| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表（Abbreviation） | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 副猪嗜血杆菌研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 副猪嗜血杆菌病概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 副猪嗜血杆菌致病机制 | 第12-14页 |
| 1.1.3 副猪嗜血杆菌病防控 | 第14-16页 |
| 1.2 细胞致死膨胀毒素研究进展 | 第16-24页 |
| 1.2.1 CDT的结构和各亚基功能 | 第17页 |
| 1.2.2 CDT对细胞的毒性作用 | 第17-21页 |
| 1.2.3 CDT对动物的致病作用 | 第21-23页 |
| 1.2.4 副猪嗜血杆菌中CDT小结 | 第23-24页 |
| 2 目的与意义 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 3.1.1 菌株、载体、细胞和实验动物 | 第25页 |
| 3.1.2 试剂和试剂盒 | 第25页 |
| 3.1.3 培养基及抗生素的配制 | 第25-26页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第26-27页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.6 引物 | 第28页 |
| 3.2 试验方法 | 第28-41页 |
| 3.2.1 pK18-cdt1UGD和pK18-cdt2UKD自杀性质粒的构建 | 第28-35页 |
| 3.2.2 cdt基因缺失株的构建 | 第35页 |
| 3.2.3 cdt基因缺失株的鉴定 | 第35-38页 |
| 3.2.4 生长曲线的绘制 | 第38页 |
| 3.2.5 CDT对PK-15 细胞的毒性试验（细胞形态观察） | 第38-39页 |
| 3.2.6 CDT对PK-15 细胞的毒性试验（LDH活性测定） | 第39-40页 |
| 3.2.7 CDT对 3D4/2 细胞的抗吞噬作用 | 第40页 |
| 3.2.8 CDT对仔猪的致病作用 | 第40-41页 |
| 4 结果与分析 | 第41-60页 |
| 4.1 pK18-cdt1UGD和pK18-cdt2UKD自杀性质粒的构建 | 第41-43页 |
| 4.2 cdt基因缺失株的构建 | 第43页 |
| 4.3 cdt基因缺失株的鉴定 | 第43-47页 |
| 4.3.1 PCR鉴定缺失株 | 第43-45页 |
| 4.3.2 Southern blot鉴定缺失株 | 第45-46页 |
| 4.3.3 DNA测序鉴定缺失株 | 第46-47页 |
| 4.4 生长曲线的绘制 | 第47页 |
| 4.5 CDT对PK-15 细胞的毒性试验 | 第47-51页 |
| 4.5.1 细胞毒性之细胞形态的观察 | 第47-51页 |
| 4.5.2 细胞毒性之LDH活性的检测 | 第51页 |
| 4.6 CDT对 3D4/2 细胞的抗吞噬作用 | 第51-52页 |
| 4.7 CDT对仔猪的致病作用 | 第52-60页 |
| 4.7.1 攻毒前仔猪H. parasuis抗体检测 | 第52-53页 |
| 4.7.2 仔猪攻毒后存活情况 | 第53页 |
| 4.7.3 仔猪攻毒后临床症状 | 第53-55页 |
| 4.7.4 仔猪攻毒后剖检病变 | 第55-58页 |
| 4.7.5 仔猪攻毒后组织分菌情况 | 第58-59页 |
| 4.7.6 仔猪攻毒后病理组织切片观察 | 第59-60页 |
| 4.7.7 CDT对仔猪致病作用小结 | 第60页 |
| 5 讨论 | 第60-63页 |
| 5.1 自然转化法获取H. parasuis基因缺失突变株 | 第60页 |
| 5.2 CDT对PK-15 细胞具有毒性作用 | 第60-61页 |
| 5.3 CDT与H. parasuis抗吞噬作用相关 | 第61页 |
| 5.4 CDT对仔猪具有一定的致病作用 | 第61-63页 |
| 6 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
