| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第10-27页 |
| 一、Rho GTPases | 第10-13页 |
| 二、Rho GDIs | 第13-21页 |
| 三、Rho GDI的调节因子 | 第21-24页 |
| 四、Rho GTPases间通过RhoGDIs相互干扰 | 第24-25页 |
| 五、本文研究内容及意义 | 第25-27页 |
| 实验材料与方法 | 第27-42页 |
| 一、实验材料 | 第27-30页 |
| (一)细胞 | 第27页 |
| (二)抗体 | 第27页 |
| (三)质粒 | 第27页 |
| (四)主要试剂 | 第27-28页 |
| (五)主要仪器 | 第28页 |
| (六)溶液配制 | 第28-30页 |
| 二、实验方法 | 第30-42页 |
| (一)GST Pull-down assay | 第30-31页 |
| (二)Western Blot实验 | 第31页 |
| (三)大肠杆菌感受态转化 | 第31-32页 |
| (四)制备全细胞裂解液 | 第32页 |
| (五)IP(免疫沉淀) | 第32页 |
| (六)TRIzol法提总RNA | 第32-33页 |
| (七)逆转录 | 第33页 |
| (八)慢病毒包装(293T细胞) | 第33-34页 |
| (九)Transwell实验 | 第34页 |
| (十)细胞计数 | 第34-35页 |
| (十一)细胞培养 | 第35-37页 |
| (十二)pLKO.1 shRNA病毒质粒载体构建 | 第37-39页 |
| (十三)GST融合蛋白载体的构建(GST-RhoGDIα) | 第39-42页 |
| 实验结果 | 第42-55页 |
| 一、Rho GTPases和RhoGDIs在粒样细胞和淋巴样细胞中的表达水平分析 | 第42-43页 |
| 二、Rho GTPases在粒样细胞和淋巴样细胞中的活化起始点的分析 | 第43-50页 |
| 三、干涉RhoGDIs后细胞内RhoGTPases表达水平显著下调,细胞迁移能力减弱 | 第50-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |