| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 蓝藻概述 | 第11页 |
| 1.2 蓝藻遗传学研究进展 | 第11-15页 |
| 1.3 鱼腥藻PCC 7120的生物学特性 | 第15-18页 |
| 1.3.1 鱼腥藻PCC 7120简述 | 第15页 |
| 1.3.2 鱼腥藻PCC 7120培养方式 | 第15-16页 |
| 1.3.3 鱼腥藻PCC 7120细胞形态 | 第16-17页 |
| 1.3.4 鱼腥藻PCC 7120基因工程研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 绿色荧光蛋白及其在分子生物学研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4.1 绿色荧光蛋白(GFP)概述 | 第18-19页 |
| 1.4.2 绿色荧光蛋白(GFP)发光机制 | 第19页 |
| 1.5 多肽动物饲料添加剂及其在鱼腥藻PCC 7120中的应用 | 第19-20页 |
| 1.5.1 多肽动物饲料添加剂概述 | 第19-20页 |
| 1.5.2 多肽动物饲料添加剂在鱼腥藻PCC 7120中的应用 | 第20页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-44页 |
| 2.1 材料 | 第21-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.3 目的基因及其结构序列 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要引物 | 第23页 |
| 2.1.5 培养基与主要溶液 | 第23-29页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-44页 |
| 2.2.1 表达质粒pHEP130构建 | 第29-35页 |
| 2.2.2 大肠杆菌表达质粒pHEP130稳定性验证 | 第35-36页 |
| 2.2.3 三亲接合转移转化鱼腥藻PCC 7120 | 第36-37页 |
| 2.2.4 转基因鱼腥藻PCC 7120表达质粒稳定性验证 | 第37-38页 |
| 2.2.5 转基因鱼腥藻PCC 7120生长曲线 | 第38页 |
| 2.2.6 转基因鱼腥藻PCC 7120生物量测定 | 第38页 |
| 2.2.7 转基因鱼腥藻PCC 7120蛋白含量测定 | 第38-39页 |
| 2.2.8 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白诱导表达 | 第39页 |
| 2.2.9 转基因鱼腥PCC 7120融合蛋白提取 | 第39-40页 |
| 2.2.10 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白浓缩 | 第40页 |
| 2.2.11 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白Ni柱纯化 | 第40-41页 |
| 2.2.12 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白SDS-PAGE电泳 | 第41-42页 |
| 2.2.13 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白TEV酶酶切鉴定 | 第42页 |
| 2.2.14 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白Western-Blot免疫印迹杂交 | 第42-43页 |
| 2.2.15 转基因鱼腥藻 PCC 7120 生长条件初步优化 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-67页 |
| 3.1 表达质粒的构建及检验 | 第44-46页 |
| 3.2 大肠杆菌表达质粒pHEP130质粒稳定性验证 | 第46-47页 |
| 3.3 转基因鱼腥藻PCC 7120阳性克隆筛选纯化 | 第47-50页 |
| 3.4 转基因鱼腥藻PCC 7120表达质粒稳定性研究 | 第50-51页 |
| 3.5 转基因鱼腥藻PCC 7120生长曲线 | 第51-53页 |
| 3.6 转基因鱼腥藻PCC 7120不同破壁方法蛋白提取比较 | 第53-54页 |
| 3.7 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白电泳分离 | 第54-55页 |
| 3.8 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白诱导表达 | 第55-56页 |
| 3.9 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白Ni柱纯化 | 第56-58页 |
| 3.10 转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白TEV酶切鉴定 | 第58-59页 |
| 3.11 转基因鱼腥藻PCC 7120生长条件初步优化 | 第59-67页 |
| 3.11.1 TT PCC 7120和WT PCC 7120生长曲线 | 第59页 |
| 3.11.2 BG -11和AA/8N培养下转基因鱼腥藻PCC 7120生长曲线 | 第59-60页 |
| 3.11.3 种子对转基因鱼腥藻PCC 7120生长影响 | 第60-62页 |
| 3.11.4 温度对转基因鱼腥藻PCC 7120生长影响 | 第62页 |
| 3.11.5 pH对转基因鱼腥藻PCC 7120生长影响 | 第62-63页 |
| 3.11.6 光照对转基因鱼腥藻PCC 7120生长影响 | 第63-64页 |
| 3.11.7 转基因鱼腥藻PCC 7120生长培养基C、N源优化 | 第64-65页 |
| 3.11.8 转基因鱼腥藻PCC 7120生长优化条件下的蛋白表达 | 第65-67页 |
| 4 讨论与结论 | 第67-70页 |
| 4.1 讨论 | 第67-69页 |
| 4.1.1 表达质粒构建与稳定性验证 | 第67-68页 |
| 4.1.2 融合蛋白的提取、纯化与鉴定 | 第68页 |
| 4.1.3 优化培养条件下的转基因鱼腥藻PCC 7120融合蛋白表达 | 第68-69页 |
| 4.2 结论 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
