15 植物脯氨酸含量和可溶性糖含量测定 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-66页 |
| 3.1 OsMKK1和OsMKK6亚细胞定位 | 第40-42页 |
| 3.1.1 OsMKK1和OsMKK6亚细胞定位载体构建 | 第40-41页 |
| 3.1.2 OsMKK1和OsMKK6在水稻原生质体中的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 3.2 BiFC验证蛋白间互作 | 第42-45页 |
| 3.2.1 BiFC相关载体构建 | 第42-43页 |
| 3.2.2 BiFC | 第43-45页 |
| 3.3 酵母双杂交验证成对互作 | 第45-49页 |
| 3.3.1 酵母双杂交相关载体构建 | 第45-46页 |
| 3.3.2 相关载体转入酵母 | 第46-47页 |
| 3.3.3 酵母双杂交 | 第47-49页 |
| 3.3.4 利用ONPG法测定 β-半乳糖苷酶活性评价蛋白互作强度 | 第49页 |
| 3.4 OsMKK1、OsMKK6、OsMPK3、OsMPK4和OsMPK6蛋白的原核表达 | 第49-54页 |
| 3.4.1 原核表达载体的构建和鉴定 | 第49-51页 |
| 3.4.2 原核表达重组蛋白的诱导和纯化 | 第51-54页 |
| 3.5 激酶活性检测 | 第54-55页 |
| 3.5.1 OsMKK1和OsMKK6自磷酸化活性检测 | 第54-55页 |
| 3.5.2 OsMPK3、OsMPK4和OsMPK6自磷酸化活性检测 | 第55页 |
| 3.6 基因功能分析 | 第55-66页 |
| 3.6.1 OsMKK1和OsMKK6转基因植株阳性的鉴定 | 第55-57页 |
| 3.6.2 超表达OsMKK1转基因水稻耐冷性增强 | 第57-62页 |
| 3.6.3 超表达OsMKK6转基因水稻萌发期耐冷性增强 | 第62-64页 |
| 3.6.4 超表达OsMKK6转基因水稻苗期耐盐性增强 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 4.1 植物MAPK途径的鉴定方法 | 第66-67页 |
| 4.2 植物MAPKK功能的鉴定 | 第67-68页 |
| 4.3 植物MAPK途径蛋白的原核诱导和激酶活性 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
