| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 第二章 文蛤抗肿瘤多肽Mere15 的分离纯化 | 第23-45页 |
| 一、实验材料、仪器和试剂 | 第23-26页 |
| 二、实验方法 | 第26-36页 |
| 1. 文蛤多肽的分离纯化 | 第26-32页 |
| 2. BCA 法测定蛋白浓度 | 第32-34页 |
| 3. SDS-PAGE 检测 | 第34-36页 |
| 三、实验结果 | 第36-42页 |
| 1. 硫酸铵分级沉淀 | 第36-37页 |
| 2. 超滤 | 第37页 |
| 3. CM-Sepharose Fast Flow 弱阳离子交换层析 | 第37-38页 |
| 4. Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (high sub) 疏水层析 | 第38-39页 |
| 5. Superdex 75 prep grade 凝胶过滤 | 第39页 |
| 6. RESource 15Q 强阴离子交换层析 | 第39-40页 |
| 7. C18 反相层析 | 第40-41页 |
| 8. SDS-PAGE 测定多肽分子量 | 第41-42页 |
| 四、讨论 | 第42-45页 |
| 1. 硫酸铵分级沉淀 | 第43页 |
| 2. 超滤 | 第43页 |
| 3. 离子交换层析 | 第43-44页 |
| 4. 凝胶过滤层析 | 第44-45页 |
| 第三章 文蛤多肽Mere 15 体内外抗肿瘤活性研究 | 第45-55页 |
| 一、实验材料、仪器和试剂 | 第45-46页 |
| 二、实验方法 | 第46-51页 |
| 1. 细胞培养 | 第46-49页 |
| 2. MTT 比色法 | 第49-50页 |
| 3. Mere15 对体外培养细胞的抑制作用 | 第50页 |
| 4. Mere15 对裸小鼠人肺癌A549 移植瘤的生长抑制作用 | 第50-51页 |
| 三、实验结果 | 第51-53页 |
| 1. MTT 比色法测定Mere15 对体外培养细胞的抑制作用 | 第51-53页 |
| 2. Mere15 对裸小鼠人肺癌A549 移植瘤的生长抑制作用 | 第53页 |
| 四、讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 Mere15 抗肿瘤作用机制 | 第55-86页 |
| 一、实验材料、仪器和试剂 | 第55-56页 |
| 二、实验方法 | 第56-67页 |
| 1. 细胞培养 | 第56页 |
| 2. 倒置显微镜观察 | 第56-57页 |
| 3. 扫描电镜观察 | 第57页 |
| 4. Hoechst33342 染色 | 第57-58页 |
| 5. 线粒体膜电位检测 | 第58-59页 |
| 6. Annexin V-FITC/PI 检测 | 第59-60页 |
| 7. DNA ladder 分析 | 第60-61页 |
| 8. Western blot 检测 | 第61-64页 |
| 9. 细胞周期检测 | 第64-65页 |
| 10. 微管蛋白α-tubulin 免疫荧光染色 | 第65-67页 |
| 三、实验结果 | 第67-81页 |
| 1. 倒置显微镜观察A549 细胞形态学变化 | 第67-69页 |
| 2. 扫描电镜观察A549 细胞膜表面变化 | 第69-71页 |
| 3. Hoechst 33342 染色观察A549 细胞核变化 | 第71-72页 |
| 4. 线粒体膜电位检测 | 第72-73页 |
| 5. 磷脂酰丝氨酸外化的检测 | 第73-75页 |
| 6. DNA Ladder 分析 | 第75-76页 |
| 7. Western blot 检测凋亡信号通路 | 第76-78页 |
| 8. 细胞周期分析 | 第78-79页 |
| 9. Mere15 对微管蛋白α-tubulin 聚合的影响 | 第79-81页 |
| 10. Mere15 对p21 蛋白表达的影响 | 第81页 |
| 四、讨论 | 第81-86页 |
| 1. 细胞凋亡 | 第82-84页 |
| 2. 细胞周期阻滞 | 第84-86页 |
| 结论与创新点 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 已发表和待发表的文章 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
