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谷氨酸棒杆菌中甲硫氨酸亚砜还原酶生理功能及抗氧化机制探究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第10-18页
    1.1 活性氧自由基的产生和氧化应激损伤第10-11页
        1.1.1 活性氧自由基的产生第10页
        1.1.2 氧化应激损伤第10-11页
    1.2 抗氧化损伤防线第11-14页
        1.2.1 Peroxiredoxin蛋白第11-12页
        1.2.2 硫氧还蛋白/硫氧还蛋白还原酶(Trx/TrxR)还原系统第12页
        1.2.3 小分子硫醇第12-14页
    1.3 甲硫氨酸亚砜还原酶(Msr)研究现状第14-16页
        1.3.1 MsrA第15页
        1.3.2 MsrB第15-16页
    1.4 谷氨酸棒杆菌综述第16-17页
        1.4.1 谷氨酸棒杆菌介绍第16-17页
        1.4.2 谷氨酸棒杆菌中Msr的研究现状第17页
    1.5 研究目的及意义第17-18页
第二章 材料和方法第18-24页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 菌株,质粒和引物第18页
        2.1.2 实验试剂,培养基和培养条件第18-19页
    2.2 试验方法第19-24页
        2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第19页
        2.2.2 谷氨酸棒杆菌感受态细胞制备和转化第19-20页
        2.2.3 PCR反应体系第20-21页
        2.2.4 突变体的构建第21页
        2.2.5 互补菌株和原核表达菌株的构建第21-22页
        2.2.6 蛋白诱导表达与纯化第22页
        2.2.7 MetO还原能力实验第22页
        2.2.8 不同环境应激物胁迫下存活率分析第22-23页
        2.2.9 甲硫氨酸亚砜还原酶酶活测定第23页
        2.2.10 异源二聚体检测第23页
        2.2.11 β-gal酶活测定第23-24页
第三章 实验结果第24-33页
    3.1 谷氨酸棒杆菌中MsrB序列分析第24-25页
    3.2 突变体的构建与筛选第25-26页
        3.2.1 单交换菌株的筛选第25页
        3.2.2 双交换菌株的筛选第25-26页
    3.3 MsrB还原MetO的能力检测及与MsrA的比较第26-27页
    3.4 MsrB在抗氧化胁迫中的作用及与MsrA的比较第27-28页
        3.4.1 MsrB对谷氨酸棒杆菌生长状态的影响第27页
        3.4.2 MsrB在氧化胁迫下的作用第27-28页
    3.5 MsrB进行MetO的还原机制探究第28-31页
        3.5.1.MsrB蛋白的表达纯化第29页
        3.5.2 MsrB和MsrA酶动力学比较第29-30页
        3.5.3 MsrB与Trx异源二聚体检测第30-31页
    3.6 SigH对msrB表达的影响第31-33页
第四章 分析和讨论第33-34页
第五章 结论第34-35页
参考文献第35-41页
附录第41-43页
致谢第43-44页
作者简介第44页

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