摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩写 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-18页 |
引言 | 第18-19页 |
1 材料与方法 | 第19-28页 |
1.1 细菌菌株及主要载体 | 第19页 |
1.2 主要酶及试剂 | 第19页 |
1.3 培养基及缓冲液 | 第19页 |
1.4 仪器设备 | 第19-20页 |
1.5 PCR引物 | 第20页 |
1.6 培养鸭疫里默氏杆菌 CH3 株及基因组的提取 | 第20页 |
1.7 RA CH3株ompA基因同源臂及抗性片段的克隆 | 第20-21页 |
1.8 pT-omp A-LSR 重组质粒的构建 | 第21-22页 |
1.9 自杀性重组质粒pDS132-ompA-LSR的构建 | 第22-24页 |
1.10 RA CH3株基因缺失株CH3ΔompA的筛选与鉴定 | 第24页 |
1.11 CH3ΔompA的基因互补株的构建 | 第24-26页 |
1.12 RA基因缺失株CH3ΔompA的部分生物学特性的研究 | 第26-28页 |
2 结果与分析 | 第28-40页 |
2.1 RA CH3株ompA基因缺失株的构建 | 第28-33页 |
2.1.1 CH3株ompA基因左右两侧同源臂DNA片段的克隆 | 第28-29页 |
2.1.2 壮观霉素抗性基因(Spc)的克隆及测序 | 第29-30页 |
2.1.3 重组质粒pT-ompA-LSR的构建 | 第30页 |
2.1.4 重组质粒pT-ompA-LSR的鉴定 | 第30-31页 |
2.1.5 构建自杀性重组质粒pDS132-ompA-LSR | 第31-32页 |
2.1.6 自杀性重组质粒p DS132-ompA-LSR的鉴定 | 第32页 |
2.1.7 RAompA 基因缺失株的筛选与鉴定 | 第32-33页 |
2.2 CH3ΔompA突变株的互补株构建 | 第33-36页 |
2.2.1 CH3株ompA基因片段的克隆 | 第33-34页 |
2.2.2 回复质粒pRES0-ompA构建与鉴定 | 第34-35页 |
2.2.3 缺失株CH3ΔompA回复株的鉴定 | 第35-36页 |
2.3 Western blot结果 | 第36-37页 |
2.4 RA基因缺失株 CH3ΔompA 生物学特性 | 第37-40页 |
2.4.1 三株细菌生长曲线的测定 | 第37页 |
2.4.2 ompA基因缺失株对高浓度离子、EDTA、强酸强碱和去污剂的耐受影响 | 第37-38页 |
2.4.3 ompA基因缺失株对抗生素敏感性的影响 | 第38-39页 |
2.4.4 三株细菌生物被膜形成能力的测定 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
4 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |