中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6页 |
前言 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1. 抗体的分离纯化 | 第11-14页 |
1.1.1. 沉淀法 | 第11-12页 |
1.1.2. 色谱法 | 第12-14页 |
1.2. 抗体技术及VHH纳米抗体概述 | 第14-22页 |
1.2.1. 抗体技术发展概况 | 第14-15页 |
1.2.2. 基因工程抗体 | 第15-18页 |
1.2.3. VHH纳米抗体 | 第18-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-42页 |
2.1. 实验试剂和仪器 | 第22-26页 |
2.1.1. 试剂 | 第22-25页 |
2.1.2. 仪器 | 第25-26页 |
2.2. 试验方法 | 第26-42页 |
2.2.1. 动物免疫及免疫后血清分析 | 第26-27页 |
2.2.2. 淋巴细胞的分离和RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.3. 噬菌体展示纳米抗体文库的构建 | 第28-33页 |
2.2.4. 噬菌体展示纳米抗体文库的筛选 | 第33-36页 |
2.2.5. 纳米抗体的筛选 | 第36-38页 |
2.2.6. 对获取抗人源抗体Fc片段纳米抗体功能分析 | 第38-42页 |
第三章 实验结果与分析 | 第42-51页 |
3.1. 免疫后动物血清分析 | 第42-43页 |
3.2. 噬菌体展示纳米抗体文库的构建 | 第43-45页 |
3.2.1. 从获取的cDNA中扩增出免疫球蛋白的重链可变区 | 第43页 |
3.2.2. 噬菌体载体的酶切 | 第43-44页 |
3.2.3. 噬菌体展示纳米抗体文库有效插入率和多样性的检测 | 第44-45页 |
3.3. 针对人源抗体Fc片段纳米抗体的筛选 | 第45-51页 |
3.3.1. 噬菌体展示纳米抗体文库的筛选 | 第45页 |
3.3.2. 针对人源抗体Fc片段的特异性阳性克隆的筛选 | 第45-47页 |
3.3.3. 针对人源抗体Fc片段的纳米抗体的诱导表达 | 第47页 |
3.3.4. 诱导表达后纳米抗体的功能检测 | 第47-48页 |
3.3.5. 利用人源抗体Fc片段的纳米抗体亲和层析纯化血清中的抗体 | 第48-49页 |
3.3.6. 偶联人源抗体Fc片段的纳米抗体亲和层析柱回收率的分析 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |