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结核分枝杆菌ESAT-6样蛋白Rv3904c(EsxE)在胁迫和免疫中的功能

缩略词第7-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第1章 综述 ESAT-6 家族蛋白在MTB致病中的功能第12-21页
    1 ESAT-6 家族蛋白的结构特征第13-14页
    2 ESAT-6 在MTB感染巨噬细胞中的功能第14-15页
        2.1 ESAT-6 的溶菌作用第14页
        2.2 ESAT-6 介导巨噬细胞激活第14-15页
    3 ESAT-6 与宿主细胞信号通路之间的关系第15-17页
        3.1 MAPK途径第15页
        3.2 ESAT-6 参与TCR(T-cell receptor)信号途径第15-16页
        3.3 ESAT-6 影响TLR-NF-ΚB的信号整合第16页
        3.4 ESAT-6 调节粘着斑通路相关基因第16-17页
    4 ESAT-6 影响细胞因子的表达第17页
    5 ESAT-6 的其他功能第17-18页
    6 ESAT-6 的应用第18-21页
        6.1 诊断试剂第18-19页
        6.2 疫苗第19-20页
        6.3 药物靶标第20-21页
第2章 前言第21-23页
第3章 实验材料和方法第23-35页
    3.1 实验材料第23-25页
        3.1.1 实验菌株、载体和细胞第23页
        3.1.2 培养基及培养条件第23-24页
        3.1.3 主要试剂第24-25页
        3.1.4 主要仪器第25页
    3.2 实验方法第25-35页
        3.2.1 结核分枝杆菌Rv3904c基因的扩增第25页
        3.2.2 Rv3904c PCR产物回收第25-26页
        3.2.3 制备大肠杆菌感受态细胞第26页
        3.2.4 大肠杆菌的转化第26页
        3.2.5 Rv3904c基因与T载质粒的构建第26页
        3.2.6 重组质粒提取第26-27页
        3.2.7 Rv3904c-p ALACE重组质粒的构建第27页
        3.2.8 Rv3904c重组耻垢分枝杆菌的构建第27-28页
        3.2.9 重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达验证第28-29页
        3.2.10 Rv3904c蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的亚细胞定位分析第29-30页
        3.2.11 Rv3904c重组蛋白对宿主菌生物膜形成的影响——结晶紫染色法第30页
        3.2.12 重组耻垢分枝杆菌 Ms-Rv3904c 生长曲线的测定第30页
        3.2.13 重组耻垢分枝杆菌Ms-Rv3904c对SDS耐受的影响第30页
        3.2.14 体外模拟重组耻垢分枝杆菌Ms-Rv3904c在不同p H条件下的存活率第30-31页
        3.2.15 重组耻垢分枝杆菌Ms-Rv3904c对抗生素耐药的影响第31页
        3.2.16 重组菌侵染巨噬细胞存活率检测第31-32页
        3.2.17 定量RT-PCR检测重组菌Ms-Rv3904c侵染巨噬细胞后相关因子的转录水平第32-35页
第4章 结果与分析第35-45页
    4.1 生物信息学分析Rv3904c基因在分枝杆菌中是保守存在的第35-36页
    4.2 成功构建重组质粒Rv3904c-p ALACE第36页
    4.3 构建重组耻垢分枝杆菌Ms-Rv3904c第36-37页
    4.4 Rv3904c蛋白在重组耻垢分枝杆菌中成功表达第37页
    4.5 Rv3904c蛋白定位于细胞壁第37-38页
    4.6 Rv3904c蛋白不影响重组菌的生物膜形成第38-39页
    4.7 Rv3904c蛋白不影响重组菌Ms-Rv3904c的生长第39页
    4.8 Rv3904c蛋白增强重组菌Ms-Rv3904c对表面活性物质SDS的耐受第39-40页
    4.9 Rv3904c对重组菌在酸性条件下的存活没有影响第40-41页
    4.10 Rv3904c蛋白增加重组分枝杆菌对四种抗生素(NOR,INH,VAN,OFL)敏感性第41-42页
    4.11 Rv3904c有利于重组耻垢分枝杆菌在巨噬细胞中的存活第42页
    4.12 Rv3904c蛋白下调RAW264.7细胞感染后细胞因子的表达第42-43页
    4.13 Rv3904c过表达对特异性诱导增强THP-1细胞感染早期免疫调控因子的表达第43-45页
第5章 结论与展望第45-48页
    5.1 实验结论第45页
    5.2 讨论与分析第45-46页
    5.3 展望第46-48页
参考文献第48-55页
致谢第55-57页
在学期间发表文章第57页

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