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pPolyHb对于心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制的初步研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略语对照表第9-13页
第一章 引言第13-29页
    1.1 心肌缺血再灌注损伤的研究概况第14-16页
        1.1.1 心肌缺血再灌注损伤的发生发展第14页
        1.1.2 心肌缺血再灌注损伤的机理研究进展第14-16页
    1.2 HBOCs研究进展第16-19页
        1.2.1 HBOCs的分类与特点第17-19页
        1.2.2 戊二醛聚合猪血红蛋白(pPolyHb)第19页
    1.3 血红素加氧酶-1在I/R损伤中的作用第19-22页
        1.3.1 血红素加氧酶的生物学性质第19-20页
        1.3.2 血红素加氧酶在心肌I/R损伤中的作用第20-21页
        1.3.3 HBOCs诱导产生HO-1对I/R损伤的抑制作用第21-22页
    1.4 线粒体自噬与心肌缺血/再灌注损伤第22-26页
        1.4.1 线粒体自噬在心肌缺血再灌注损伤中的作用第22-24页
        1.4.2 Pink1-Parkin通路第24-26页
        1.4.3 HO-1与线粒体自噬第26页
    1.5 本文的研究目的及意义第26-29页
第二章 H9C2细胞株的培养和缺氧/复氧损伤模型的构建第29-37页
    2.1 引言第29页
    2.2 试验材料与仪器第29-30页
        2.2.1 材料与试剂第29-30页
        2.2.2 仪器设备第30页
    2.3 试验方法第30-32页
        2.3.1 H9C2大鼠心肌细胞培养第30页
        2.3.2 pPolyHb对于正常细胞生存活力的影响第30-31页
        2.3.3 pPolyHb对于缺氧/复氧细胞生存活力的影响第31页
        2.3.4 LDH检测第31页
        2.3.5 肌酸激酶的检测第31-32页
    2.4 结果分析第32-36页
        2.4.1 pPolyHb对于正常细胞生存活力的影响第32页
        2.4.2 pPolyHb对于缺氧复氧细胞生存活力的影响第32-33页
        2.4.3 LDH检测结果第33-34页
        2.4.4 CK检测结果第34-35页
        2.4.5 I/R损伤对H9C2心肌细胞形态改变第35-36页
    2.5 讨论第36-37页
第三章 pPolyHb对H9C2细胞缺血再灌注损伤的影响第37-51页
    3.1 引言第37页
    3.2 试验材料与仪器第37-39页
        3.2.1 材料与试剂第37-38页
        3.2.2 仪器设备第38-39页
    3.3 试验方法第39-42页
        3.3.1 Elisa检测炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-10的表达第39页
        3.3.2 Annexin V-FITC检测细胞凋亡第39页
        3.3.3 western blot检测凋亡相关Bax、CytC以及Bcl-2蛋白的表达第39-41页
        3.3.4 western blot检测HO-1的表达第41-42页
    3.4 结果分析第42-49页
        3.4.1 pPolyHb对H9C2缺血再灌注损伤炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-10表达的影响第42-44页
        3.4.2 pPolyHb对H9C2缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响第44-45页
        3.4.3 western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和CytC表达第45-47页
        3.4.4 pPolyHb复氧对H9C2细胞内HO-1表达的影响第47页
        3.4.5 抑制HO-1的表达对细胞凋亡的影响第47-49页
    3.5 讨论第49-51页
第四章 pPolyHb对H9C2细胞缺氧/复氧损伤中线粒体自噬的诱导机制研究第51-63页
    4.1 引言第51页
    4.2 试验材料与仪器第51-53页
        4.2.1 材料与试剂第51-52页
        4.2.2 仪器设备第52-53页
    4.3 实验方法第53-55页
        4.3.1 实验分组第53页
        4.3.2 western blot检测线粒体自噬蛋白Pink1、Parkin的表达第53页
        4.3.3 One Step SYBR(?) PrimeScript~(TM) RT-PCR检测Pink1、Parkin基因表达第53-55页
        4.3.4 抑制HO-1和线粒体自噬通路对Pink1、Parkin表达影响第55页
        4.3.5 线粒体自噬抑制后凋亡蛋白Bax、Bcl-2、CytC的表达第55页
    4.4 结果分析第55-62页
        4.4.1 pPolyHb复氧对Pink1、Parkin表达的影响第55-57页
        4.4.2 pPolyHb复氧对Pink1、Parkin mRNA表达的影响第57-58页
        4.4.3 抑制HO-1和线粒体自噬通路对Pink1、Parkin表达影响结果第58-60页
        4.4.4 线粒体自噬抑制后凋亡蛋白Bax、Bcl-2、CytC表达结果第60-62页
    4.5 讨论第62-63页
结论第63-65页
参考文献第65-72页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第72-73页
致谢第73页

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