| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 幼畜体外胚胎移植技术概况 | 第11-13页 |
| 1.1 卵母细胞体外成熟 | 第11页 |
| 1.2 精子获能 | 第11-12页 |
| 1.3 体外受精 | 第12页 |
| 1.4 体外胚胎培养 | 第12-13页 |
| 2 单细胞RNA-seq技术 | 第13-14页 |
| 2.1 单细胞RNA-seq技术的发展及应用 | 第13页 |
| 2.2 单细胞RNA-Seq技术核心与优势 | 第13-14页 |
| 3 基因与卵母细胞成熟发育 | 第14-16页 |
| 3.1 c-mos基因 | 第14-15页 |
| 3.2 RPS6KA2基因 | 第15页 |
| 3.3 CPEB1基因 | 第15页 |
| 3.4 ANAPC13基因 | 第15-16页 |
| 3.5 CDK1基因 | 第16页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 激素浓度对羔羊和成年母羊卵母细胞体外成熟培养的影响 | 第17-23页 |
| 1 试验材料 | 第17-19页 |
| 1.1 主要仪器 | 第17页 |
| 1.2 器材的准备 | 第17-18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 1.4 主要溶液配置 | 第18页 |
| 1.5 卵巢的采集 | 第18-19页 |
| 2 试验方法 | 第19-20页 |
| 2.1 试验安排 | 第19页 |
| 2.2 卵母细胞的收集 | 第19页 |
| 2.3 卵母细胞成熟培养 | 第19-20页 |
| 2.4 数据处理 | 第20页 |
| 3 试验结果 | 第20-22页 |
| 3.1 不同浓度FSH+LH对成年母羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第20-21页 |
| 3.2 不同浓度FSH+LH对羔羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第21页 |
| 3.3 成年母羊与羔羊卵母细胞体外成熟率的差异 | 第21-22页 |
| 4 分析与讨论 | 第22-23页 |
| 4.1 激素对卵母细胞体外成熟效果的影响 | 第22页 |
| 4.2 羔羊与成年母羊卵母细胞成熟率的差异 | 第22-23页 |
| 第三章 羔羊和成年羊卵母细胞受精率以及早期胚胎发育能力的差异 | 第23-28页 |
| 1 试验材料 | 第23-24页 |
| 1.1 主要仪器 | 第23页 |
| 1.2 器材的准备 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 1.4 主要溶液配置 | 第23-24页 |
| 1.5 成熟卵母细胞的获取和精液的采精 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-25页 |
| 2.1 精子的获能处理 | 第24页 |
| 2.2 卵母细胞体外受精 | 第24页 |
| 2.3 受精卵的体外培养 | 第24-25页 |
| 3 试验结果 | 第25-26页 |
| 3.1 成年母羊和羔羊卵母细胞体外受精效果的比较 | 第25-26页 |
| 3.2 成年母羊和羔羊胚胎后期发育能力的比较 | 第26页 |
| 4 讨论与分析 | 第26-28页 |
| 4.1 成年母羊和羔羊卵母细胞体外受精效果的比较 | 第26页 |
| 4.2 成年母羊和羔羊胚胎早期发育能力的比较 | 第26-28页 |
| 第四章 单细胞转录组测序技术对羔羊卵母细胞体外成熟关键基因的筛选 | 第28-47页 |
| 1 试验材料 | 第28-30页 |
| 1.1 试验样本的准备 | 第28页 |
| 1.2 主要仪器 | 第28-29页 |
| 1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-36页 |
| 2.1 卵母细胞总RNA提取扩增及检测 | 第30页 |
| 2.2 文库的建立及测序 | 第30-31页 |
| 2.3 单细胞RNA-seq数据分析流程 | 第31-34页 |
| 2.4 转录组数据库的验证 | 第34-36页 |
| 2.5 羔羊卵母细胞成熟有关重要通路及基因的筛选 | 第36页 |
| 3 试验结果 | 第36-46页 |
| 3.1 RNA的扩增质量检测结果 | 第36-37页 |
| 3.2 碱基分布分析 | 第37页 |
| 3.3 READS污染分析 | 第37-38页 |
| 3.4 Reads比对结果统计 | 第38-39页 |
| 3.5 基因覆盖度分析 | 第39页 |
| 3.6 测序饱和度分析 | 第39-40页 |
| 3.7 表达差异基因分析 | 第40-43页 |
| 3.8 影响羔羊卵母细胞成熟的重要通路及基因的筛选 | 第43-44页 |
| 3.9 荧光定量验证 | 第44-46页 |
| 4 讨论与分析 | 第46-47页 |
| 4.1 影响羔羊卵母细胞成熟重要因子的分析 | 第46页 |
| 4.2 影响羔羊卵母细胞成熟重要基因的筛选 | 第46-47页 |
| 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第54-55页 |
