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地鳖纤溶活性蛋白(EFP)抗肿瘤活性及其诱导肿瘤凋亡作用研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
缩写字母索引第7-14页
第一章 绪论第14-32页
   ·地鳖的概述第14-15页
   ·地鳖的研究与利用现状第15-20页
     ·地鳖纤溶活性成分的研究第15-17页
     ·地鳖抗菌能力的研究第17-18页
     ·地鳖抗血栓的研究第18-20页
   ·中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展第20-26页
     ·肿瘤第20-22页
     ·中药诱导肿瘤细胞凋亡第22-23页
     ·细胞凋亡的诸多表现第23-24页
     ·细胞凋亡的国内外研究进展第24-26页
   ·血管生成与肿瘤治疗研究进展第26-30页
     ·血管生成的概述第26-27页
     ·肿瘤新生血管生成的过程与原因第27页
     ·肿瘤新生血管生成与内皮细胞的关系第27-28页
     ·肿瘤的成长与血管的关系第28页
     ·肿瘤治疗的新方法——抑制血管内皮细胞增殖第28-29页
     ·中药抑制肿瘤血管生成研究第29-30页
   ·课题研究的意义和内容第30-32页
     ·课题研究的意义第30-31页
     ·课题研究的内容第31-32页
第二章 实验方法第32-57页
   ·实验材料第32-34页
     ·主要实验材料和试剂第32-33页
     ·主要仪器第33-34页
   ·实验方法第34-57页
     ·地鳖纤溶活性蛋白的粗提取第34-38页
     ·离子交换层析纯化地鳖纤溶活性蛋白第38-39页
     ·亲和层析纯化地鳖纤溶活性蛋白第39-44页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子第44-46页
     ·酶活力与米氏常数的测定第46-47页
     ·细胞的培养与保存第47-48页
     ·地鳖蛋白对人肿瘤及血管内皮细胞直接用药MTT试验第48-49页
     ·地鳖蛋白含药血清对人肿瘤血管内皮细胞用药MTT试验第49-51页
     ·Annexin V-FITC/PI检测EFP含药血清对细胞凋亡第51-52页
     ·流式细胞术检测EFP对细胞周期的影响第52-53页
     ·免疫组织化学法检测细胞凋亡Bcl-2、Bax基因第53-57页
第三章 实验结果第57-74页
   ·EFP分离纯化与成分测定(离子交换层析)第57-58页
   ·EFP纯度与分子量测定第58-59页
   ·亲和层析纯化EFP第59-60页
   ·地鳖纤溶活性蛋白酶活力第60-61页
   ·以BAEE为底物测米氏常数第61-62页
   ·EFP直接用药和EFP含药血清对A549细胞增殖的影响第62-63页
   ·EFP直接用药和EFP含药血清对HepG-2细胞增殖的影响第63-64页
   ·EFP直接用药和EFP含药血清对MCF-7细胞增殖的影响第64-65页
   ·EFP直接用药和EFP含药血清对HUVEC细胞增殖的影响第65-67页
   ·Annexin V-FITC/PI荧光双染色法检测A549细胞凋亡第67-68页
   ·EFP阻滞A549细胞周期及诱导凋亡出现第68-70页
   ·免疫组织化学法检测A549和HUVEC细胞Bax、Bcl-2基因第70-74页
     ·免疫组化法检测A549细胞凋亡Bax、Bcl-2基因第71-72页
     ·免疫组化法检测HUVEC细胞凋亡Bax、Bcl-2基因第72-74页
第四章 讨论第74-78页
   ·EFP纯化及其性质结果讨论第74页
   ·EFP对肿瘤细胞增殖抑制结果讨论第74-76页
   ·EFP诱导A549细胞凋亡结果讨论第76-77页
   ·A549细胞凋亡因子Bax、Bcl-2检测结果讨论第77页
   ·EFP对HUVEC细胞增殖及凋亡因子Bax、Bcl-2检测结果讨论第77-78页
小结第78-79页
主要创新点第79-80页
参考文献第80-85页
攻读硕士学位期间发表论文第85-87页
致谢第87页

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