| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 略词语表(Abbreviation) | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 引言 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-30页 |
| 2.1 样品采集及主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.4 溶液和试剂配制 | 第21页 |
| 2.1.5 数据分析软件 | 第21页 |
| 2.2 DNA提取与检测 | 第21-22页 |
| 2.2.1 猪耳组织DNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 DNA浓度检测 | 第22页 |
| 2.3 目标片段的扩增及检测 | 第22-23页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第22页 |
| 2.3.2 目标片段的扩增 | 第22-23页 |
| 2.3.3 1%的凝胶电泳检测 | 第23页 |
| 2.4 PCR产物纯化和基因型筛选 | 第23-24页 |
| 2.5 pGL3-Basic-THRSP-promoter重组质粒的建立 | 第24-26页 |
| 2.5.1 pGL3-Basic载体和目的片段PCR纯化产物双酶切 | 第24页 |
| 2.5.2 双酶切产物的纯化 | 第24页 |
| 2.5.3 连接反应 | 第24-25页 |
| 2.5.4 连接产物转化感受态细胞 | 第25页 |
| 2.5.5 菌液PCR鉴定 | 第25页 |
| 2.5.6 重组质粒提取 | 第25-26页 |
| 2.5.7 重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| 2.6 293T细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.6.1 293T细胞的复苏 | 第26-27页 |
| 2.6.2 台盼蓝染色细胞计数 | 第27页 |
| 2.6.3 细胞传代 | 第27页 |
| 2.7 重组质粒的细胞转染 | 第27-28页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR验证 | 第28页 |
| 2.9 统计分析 | 第28-30页 |
| 2.9.1 基因频率计算方法 | 第28-29页 |
| 2.9.2 双萤光素酶检测及方差分析 | 第29页 |
| 2.9.3 不同类型猪基因频率分布 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 3.1 THRSP基因启动子片段的PCR扩增结果 | 第30页 |
| 3.2 目的片段的序列及其SNPs | 第30-31页 |
| 3.3 不同类型猪THRSP基因启动子SNP分布特点 | 第31-33页 |
| 3.4 不同启动子的双报告基因表达结果 | 第33-34页 |
| 3.4.1 构建双萤光素酶报告基因重组质粒 | 第33页 |
| 3.4.2 不同启动子的双报告基因表达结果 | 第33-34页 |
| 3.5 启动子变异与THRSP基因表达的关联性 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| 4.1 猪脂肪沉积 | 第35-36页 |
| 4.2 启动子SNP位点与基因表达调控的关系 | 第36-37页 |
| 4.3 不同类型猪的基因频率的分布 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
