| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-24页 |
| 1.1 麻疹病毒属反向遗传研究进展 | 第14-18页 |
| 1.1.1 麻疹病毒的感染性克隆 | 第15页 |
| 1.1.2 牛瘟病毒的感染性克隆 | 第15-16页 |
| 1.1.3 犬瘟热病毒的感染性克隆 | 第16-17页 |
| 1.1.4 小反刍兽疫病毒的感染性克隆 | 第17-18页 |
| 1.2 反向遗传操作系统 | 第18-19页 |
| 1.2.1 基于T7 RNA聚合酶的反向遗传操作系统 | 第18-19页 |
| 1.2.2 基于RNA聚合酶II的反向遗传操作系统 | 第19页 |
| 1.3 麻疹病毒属重要受体 | 第19-22页 |
| 1.3.1 CD150/Signaling Lymphocyte Activation Molecule (SLAM) | 第19-20页 |
| 1.3.2 Nectin 4/Poliovirus receptor-related 4(PVRL4) | 第20-21页 |
| 1.3.3 CD46/Membrane Cofactor Protein (MCP) | 第21-22页 |
| 1.3.4 CD209/Dendritic Cell-Specific Intracellular Adhesion Molecule3-Grabbing Nonintegrin (DC-SIGN) | 第22页 |
| 1.3.5 CD147/Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer (EMMPRIN) | 第22页 |
| 1.3.6 Neurokinin-1 (NK-1) | 第22页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 小反刍兽疫病毒全长基因组及微基因组的构建 | 第24-46页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 病毒、菌种和细胞 | 第24页 |
| 2.1.2 载体与主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第25页 |
| 2.2.2 PPRV TCID50的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.3 PPRV cDNA的制备 | 第26页 |
| 2.2.4 目的基因的RT-PCR扩增及鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.5 构建带有核酶的载体 | 第28页 |
| 2.2.6 全长cDNA的连接 | 第28-29页 |
| 2.2.7 辅助质粒的构建及酶切鉴定 | 第29-32页 |
| 2.2.8 辅助质粒的活性鉴定 | 第32页 |
| 2.2.9 微基因组的构建及鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3 结果 | 第34-44页 |
| 2.3.1 TCID50的测定 | 第34页 |
| 2.3.2 RT-PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| 2.3.3 阳性质粒的鉴定结果 | 第35页 |
| 2.3.4 F1F2片段的连接及鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.5 F3F4片段的连接及鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.6 F5F6F7片段的连接及鉴定 | 第37-38页 |
| 2.3.7 全长的连接及鉴定 | 第38-40页 |
| 2.3.8 全长测序结果 | 第40页 |
| 2.3.9 辅助性质粒的构建方法 | 第40页 |
| 2.3.10 辅助性质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.11 辅助性质粒的活性鉴定结果 | 第41-42页 |
| 2.3.12 微基因组的构建方法 | 第42-43页 |
| 2.3.13 微基因组的鉴定 | 第43页 |
| 2.3.14 PPRV微基因组的拯救 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 山羊SLAM受体细胞系的构建及鉴定 | 第46-55页 |
| 3.1 材料 | 第46-47页 |
| 3.1.1 病毒、菌种和细胞 | 第46页 |
| 3.1.2 载体与主要试剂 | 第46-47页 |
| 3.2 方法 | 第47-50页 |
| 3.2.1 SLAM基因的扩增及鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.2 SLAM基因的氨基酸分析 | 第48-49页 |
| 3.2.3 SLAM基因稳转细胞制备及鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3 结果 | 第50-54页 |
| 3.3.1 PCR扩增结果 | 第50页 |
| 3.3.2 酶切鉴定结果 | 第50-51页 |
| 3.3.3 SLAM基因的氨基酸分析结果 | 第51-52页 |
| 3.3.4 p Display-SLAM的酶切鉴定 | 第52页 |
| 3.3.5 RT-PCR的鉴定 | 第52-53页 |
| 3.3.6 Western Blot鉴定 | 第53页 |
| 3.3.7 稳转细胞系的接毒实验 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 H蛋白与SLAM受体相互作用的研究 | 第55-66页 |
| 4.1 材料 | 第55页 |
| 4.1.1 病毒、菌种和细胞 | 第55页 |
| 4.1.2 载体与主要试剂 | 第55页 |
| 4.2 方法 | 第55-58页 |
| 4.2.1 PPRV H蛋白分析 | 第55-56页 |
| 4.2.2 H与SLAM受体相互作用预测 | 第56页 |
| 4.2.3 H蛋白胞外区的表达及分段表达 | 第56-57页 |
| 4.2.4 SLAM基因的表达 | 第57-58页 |
| 4.2.5 PPRV Nigeria 75/1 克隆株H蛋白与山羊SLAM受体相互作用 | 第58页 |
| 4.3 结果 | 第58-65页 |
| 4.3.1 PPRV H蛋白分析结果 | 第58-60页 |
| 4.3.2 H蛋白与SLAM受体蛋白模型预测结果 | 第60-61页 |
| 4.3.3 PPRV Nigeria 75/1 克隆株、PPRV Nigeria 75/1 疫苗株的H蛋白与不同SLAM受体相互作用预测结果 | 第61-62页 |
| 4.3.4 Tibet 07 株H蛋白不同SLAM相互作用预测结果 | 第62-63页 |
| 4.3.5 PPRV Nigeria 75/1 克隆株和Tibet 07 株H基因的扩增及鉴定结果 | 第63-64页 |
| 4.3.6 山羊SLAM受体胞外区的扩增及鉴定结果 | 第64-65页 |
| 4.3.7 PPRV Nigeria 75/1 克隆株H蛋白与山羊SLAM受体相互作用结果 | 第65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-66页 |
| 第五章 全文结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |
