| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 1.1 miRNA概述 | 第14-19页 |
| 1.1.1 miRNA的发现 | 第14页 |
| 1.1.2 植物mi RNA的生物合成 | 第14-15页 |
| 1.1.3 植物mi RNA的作用机制 | 第15页 |
| 1.1.4 植物mi RNA的特点 | 第15-16页 |
| 1.1.5 miRNA与siRNA、tasiRNA | 第16页 |
| 1.1.6 植物mi RNA的功能 | 第16-19页 |
| 1.2 植物miRNA的鉴定 | 第19-20页 |
| 1.3 植物miRNA的表达分析 | 第20页 |
| 1.4 植物miRNA靶基因的预测和鉴定 | 第20-21页 |
| 1.5 miRNA的生物学功能鉴定 | 第21页 |
| 1.6 果树miRNA的研究概况 | 第21-22页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 白粉菌诱导下‘白河351’小RNA高通量测序 | 第24-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 植物材料与菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 主要化学试剂、酶和仪器 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 胁迫条件下‘白河351’叶片总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 小RNA高通量测序 | 第25-26页 |
| 2.3 测序结果分析 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 白粉菌诱导下‘白河351’mi RNA的鉴定 | 第29-38页 |
| 3.1 数据库和软件 | 第29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-30页 |
| 3.2.1 小RNA高通量测序结果分析 | 第29页 |
| 3.2.2 miRNA靶基因预测 | 第29-30页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第30-36页 |
| 3.3.1 华东葡萄‘白河351’miRNA的鉴定 | 第30-32页 |
| 3.3.2 miRNA保守性分析 | 第32-34页 |
| 3.3.3 ‘白河351’miRNA靶基因预测 | 第34-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 华东葡萄抗白粉病相关miRNA的筛选 | 第38-48页 |
| 4.1 试验材料 | 第38页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂、仪器 | 第38页 |
| 4.1.3 数据库和软件 | 第38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 4.2.1 MIRNA基因cDNA的合成 | 第38-39页 |
| 4.2.2 vvi-miRNA表达的半定量RT-PCR | 第39页 |
| 4.2.3 vvi-miRNA表达的qRT-PCR | 第39-40页 |
| 4.2.4 靶基因表达的qRT-PCR | 第40-41页 |
| 4.3 试验结果与分析 | 第41-47页 |
| 4.3.1 miRNA表达的生物信息分析 | 第41页 |
| 4.3.2 半定量RT-PCR对vvi-miRNA表达模式的分析 | 第41-44页 |
| 4.3.3 miRNA及对应靶基因表达的定量分析 | 第44-46页 |
| 4.3.4 抗白粉病相关miRNA的筛选 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 华东葡萄NewmiR2118及其靶基因互作分析 | 第48-64页 |
| 5.1 试验材料 | 第48页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 5.1.2 主要化学试剂 | 第48页 |
| 5.1.3 菌株及载体 | 第48页 |
| 5.1.4 数据库和软件 | 第48页 |
| 5.2 试验方法 | 第48-56页 |
| 5.2.1 ‘白河351’叶片基因组DNA的提取 | 第48-49页 |
| 5.2.2 vvi-miR2118植物过表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 5.2.3 RPP13与GUS基因融合载体的构建 | 第50-52页 |
| 5.2.4 农杆菌GV3101感受态的制备及电击转化 | 第52页 |
| 5.2.5 农杆菌介导的烟草瞬时共转化 | 第52-53页 |
| 5.2.6 组织化学染色 | 第53-54页 |
| 5.2.7 GUS活性分析 | 第54-56页 |
| 5.3 试验结果与分析 | 第56-62页 |
| 5.3.1 NewmiR2118与靶基因RPP13概述 | 第56-59页 |
| 5.3.2 NewmiR2118和RPP13植物过载体构建 | 第59-60页 |
| 5.3.3 NewmiR2118与靶RPP13互作分析 | 第60-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-64页 |
| 第六章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 缩略词 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
