摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 围食膜概述 | 第12-15页 |
1.1.1 围食膜的类型 | 第12页 |
1.1.2 围食膜的组分与结构 | 第12-13页 |
1.1.3 围食膜的功能 | 第13-15页 |
1.2 围食膜作为外源病原物入侵靶标的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.1 改变围食膜中蛋白质组分 | 第15页 |
1.2.2 改变围食膜中几丁质组分 | 第15-16页 |
1.2.3 破坏围食膜蛋白与几丁质的相互作用 | 第16页 |
1.2.4 其他作用方式 | 第16页 |
1.3 围食膜因子概述 | 第16-22页 |
1.3.1 围食膜因子的定义 | 第16页 |
1.3.2 围食膜因子的结构特点 | 第16-17页 |
1.3.3 围食膜因子的分类 | 第17-18页 |
1.3.4 围食膜因子的研究进展 | 第18-22页 |
第二章 引言 | 第22-26页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第22-23页 |
2.2 研究内容 | 第23-24页 |
2.3 技术路线 | 第24-26页 |
第三章 家蚕围食膜因子的基因鉴定及生物信息学分析 | 第26-36页 |
3.1 材料与方法 | 第26-27页 |
3.1.1 相关基因组和蛋白数据库 | 第26页 |
3.1.2 生物信息分析软件和程序 | 第26-27页 |
3.1.3 家蚕围食膜因子的鉴定方法 | 第27页 |
3.1.4 家蚕围食膜因子基因的进化及保守性分析 | 第27页 |
3.2 实验结果与分析 | 第27-34页 |
3.2.1 家蚕围食膜因子的基因鉴定 | 第27-33页 |
3.2.2 家蚕围食膜因子基因的生物信息学分析 | 第33-34页 |
3.3 讨论 | 第34-36页 |
第四章 家蚕围食膜因子的基因表达 | 第36-52页 |
4.1 材料与方法 | 第36-38页 |
4.1.1 实验材料 | 第36页 |
4.1.2 主要仪器和试剂 | 第36-38页 |
4.2 实验方法 | 第38-44页 |
4.2.1 家蚕围食膜因子的基因芯片表达数据 | 第38页 |
4.2.2 家蚕各时期整蚕及5龄 3d各组织材料 | 第38页 |
4.2.3 BmNPV感染家蚕幼虫中肠组织材料 | 第38-39页 |
4.2.4 家蚕各时期及组织RNA的提取 | 第39页 |
4.2.5 cDNA的合成与检测 | 第39-40页 |
4.2.6 家蚕围食膜因子的基因时空表达(RT-PCR) | 第40-41页 |
4.2.7 家蚕围食膜因子Bm001504、Bm009641的基因克隆 | 第41-44页 |
4.2.8 食下BmNPV后家蚕围食膜因子Bm001504、Bm009641的基因表达(qRT-PCR) | 第44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-50页 |
4.3.1 基于芯片数据的家蚕围食膜因子的基因表达分析 | 第44-45页 |
4.3.2 家蚕围食膜因子的基因时空表达 | 第45-46页 |
4.3.3 家蚕围食膜因子Bm001504、Bm009641的基因克隆 | 第46-49页 |
4.3.4 食下BmNPV后家蚕围食膜因子Bm001504、Bm009641的基因表达 | 第49-50页 |
4.4 讨论 | 第50-52页 |
第五章 家蚕围食膜因子在BmNPV入侵中的功能研究 | 第52-70页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第52-55页 |
5.1.1 实验材料 | 第52页 |
5.1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
5.1.3 主要仪器 | 第53页 |
5.1.4 主要溶液配制 | 第53-55页 |
5.2 实验方法 | 第55-60页 |
5.2.1 引物设计 | 第55-56页 |
5.2.2 Bm001504和Bm009641基因的真核表达载体构建 | 第56页 |
5.2.3 Bm001504和Bm009641基因真核表达载体的细胞转染 | 第56-57页 |
5.2.4 Western blot检测Bm001504和Bm009641基因的表达 | 第57-58页 |
5.2.5 过表达Bm001504和Bm009641基因后感染BmNPV的细胞材料 | 第58页 |
5.2.6 检测Bm001504和Bm009641基因对BmNPV增殖复制的影响 | 第58页 |
5.2.7 家蚕围食膜因子基因Bm001504打靶载体的构建 | 第58-59页 |
5.2.8 转基因重组载体显微注射家蚕胚胎 | 第59页 |
5.2.9 转基因家蚕阳性个体的筛选 | 第59页 |
5.2.10 家蚕基因组提取 | 第59-60页 |
5.2.11 转基因家蚕添食BmNPV | 第60页 |
5.3 实验结果与分析 | 第60-69页 |
5.3.1 家蚕围食膜因子Bm001504、Bm009641基因在细胞水平对病毒增殖复制的影响 | 第60-64页 |
5.3.2 家蚕转基因系的获得及分子生物学检测 | 第64-66页 |
5.3.3 过表达转基因系和敲除转基因系对病毒增殖复制的影响 | 第66-69页 |
5.4 讨论 | 第69-70页 |
第六章 全文总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-76页 |
附录 英文缩写一览表 | 第76-78页 |
在读期间发表论文及参加课题 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |