摘要 | 第4-6页 |
Summary | 第6-7页 |
缩略词表 | 第8-12页 |
Ⅰ 引言 | 第12-13页 |
Ⅱ 文献综述 | 第13-29页 |
1 马铃薯生产现状及营养成分分析 | 第13-15页 |
1.1 马铃薯的生产现状 | 第13-14页 |
1.2 马铃薯营养成分分析 | 第14-15页 |
2 糖苷生物碱的研究现状 | 第15-22页 |
2.1 糖苷生物碱的化学结构 | 第15-16页 |
2.2 糖苷生物碱的生物学特性 | 第16页 |
2.3 糖苷生物碱的合成代谢途径 | 第16-20页 |
2.4 糖苷生物碱对人体健康的影响 | 第20-21页 |
2.5 影响马铃薯块茎GAs含量的因素 | 第21-22页 |
3 Sgt基因家族研究现状 | 第22-23页 |
4 Patatin启动子研究现状 | 第23-25页 |
4.1 植物启动子的研究现状 | 第23-25页 |
4.2 马铃薯Patatin启动子的研究现状 | 第25页 |
5 RNAi技术在植物品质中的研究现状 | 第25-29页 |
5.1 RNAi技术在植物抗病中的应用 | 第25-26页 |
5.2 RNAi技术在植物品质改良中的应用 | 第26-27页 |
5.3 RNAi技术在植物代谢调控中的应用 | 第27-29页 |
Ⅲ 研究的目的意义 | 第29-30页 |
Ⅳ 研究技术路线 | 第30-31页 |
Ⅴ 材料与方法 | 第31-48页 |
1 材料 | 第31-33页 |
1.1 菌种和质粒 | 第31页 |
1.2 实验材料 | 第31页 |
1.3 试剂 | 第31页 |
1.4 仪器设备 | 第31-32页 |
1.5 培养基 | 第32页 |
1.6 IPTG和X-Gal | 第32-33页 |
1.7 植物激素 | 第33页 |
1.8 抗生素 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-48页 |
2.1 DH5α 感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
2.2 DH5a感受态细胞的转化 | 第34页 |
2.3 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第34-36页 |
2.4 靶标片段的克隆 | 第36-38页 |
2.5 靶标片段A、B、C的融合以及反向插入片段R的合成 | 第38-40页 |
2.6 Patatin启动子靶标片段P的合成 | 第40-41页 |
2.7 RNAi中间载体的构建 | 第41页 |
2.8 RNAi表达载体的构建 | 第41-44页 |
2.9 RNAi表达载体转化农杆菌及鉴定 | 第44页 |
2.10 农杆菌介导的马铃薯茎段遗传转化及鉴定 | 第44页 |
2.11 转基因植株中靶标基因的表达水平检测 | 第44-46页 |
2.12 糖苷生物碱标准曲线的绘制及含量测定 | 第46-48页 |
Ⅵ 结果与分析 | 第48-74页 |
1 靶标片段A、B、C的克隆 | 第48-53页 |
1.1 Sgt1-1 和Sgt1-5 靶标片段的克隆 | 第48-50页 |
1.2 Sgt2-2 和Sgt2-5 靶标片段的克隆 | 第50-51页 |
1.3 Sgt3-1 和Sgt3-4 靶标片段的克隆 | 第51-53页 |
2 靶标片段A、B、C的融合及反向片段R的合成 | 第53-60页 |
3 靶标片段Patatin P的克隆及序列分析 | 第60-63页 |
4 RNAi中间载体和表达载体的构建 | 第63-67页 |
4.1 RNAi中间载体pHANI-PFR的构建 | 第63-65页 |
4.2 RNAi表达载体pCEI-PFR的获得 | 第65页 |
4.3 RNAi表达载体pCEPSPS-PFR转化农杆菌及其鉴定 | 第65-67页 |
5 转化再生苗的获得及检测 | 第67页 |
6 转基因植株靶标基因转录水平检测 | 第67-71页 |
7 糖苷生物碱含量的测定 | 第71-74页 |
Ⅶ 讨论 | 第74-76页 |
Ⅷ 结论 | 第76-77页 |
附表 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
导师简介 | 第90-91页 |
作者简介 | 第91-92页 |