| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩写说明 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·湖羊概况 | 第12页 |
| ·干扰素刺激基因ISG15的研究进展 | 第12-20页 |
| ·ISG15基因结构 | 第12-13页 |
| ·ISG15表达调控 | 第13-15页 |
| ·ISG15修饰系统 | 第15-16页 |
| ·ISG15的突变与其修饰功能的关系 | 第16-17页 |
| ·ISG15在先天免疫及获得性免疫中的作用 | 第17-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-30页 |
| ·试验材料 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·主要化学试剂 | 第22-23页 |
| ·试验动物及采样方法 | 第23页 |
| ·试验方法及步骤 | 第23-30页 |
| 第三章 湖羊ISG15基因克隆及生物信息学分析 | 第30-44页 |
| ·材料与方法 | 第30-33页 |
| ·试验动物及采样方法 | 第30页 |
| ·湖羊ISG15基因的克隆与测序 | 第30-33页 |
| ·湖羊ISG15基因生物信息学分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-40页 |
| ·湖羊ISG15基因克隆 | 第33-34页 |
| ·湖羊ISG15基因生物信息学分析 | 第34-40页 |
| ·讨论 | 第40-44页 |
| ·ISG15基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·ISG15蛋白分析 | 第41-42页 |
| ·绵羊ISG15蛋白基序及功能位点的分析 | 第42-44页 |
| 第四章 湖羊ISG15基因PCR-SSCP检测及其遗传多态性分析 | 第44-62页 |
| ·试验材料与方法 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-57页 |
| ·湖羊ISG15基因PCR-SSCP的引物设计及其PCR扩增 | 第46页 |
| ·ISG15全基因的PCR-SSCP检测与突变区域的测序 | 第46-53页 |
| ·ISG15开放阅读框编码蛋白的多重比对 | 第53-54页 |
| ·湖羊群体ISG15基因SNPs的群体遗传学分析 | 第54-56页 |
| ·湖羊群体ISG15基因SNPs的Hardy-Weinberg平衡检验 | 第56-57页 |
| ·生物信息学方法预测ISG15基因内的SNP对转录因子结合位点的影响 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-62页 |
| ·湖羊ISG15基因突变及其多态性分析 | 第58-59页 |
| ·ISG15基因内的SNP对转录因子结合位点的影响 | 第59-60页 |
| ·湖羊ISG15基因群体遗传结构分析 | 第60-62页 |
| 第五章 Poly Ⅰ:C诱导下湖羊成纤维细胞ISG15的mRNA表达 | 第62-72页 |
| ·试验材料与方法 | 第62-66页 |
| ·试验动物及采样方法 | 第62页 |
| ·试验仪器及试剂 | 第62-63页 |
| ·实时定量PCR引物设计 | 第63页 |
| ·组织块培养法进行成纤维原代细胞的培养 | 第63-64页 |
| ·原代细胞的传代培养和细胞纯化 | 第64页 |
| ·Poly Ⅰ:C诱导成纤维细胞ISG15 mRNA的表达 | 第64页 |
| ·RNA提取与DNA的消化 | 第64-65页 |
| ·实时定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR) | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-69页 |
| ·湖羊个体的成纤维细胞培养与Poly Ⅰ:C诱导 | 第66-67页 |
| ·PolyⅠ:C诱导下湖羊成纤维细胞ISG15 mRNA表达 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| ·Poly Ⅰ:C功能 | 第69页 |
| ·Poly Ⅰ:C诱导不同时相下ISG15基因的相对表达量 | 第69-72页 |
| 第六章 结论 | 第72-74页 |
| ·湖羊ISG15基因克隆及其生物信息学分析 | 第72页 |
| ·湖羊ISG15基因突变及其多态性分析 | 第72页 |
| ·湖羊ISG15基因群体遗传结构分析 | 第72-73页 |
| ·湖羊ISG15基因的诱导表达 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 附录1 湖羊推定ISG15蛋白的InterProScan分析 | 第84-85页 |
| 附录2 湖羊推定ISG15蛋白的ELM分析 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
