| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 动物体内 microRNA 研究进展 | 第12-19页 |
| ·microRNA 形成过程 | 第12页 |
| ·microRNA 相关的蛋白质复合体（miRNP） | 第12-14页 |
| ·已知 microRNA 发挥调控作用的分子机制 | 第14-16页 |
| ·microRNA 导致的翻译抑制 | 第14-15页 |
| ·microRNA 诱导基因活化 | 第15-16页 |
| ·microRNA 在猪体内的作用 | 第16-19页 |
| ·新陈代谢 | 第17页 |
| ·胚胎发育 | 第17页 |
| ·繁殖性能 | 第17-18页 |
| ·精子的形态与活动能力 | 第18页 |
| ·疾病发生 | 第18-19页 |
| 第二章 脂质代谢与成脂相关 microRNA | 第19-22页 |
| ·脂肪沉积 | 第19-20页 |
| ·脂质代谢 | 第20-22页 |
| 第三章 MiR-103 研究进展 | 第22-25页 |
| ·miR-103 的生物学信息 | 第22-23页 |
| ·miR-103 的生物学功能 | 第23-25页 |
| ·miR-103 参与脂质的代谢 | 第23-24页 |
| ·miR-103 参与癌症发生 | 第24页 |
| ·miR-103 参与胰岛素敏感性的调节 | 第24-25页 |
| 第四章 猪 miR-103 腺病毒过表达载体的构建 | 第25-38页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·实验动物与细胞 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂和配方 | 第25-27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·miR-103 的序列查询及同源性比对 | 第27页 |
| ·miR-103 腺病毒质粒载体的构建 | 第27-30页 |
| ·miR-103 前体序列的扩增与回收 | 第27-28页 |
| ·双酶切及回收 | 第28页 |
| ·酶切片段的连接 | 第28-29页 |
| ·连接后质粒转化 DH5α | 第29页 |
| ·重组 pAdTrack-CMV 质粒的小量提取 | 第29-30页 |
| ·重组穿梭质粒的 PCR 鉴定 | 第30页 |
| ·重组穿梭质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·重组穿梭质粒的测序鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒 pAd-miR-103 的构建与鉴定 | 第30-32页 |
| ·线性化及去磷酸化 | 第30-31页 |
| ·PCR 鉴定与酶切鉴定 | 第31页 |
| ·pAd-miR-103 的线性化及乙醇沉淀 | 第31-32页 |
| ·miR-103 腺病毒的包装与扩繁 | 第32-33页 |
| ·293A 细胞的培养 | 第32页 |
| ·pAd-miR-103 的包装 | 第32页 |
| ·腺病毒 Ad- miR-103 的扩增 | 第32-33页 |
| ·miR-103 腺病毒超表达效率检测 | 第33-34页 |
| ·猪原代前体脂肪细胞的获得与培养 | 第33页 |
| ·Ad-miR-103 的 real-time PCR 检测 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·miR-103 的序列查询与同源性比较 | 第34页 |
| ·pre-miR-103 腺病毒超表达载体构建 | 第34-36页 |
| ·pre-miR-103 腺病毒质粒载体构建 | 第35页 |
| ·pre-miR-103 腺病毒的包装与扩繁 | 第35-36页 |
| ·real-time 检测 ssc-miR-103 超表达效率 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第五章 超表达 miR-103 对猪脂肪细胞分化的影响 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·主要试剂和详细配方 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·miR-103 在猪前体脂细肪胞分化过程中的变化趋势 | 第38页 |
| ·Ad-miR-103 侵染后成脂标记基因 mRNA 变化 | 第38-39页 |
| ·Ad-miR-103 侵染后成脂标记基因蛋白表达变化 | 第39-40页 |
| ·油红 O 染色 | 第40页 |
| ·统计学分析 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-42页 |
| ·猪前体脂肪细胞分化过程中本底水平 miR-103 的表达情况 | 第40页 |
| ·成脂标记基因 mRNA 水平变化 | 第40-41页 |
| ·成脂标记基因蛋白表达量变化 | 第41页 |
| ·油红 O 染色 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第六章 miR-103 靶基因验证 | 第43-48页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·microRNA 靶基因的生物信息学预测 | 第44-46页 |
| ·结果 | 第46页 |
| ·miR-103 靶基因的搜索 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 创新点 | 第59-60页 |
| 有待进一步研究的问题 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
