摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
1.1 宿主限制因子Tetherin简介 | 第11-13页 |
1.1.1 宿主限制因子及其功能 | 第11-12页 |
1.1.2 宿主限制因子Tetherin的结构与功能 | 第12-13页 |
1.2 HIV-1 Vpu拮抗宿主限制因子Tetherin的相关机制 | 第13-18页 |
1.2.1 HIV-1 Vpu简介 | 第13-15页 |
1.2.2 HIV-1 Vpu对宿主限制因子Tetherin的拮抗作用 | 第15-18页 |
1.3 论文设计与实验方案 | 第18-22页 |
1.3.1 论文目的 | 第18-19页 |
1.3.2 论文设计方案 | 第19-22页 |
第二章 实验材料和方法 | 第22-32页 |
2.1 材料与试剂 | 第22-25页 |
2.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-32页 |
2.3.1 质粒构建 | 第26-27页 |
2.3.2 细胞培养及转染 | 第27页 |
2.3.3 蛋白电泳与免疫印迹 | 第27-28页 |
2.3.4 流式细胞仪分析 | 第28页 |
2.3.5 细胞内游离钙离子浓度的测定 | 第28-29页 |
2.3.6 病毒的收集及含量测定 | 第29页 |
2.3.7 酪氨酸磷酸化修饰测定 | 第29页 |
2.3.8 高压冷冻电镜观测 | 第29-30页 |
2.3.9 免疫共沉淀 | 第30页 |
2.3.10 荧光素酶报告基因检测 | 第30页 |
2.3.11 分光光度仪检测 | 第30-31页 |
2.3.12 荧光定量PCR | 第31-32页 |
第三章 实验结果 | 第32-55页 |
3.1 细胞内钙离子浓度对Vpu拮抗Tetherin过程的影响 | 第32-43页 |
3.1.1 稳定表达Vpu对细胞内钙离子浓度的影响 | 第32-37页 |
3.1.2 抑制VDCC对Vpu促进细胞内钙离子浓度上升能力的影响 | 第37-41页 |
3.1.3 沉默VDCC对Vpu促进细胞内钙离子浓度上升能力的影响 | 第41-43页 |
3.1.4 小结 | 第43页 |
3.2 钙离子在Vpu干扰Tetherin病毒出芽部位的识别和定位过程中的影响 | 第43-48页 |
3.2.1 病毒出芽时Gag的多聚化和诱导膜曲率变化情况 | 第44-46页 |
3.2.2 Tetherin、Gag以及Vpu的相互作用 | 第46-47页 |
3.2.3 小结 | 第47-48页 |
3.3 钙离子在Vpu抑制NF-κB信号传导活性及影响Tetherin自身磷酸化过程中的影响 | 第48-50页 |
3.3.1 钙离子在Vpu抑制NF-κB信号传导活性过程中的作用 | 第48-49页 |
3.3.2 钙离子在Vpu影响Tetherin自身磷酸化过程中的作用 | 第49-50页 |
3.3.3 小结 | 第50页 |
3.4 基质金属酶及弗林蛋白酶对Vpu拮抗Tetherin过程中的影响以及钙离子在此过程当中可能的作用 | 第50-55页 |
3.4.1 Vpu在Tetherin抑制MMPs过程中的作用探究 | 第50-52页 |
3.4.2 Vpu与Tetherin在基因水平与蛋白水平对Furin蛋白酶的调控 | 第52-54页 |
3.4.3 小结 | 第54-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
作者简介 | 第65页 |
在学期间主要科研成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |