| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 1 序言 | 第13-27页 |
| 1.1 蓝细菌与光合作用 | 第13-14页 |
| 1.2 捕光系统与藻胆体 | 第14-17页 |
| 1.3 藻胆蛋白和藻胆色素 | 第17-20页 |
| 1.3.1 藻胆蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3.2 藻胆色素 | 第18-19页 |
| 1.3.3 藻胆蛋白的生物合成 | 第19-20页 |
| 1.4 光敏色素的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.4.1 光敏色素的概述 | 第20-21页 |
| 1.4.2 蓝细菌光敏色素 | 第21-22页 |
| 1.5 荧光探针的发展与研究现状 | 第22-24页 |
| 1.5.1 绿色荧光蛋白家族 | 第23-24页 |
| 1.5.2 近红外荧光探针 | 第24页 |
| 1.6 光遗传学分子开关的运用 | 第24-26页 |
| 1.6.1 红光诱导的光遗传学分子开关 | 第25页 |
| 1.6.2 紫外光诱导的光遗传学分子开关 | 第25-26页 |
| 1.6.3 蓝光诱导的光遗传学分子开关 | 第26页 |
| 1.7 本课题研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 2 Slr1393GAF3的分子进化和光谱研究 | 第27-47页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第28-30页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第28页 |
| 2.2.2 培养基与试剂 | 第28-30页 |
| 2.2.3 主要实验仪器 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-37页 |
| 2.3.1 诱变库的建立 | 第30-32页 |
| 2.3.2 感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.3.3 诱变体的筛选 | 第32-33页 |
| 2.3.4 蛋白的表达与纯化 | 第33-34页 |
| 2.3.5 紫外可见光谱及荧光光谱测定 | 第34页 |
| 2.3.6 摩尔消光系数及荧光量子产率计算 | 第34-35页 |
| 2.3.7 可逆光转换测定 | 第35页 |
| 2.3.8 圆二色光谱测定 | 第35页 |
| 2.3.9 荧光寿命测定 | 第35-36页 |
| 2.3.10 定点诱变 | 第36页 |
| 2.3.11 测序质粒预处理 | 第36-37页 |
| 2.4 结果与分析 | 第37-46页 |
| 2.4.1 各诱变体紫外可见吸收及荧光发射光谱分析 | 第37-41页 |
| 2.4.2 圆二色光谱及荧光寿命测定结果 | 第41-43页 |
| 2.4.3 诱变位点的确认及结构分析 | 第43-45页 |
| 2.4.4 定点诱变结果 | 第45-46页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第46-47页 |
| 3 红移核膜连接蛋白ApcE2的研究 | 第47-90页 |
| 3.1 引言 | 第47-48页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第48-50页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第48页 |
| 3.2.2 培养基与试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.3 主要实验仪器 | 第49-50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-57页 |
| 3.3.1 基因的合成与克隆 | 第50页 |
| 3.3.2 蛋白的表达与纯化 | 第50页 |
| 3.3.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定与染色 | 第50-51页 |
| 3.3.4 蛋白产量检测与光谱测定 | 第51页 |
| 3.3.5 荧光量子产率及摩尔消光系数的计算 | 第51-52页 |
| 3.3.6 蛋白pH稳定性检测 | 第52页 |
| 3.3.7 色素的提取 | 第52页 |
| 3.3.8 序列比对与结构预测 | 第52-53页 |
| 3.3.9 缺失诱变体的构建 | 第53页 |
| 3.3.10 融合基因的构建 | 第53-54页 |
| 3.3.11 聚集态的分析 | 第54页 |
| 3.3.12 蛋白与色素的体外重组 | 第54-55页 |
| 3.3.13 荧光显微镜对色素蛋白的成像 | 第55-56页 |
| 3.3.14 定点诱变 | 第56页 |
| 3.3.15 动物细胞表达基因的优化、质粒构建与转染 | 第56-57页 |
| 3.3.16 Western blot | 第57页 |
| 3.4 结果与分析 | 第57-88页 |
| 3.4.1 7335ApcE2的紫外可见吸收及荧光发射光谱分析 | 第57-59页 |
| 3.4.2 蛋白与色素的连接方式分析 | 第59-61页 |
| 3.4.3 结构预测分析及缺失诱变结果 | 第61-71页 |
| 3.4.4 体外重组 | 第71-78页 |
| 3.4.5 蛋白质的稳定性研究结果 | 第78-82页 |
| 3.4.6 蛋白质的聚集态分析 | 第82页 |
| 3.4.7 色素蛋白的显微镜成像 | 第82-83页 |
| 3.4.8 将胆绿素作为发色团的分子进化 | 第83-85页 |
| 3.4.9 蛋白在动物细胞内的表达 | 第85-88页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第88-90页 |
| 4 红移藻胆蛋白ApcF2的研究 | 第90-108页 |
| 4.1 引言 | 第90页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第90-91页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第90页 |
| 4.2.2 培养基与试剂 | 第90页 |
| 4.2.3 主要实验仪器 | 第90-91页 |
| 4.3 实验方法 | 第91-93页 |
| 4.3.1 基因的合成与质粒的构建 | 第91页 |
| 4.3.2 蛋白的表达与纯化 | 第91页 |
| 4.3.3 蛋白诱变体的构建 | 第91页 |
| 4.3.4 蛋白的聚集态分析 | 第91页 |
| 4.3.5 蛋白的稳定性研究 | 第91-92页 |
| 4.3.6 蛋白序列比对与三级结构的模拟 | 第92页 |
| 4.3.7 蛋白的定位表达与显微镜检测 | 第92-93页 |
| 4.3.8 随机诱变 | 第93页 |
| 4.4 结果与分析 | 第93-106页 |
| 4.4.1 7203ApcF2的紫外可见吸收及荧光发射光谱分析 | 第93-95页 |
| 4.4.2 诱变体蛋白的光谱检测 | 第95-99页 |
| 4.4.3 蛋白聚集态分析 | 第99-101页 |
| 4.4.4 蛋白稳定性分析 | 第101页 |
| 4.4.5 显微镜检测结果 | 第101-103页 |
| 4.4.6 随机诱变结果 | 第103-106页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-122页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
