中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
英文缩略词 | 第12-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第一部分 新藤黄酸与阿霉素单独及联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响 | 第17-27页 |
1 实验材料与仪器 | 第17-19页 |
1.1 细胞株 | 第17页 |
1.2 药物 | 第17页 |
1.3 主要试剂 | 第17页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第17-18页 |
1.5 主要仪器 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-22页 |
2.1 细胞复苏和冻存 | 第19页 |
2.1.1 细胞复苏 | 第19页 |
2.1.2 细胞冻存 | 第19页 |
2.2. 细胞培养和传代 | 第19页 |
2.3 细胞分组 | 第19页 |
2.4 细胞计数 | 第19-20页 |
2.5 工作药液的配制 | 第20页 |
2.5.1 新藤黄酸药液的配制 | 第20页 |
2.5.2 阿霉素药液的配制 | 第20页 |
2.6 新藤黄酸与阿霉素单独及联合对人乳腺癌MCF-7 细胞的敏感性实验(MTT法) | 第20-21页 |
2.7 Chou-Talalay联合指数法 | 第21页 |
2.8 倒置显微镜下观察药物对MCF-7细胞形态的影响 | 第21页 |
2.9 统计学处理方法 | 第21-22页 |
3 实验结果 | 第22-25页 |
3.1 新藤黄酸与阿霉素单独及联合对细胞活力的抑制作用 | 第22-24页 |
3.2 倒置显微镜下观察药物对MCF-7细胞形态的影响 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-26页 |
5 小结 | 第26-27页 |
第二部分 新藤黄酸与阿霉素单独及联合用药诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究 | 第27-38页 |
1 实验材料与仪器 | 第27-28页 |
1.1 细胞株 | 第27页 |
1.2 药物 | 第27页 |
1.3 主要试剂 | 第27页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第27页 |
1.5 主要仪器 | 第27-28页 |
2 实验方法 | 第28-30页 |
2.1 细胞复苏、冻存、培养、传代和细胞计数 | 第28页 |
2.2 细胞分组 | 第28页 |
2.3 工作药液的配制 | 第28-29页 |
2.4 细胞凋亡的形态学检测(DAPI荧光染色) | 第29页 |
2.5 流式细胞仪检测 | 第29-30页 |
2.5.1 细胞凋亡率指标检测(Annexin V-FITC/PI双染) | 第29页 |
2.5.2 线粒体膜电位检测(JC-1) | 第29-30页 |
2.6 统计处理方法 | 第30页 |
3 实验结果 | 第30-35页 |
3.1 倒置荧光显微镜(DAPI荧光染色) | 第30-31页 |
3.2 流式细胞仪检测 | 第31-35页 |
3.2.1 细胞凋亡率指标检测(Annexin V-FITC/PI双染) | 第31-33页 |
3.2.2 线粒体膜电位检测(JC-1) | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
4.1细胞凋亡相关通路 | 第35-36页 |
4.2细胞凋亡与线粒体的关系 | 第36-37页 |
5 小结 | 第37-38页 |
第三部分 新藤黄酸与阿霉素单独及联合用药通过JNK通路诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制研究 | 第38-53页 |
1 实验材料与仪器 | 第38-41页 |
1.1 细胞株 | 第38页 |
1.2 药物 | 第38页 |
1.3 主要试剂 | 第38-39页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第39-40页 |
1.5 主要仪器 | 第40-41页 |
2 实验方法 | 第41-46页 |
2.1 细胞复苏、冻存、培养、传代和细胞计数 | 第41页 |
2.2 细胞分组 | 第41页 |
2.3 工作药液的配制 | 第41页 |
2.4 Western Blot法检测细胞总蛋白表达水平 | 第41-45页 |
2.4.1 蛋白样品制备 | 第41-42页 |
2.4.2 蛋白含量测定 | 第42-43页 |
2.4.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第43-45页 |
2.5 统计处理方法 | 第45-46页 |
3 实验结果 | 第46-49页 |
3.1 GNA与ADR单独及联合用药对MCF-7 细胞ASK-1、p-ASK-1 蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
3.2 GNA与ADR单独及联合用药对MCF-7 细胞JNK、p-JNK蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
3.3 GNA与ADR单独及联合用药对MCF-7 细胞Cyt-c、Caspase-9、Caspase-3 蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 联合用药与细胞凋亡 | 第49页 |
4.2 细胞凋亡与JNK通路 | 第49-52页 |
5 小结 | 第52-53页 |
总结 | 第53-54页 |
实验线路图 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
综述 | 第60-68页 |
综述参考文献 | 第65-68页 |
附录 | 第68页 |
硕士期间发表的科研论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |