缩略语表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第10-14页 |
材料和方法 | 第14-30页 |
1. 实验材料 | 第14-21页 |
1.1 化学药品与制剂 | 第14-16页 |
1.2 仪器设备 | 第16-18页 |
1.3 实验溶液配方 | 第18-21页 |
1.4 研究对象 | 第21页 |
2. 实验方法 | 第21-30页 |
2.1 细胞培养 | 第21-22页 |
2.2 建立氧化应激模型-筛选H_2O_2的处理浓度 | 第22-23页 |
2.3 Western blot检测H_2O_2处理细胞后Cyp-D表达情况 | 第23-25页 |
2.4 H_2O_2处理N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理的原代角质形成细胞后Cyp-D表达情况检测 | 第25页 |
2.5 肿瘤坏死因子α(TNFα)处理原代角质形成细胞后Cyp- D表达情况检测 | 第25页 |
2.6 Cyp-D sh RNA慢病毒转染形成Cyp-D沉默的原代角质形成细胞 | 第25-26页 |
2.7 H_2O_2处理Cyp-D基因沉默的原代角质形成细胞 | 第26页 |
2.8 细胞凋亡检测(PI染色) | 第26页 |
2.9 pSuper-puro-Cyp-D构建及转染 | 第26-27页 |
2.10 MTT法、PI法检测H_2O_2处理Cyp-D基因沉默的原代角质形成细胞后的存活情况 | 第27-28页 |
2.11 环孢素A(CsA)预处理原代角质形成细胞 | 第28页 |
2.12 细胞集落生成计数 | 第28-29页 |
2.13 数据统计分析 | 第29-30页 |
结果 | 第30-38页 |
1. 统计筛选H_2O_2刺激浓度 | 第30页 |
2. H_2O_2刺激原代角质形成细胞亲环素D(Cyp-D)表达水平升高 | 第30-31页 |
3. Cyp-D基因沉默降低H_2O_2诱导的皮肤角质形成细胞死亡 | 第31-33页 |
4. 环孢素A(CsA)抑制H_2O_2诱导皮肤角质形成细胞死亡 | 第33-36页 |
5. 原代角质形成细胞Cyp-D过表达引起自发性细胞死亡 | 第36-38页 |
讨论 | 第38-39页 |
结论 | 第39页 |
参考文献 | 第39-42页 |
综述 | 第42-49页 |
参考文献 | 第47-49页 |
致谢 | 第49页 |