摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略语对照表 | 第9-13页 |
第一章 引言 | 第13-29页 |
1.1 心肌缺血再灌注损伤的研究概况 | 第14-16页 |
1.1.1 心肌缺血再灌注损伤的发生发展 | 第14页 |
1.1.2 心肌缺血再灌注损伤的机理研究进展 | 第14-16页 |
1.2 HBOCs研究进展 | 第16-19页 |
1.2.1 HBOCs的分类与特点 | 第17-19页 |
1.2.2 戊二醛聚合猪血红蛋白(pPolyHb) | 第19页 |
1.3 血红素加氧酶-1在I/R损伤中的作用 | 第19-22页 |
1.3.1 血红素加氧酶的生物学性质 | 第19-20页 |
1.3.2 血红素加氧酶在心肌I/R损伤中的作用 | 第20-21页 |
1.3.3 HBOCs诱导产生HO-1对I/R损伤的抑制作用 | 第21-22页 |
1.4 线粒体自噬与心肌缺血/再灌注损伤 | 第22-26页 |
1.4.1 线粒体自噬在心肌缺血再灌注损伤中的作用 | 第22-24页 |
1.4.2 Pink1-Parkin通路 | 第24-26页 |
1.4.3 HO-1与线粒体自噬 | 第26页 |
1.5 本文的研究目的及意义 | 第26-29页 |
第二章 H9C2细胞株的培养和缺氧/复氧损伤模型的构建 | 第29-37页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 试验材料与仪器 | 第29-30页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第29-30页 |
2.2.2 仪器设备 | 第30页 |
2.3 试验方法 | 第30-32页 |
2.3.1 H9C2大鼠心肌细胞培养 | 第30页 |
2.3.2 pPolyHb对于正常细胞生存活力的影响 | 第30-31页 |
2.3.3 pPolyHb对于缺氧/复氧细胞生存活力的影响 | 第31页 |
2.3.4 LDH检测 | 第31页 |
2.3.5 肌酸激酶的检测 | 第31-32页 |
2.4 结果分析 | 第32-36页 |
2.4.1 pPolyHb对于正常细胞生存活力的影响 | 第32页 |
2.4.2 pPolyHb对于缺氧复氧细胞生存活力的影响 | 第32-33页 |
2.4.3 LDH检测结果 | 第33-34页 |
2.4.4 CK检测结果 | 第34-35页 |
2.4.5 I/R损伤对H9C2心肌细胞形态改变 | 第35-36页 |
2.5 讨论 | 第36-37页 |
第三章 pPolyHb对H9C2细胞缺血再灌注损伤的影响 | 第37-51页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 试验材料与仪器 | 第37-39页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第37-38页 |
3.2.2 仪器设备 | 第38-39页 |
3.3 试验方法 | 第39-42页 |
3.3.1 Elisa检测炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-10的表达 | 第39页 |
3.3.2 Annexin V-FITC检测细胞凋亡 | 第39页 |
3.3.3 western blot检测凋亡相关Bax、CytC以及Bcl-2蛋白的表达 | 第39-41页 |
3.3.4 western blot检测HO-1的表达 | 第41-42页 |
3.4 结果分析 | 第42-49页 |
3.4.1 pPolyHb对H9C2缺血再灌注损伤炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-10表达的影响 | 第42-44页 |
3.4.2 pPolyHb对H9C2缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
3.4.3 western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和CytC表达 | 第45-47页 |
3.4.4 pPolyHb复氧对H9C2细胞内HO-1表达的影响 | 第47页 |
3.4.5 抑制HO-1的表达对细胞凋亡的影响 | 第47-49页 |
3.5 讨论 | 第49-51页 |
第四章 pPolyHb对H9C2细胞缺氧/复氧损伤中线粒体自噬的诱导机制研究 | 第51-63页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 试验材料与仪器 | 第51-53页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第51-52页 |
4.2.2 仪器设备 | 第52-53页 |
4.3 实验方法 | 第53-55页 |
4.3.1 实验分组 | 第53页 |
4.3.2 western blot检测线粒体自噬蛋白Pink1、Parkin的表达 | 第53页 |
4.3.3 One Step SYBR(?) PrimeScript~(TM) RT-PCR检测Pink1、Parkin基因表达 | 第53-55页 |
4.3.4 抑制HO-1和线粒体自噬通路对Pink1、Parkin表达影响 | 第55页 |
4.3.5 线粒体自噬抑制后凋亡蛋白Bax、Bcl-2、CytC的表达 | 第55页 |
4.4 结果分析 | 第55-62页 |
4.4.1 pPolyHb复氧对Pink1、Parkin表达的影响 | 第55-57页 |
4.4.2 pPolyHb复氧对Pink1、Parkin mRNA表达的影响 | 第57-58页 |
4.4.3 抑制HO-1和线粒体自噬通路对Pink1、Parkin表达影响结果 | 第58-60页 |
4.4.4 线粒体自噬抑制后凋亡蛋白Bax、Bcl-2、CytC表达结果 | 第60-62页 |
4.5 讨论 | 第62-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |