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家蚕微孢子虫Met-AP2基因验证与烟曲霉素治疗效果检测

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
论文缩写词中英文对照第7-11页
1.前言第11-28页
    1.1 微孢子虫概述第11-15页
        1.1.1 微孢子虫结构第11-12页
        1.1.2 微孢子虫基因组学研究进展第12-15页
    1.2 家蚕微孢子虫病的发病及流行第15-16页
        1.2.1 家蚕微孢子虫发病及症状第15-16页
        1.2.2 家蚕微孢子虫病的流行第16页
    1.3 微孢子虫病的诊断第16-18页
        1.3.1 微孢子虫病病原染色鉴别第16-17页
        1.3.2 微孢子虫病的免疫学方法诊断第17页
        1.3.3 微孢子虫病的分子生物学方法诊断第17页
        1.3.4 微孢子虫病的LAMP方法诊断第17-18页
    1.4 微孢子虫的治疗第18-21页
        1.4.1 微孢子虫的物理治疗第18-19页
        1.4.2 微孢子虫的化学治疗第19-21页
    1.5 烟曲霉素第21-22页
        1.5.1 烟曲霉素的发现及结构第21页
        1.5.2 烟曲霉素的用途及治疗作用进展第21-22页
    1.6 Met-AP2基因的研究概述第22-25页
        1.6.1 Met-AP的发现第22页
        1.6.2 Met-AP的简介第22-23页
        1.6.3 Met-AP2的结构特点第23-24页
        1.6.4 Met-AP2的功能及进展第24-25页
    1.7 烟曲霉素抑制Met-AP2的作用机理第25-26页
    1.8 本论文研究意义及内容第26-28页
2. 材料与方法第28-44页
    2.1 材料第28-31页
        2.1.1 生物材料第28-29页
        2.1.2 主要试剂及药品第29-30页
        2.1.3 主要仪器第30页
        2.1.4 软件及相关在线预测网站第30-31页
    2.2 方法第31-44页
        2.2.1 生物材料的分离、纯化、核酸提取第31-33页
        2.2.2 家蚕微孢子虫Met-AP2基因注释和功能预测第33-34页
        2.2.3 家蚕微孢子虫Met-AP2基因引物的设计第34页
        2.2.4 不同昆虫微孢子虫Met-AP2基因的PCR扩增第34-35页
        2.2.5 微孢子虫Met-AP2基因克隆重组质粒的构建及测序分析第35-36页
        2.2.6 家蚕微孢子虫Met-AP2基因系统发育分析第36页
        2.2.7 家蚕微孢子虫Met-AP2基因原核表达第36-40页
        2.2.8 家蚕微孢子虫Met-AP2基因LAMP方法建立第40-44页
3 结果与分析第44-78页
    3.1 烟曲霉素对家蚕微孢子虫病治疗结果第44-48页
        3.1.1 烟曲霉素对家蚕微孢子虫病治疗表征观察结果第44-46页
        3.1.2 烟曲霉素对家蚕微孢子虫病治疗治愈率及对家蚕影响的结果第46-48页
    3.2 家蚕微孢子虫(广东株)转录组的Met-AP2基因测序结果的PCR验证第48-57页
        3.2.1 家蚕微孢子虫Met-AP2基因引物筛选验证第48-55页
        3.2.2 家蚕微孢子虫(广东株)转录组的Met-AP2基因测序结果验证第55-56页
        3.2.3 烟曲霉素对家蚕微孢子虫病治疗前后PCR扩增结果第56-57页
    3.3 家蚕微孢子虫Met-AP2基因的生物信息学及分析第57-63页
        3.3.1 家蚕微孢子虫Met-AP2蛋白的结构分析第57-59页
        3.3.2 家蚕微孢子虫Met-AP2基因与其他物种Met-AP2基因相似性及进化树分析第59-63页
    3.4 家蚕微孢子虫Met-AP2蛋白的原核表达第63-68页
        3.4.1 大肠杆菌克隆载体的构建和鉴定第63-64页
        3.4.2 大肠杆菌重组表达载体pET-28A–met的构建和鉴定第64-65页
        3.4.3 融合蛋白诱导结果第65-66页
        3.4.4 融合蛋白的镍琼脂糖亲和层析纯化第66-67页
        3.4.5 融合蛋白的鉴定及浓度测定第67-68页
    3.5 基于Met-AP2靶基因的LAMP方法在烟曲霉素治疗效果检测上的应用第68-78页
        3.5.1 基于Met-AP2靶基因的LAMP引物的筛选结果第68-70页
        3.5.2 基于Met-AP2靶基因的LM1引物组反应条件的优化第70-72页
        3.5.3 基于Met-AP2靶基因的LM1引物组的特异性及灵敏度检测第72-77页
        3.5.4 基于Met-AP2靶基因的LM1引物组的烟曲霉素治疗效果的检测第77-78页
4 讨论与结论第78-86页
    4.1 讨论第78-85页
        4.1.1 家蚕微孢子虫病的症状及烟曲霉素治疗情况研究第78-79页
        4.1.2 家蚕微孢子虫Met-AP2基因研究第79-83页
        4.1.3 家蚕微孢子虫Met-AP2蛋白研究第83-84页
        4.1.4 家蚕微孢子虫病治疗效果LAMP检测研究第84-85页
        4.1.5 后续工作第85页
    4.2 结论第85-86页
致谢第86-87页
参考文献第87-99页
附录A第99-107页
附录B第107-109页
攻读学位期间的学术成果第109页

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