| 导师评阅表 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 论文中常用缩写词英汉对照表 | 第11-12页 |
| 综述 | 第12-25页 |
| 一、动物性别控制相关基因及方法 | 第12-17页 |
| 1.性别控制相关的基因 | 第12-15页 |
| 1.1 Zfy/Zfx 基因 | 第13页 |
| 1.2 Sry 基因 | 第13-14页 |
| 1.3 SOX 基因 | 第14页 |
| 1.4 DAX-1 基因 | 第14-15页 |
| 1.5 WT1 基因 | 第15页 |
| 2.性别控制的方法 | 第15-17页 |
| 2.1 X、Y 精子的分离 | 第15-16页 |
| 2.2 胚胎鉴定法 | 第16页 |
| 2.3 环境控制法 | 第16-17页 |
| 2.4 动物性别控制技术在应用过程中存在的问题及其发展前景 | 第17页 |
| 二 RNA 干扰的原理、机制及其在动物繁殖中的应用 | 第17-22页 |
| 1.RNAi 的发展史 | 第17-18页 |
| 2.RNAi 的干扰过程 | 第18-20页 |
| 3.RNAi 的特点 | 第20页 |
| 4. RNAi 在动物繁殖中的应用 | 第20-22页 |
| 4.1 RNAi 在生殖细胞中的应用 | 第21页 |
| 4.2 RNAi 在胚胎中的应用 | 第21-22页 |
| 5.RNAi 的前景 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-25页 |
| 试验研究 | 第25-54页 |
| 实验一 猪 zfx 基因 shRNA 重组载体的构建 | 第25-38页 |
| 1.材料与方法 | 第26-31页 |
| 1.1 主要仪器 | 第26页 |
| 1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 1.3 方法 | 第26-31页 |
| 2 | 第31-34页 |
| 2.1 目标序列的初步筛选 | 第31-32页 |
| 2.2 重组质粒表达载体的测序鉴定 | 第32-34页 |
| 3. 讨论 | 第34-36页 |
| 3.1 RNAi 的作用原理 | 第34-35页 |
| 3.2 siRNA 的设计原则 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 实验二 zfx 基因 shRNA 重组载体细胞水平 RNA 干扰试验 | 第38-49页 |
| 1.材料与方法 | 第38-40页 |
| 1.1 主要试剂 | 第38-39页 |
| 1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 1.3 主要 PCR 引物 | 第39-40页 |
| 1.4 主要实验动物 | 第40页 |
| 2. 主要实验方法 | 第40-43页 |
| 2.1 重组表达质粒的大量制备与纯化 | 第40页 |
| 2.2 生精细胞的分离与培养 | 第40-41页 |
| 2.3 重组表达质粒转染生精细胞 | 第41-42页 |
| 2.4 测定生精细胞 zfx 基因 mRNA 表达水平 | 第42-43页 |
| 3. 结果与分析 | 第43-46页 |
| 3.1 重组表达质粒转染生精细胞 | 第43-44页 |
| 3.2 zfx 基因 mRNA 表达水平 | 第44-46页 |
| 4.讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 实验三 zfx 基因 shRNA 重组载体的体内 RNA 干扰试验 | 第49-54页 |
| 1.材料与方法 | 第49-50页 |
| 1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
| 1.3 主要实验材料 | 第50页 |
| 1.4 重组表达质粒的大量制备与纯化 | 第50页 |
| 1.5 猪体内 zfx 基因 RNAi 实验 | 第50页 |
| 2.结果与分析 | 第50-51页 |
| 3.讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
