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PVY引起马铃薯块茎坏死相关基因研究与抗病毒药物筛选

摘要第4-5页
abstract第5-6页
缩略词第7-11页
第一章 绪论第11-24页
    1.1 马铃薯病毒概况第11-12页
    1.2 马铃薯Y病毒的危害第12页
    1.3 马铃薯Y病毒的致病机理第12-13页
    1.4 植物病毒检测方法研究进展第13-18页
        1.4.1 生物学检测方法第14页
        1.4.2 电子显微镜检测方法第14-15页
        1.4.3 血清学检测方法第15-16页
            1.4.3.1 ELISA第15页
            1.4.3.2 组织印记法第15页
            1.4.3.3 石英晶体微天平免疫传感器法(QCMI)第15-16页
        1.4.4 分子生物学方法第16-18页
            1.4.4.1 核酸分子杂交技术第16页
            1.4.4.2 双链RNA电泳技术第16页
            1.4.4.3 PCR和逆转录PCR第16-17页
            1.4.4.4 实时荧光定量PCR技术第17页
            1.4.4.5 多重PCR第17页
            1.4.4.6 巢式PCR第17-18页
            1.4.4.7 依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)第18页
            1.4.4.8 环介导等温扩增技术(LAMP)第18页
    1.5 PVY引起马铃薯块茎坏死的研究进展第18-19页
        1.5.1 PVY引起马铃薯块茎坏死的发现与特征第18-19页
        1.5.2 PVY引起马铃薯块茎坏死的防治第19页
    1.6 植物源物质防治植物病毒病第19-21页
    1.7 抗植物病毒物质的作用机理研究进展第21-23页
        1.7.1 抑制病毒对寄主的侵染第21页
        1.7.2 抑制病毒的增殖第21-22页
        1.7.3 抑制病毒症状的表达第22页
        1.7.4 增强植物抗病能力第22-23页
    1.8 植物病毒抑制剂的筛选方法第23页
    1.9 选题的目的和意义第23-24页
第二章 PVY引起马铃薯块茎坏死相关基因研究第24-44页
    2.1 材料与方法第24-29页
        2.1.1 实验材料、仪器与试剂第24页
        2.1.2 实验设计与研究方法第24-29页
            2.1.2.1 细胞坏死相关基因的获取第25页
            2.1.2.2 引物的设计和筛选第25页
            2.1.2.3 总RNA提取及检测第25-27页
            2.1.2.4 cDNA合成第27-28页
            2.1.2.5 RT-PCR扩增目的片段第28页
            2.1.2.6 测序与分析第28页
            2.1.2.7 qPCR分析第28-29页
            2.1.2.8 目标基因编码蛋白的结构分析第29页
    2.2 结果与分析第29-41页
        2.2.1 马铃薯块茎RNA提取及完整性检测第29页
        2.2.2 PVY单一侵染马铃薯样本检测第29-30页
        2.2.3 引物筛选结果第30-31页
        2.2.4 PCR扩增目标基因第31-32页
        2.2.5 测序与分析第32页
        2.2.6 RT-q PCR检测目标基因的表达情况第32-37页
            2.2.6.1 RCCR基因相对定量结果第33-34页
            2.2.6.2 LSD1基因相对定量结果第34-35页
            2.2.6.3 StCaM2基因相对定量结果第35-36页
            2.2.6.4 StCaM3基因相对定量结果第36-37页
        2.2.7 目标基因编码蛋白的结构分析第37-41页
            2.2.7.1 RCCR基因编码蛋白的物理性质第38-39页
            2.2.7.2 LSD1基因编码蛋白的物理性质第39-41页
    2.3 讨论第41-44页
第三章 抗病毒药物筛选实验第44-53页
    3.1 实验材料第44页
        3.1.1 供试毒源第44页
        3.1.2 供试植物第44页
        3.1.3 供试药剂和浓度第44页
        3.1.4 试验仪器第44页
        3.1.5 试剂与药品第44页
    3.2 实验方法第44-47页
        3.2.1 培育无病植株第44-45页
        3.2.2 马铃薯Y病毒的接种方法第45页
        3.2.3 马铃薯Y病毒的纯化方法第45页
        3.2.4 盆栽试验第45-47页
            3.2.4.1 PVY活体治疗试验第45-46页
            3.2.4.2 PVY活体钝化试验第46页
            3.2.4.3 PVY活体保护试验第46页
            3.2.4.4 药剂对PVY在系统寄主上扩展的影响第46-47页
    3.3 结果与分析第47-51页
        3.3.1 活体治疗结果第47-48页
        3.3.2 活体钝化结果第48-49页
        3.3.3 活体保护结果第49-50页
        3.3.4 药剂对PVY在系统寄主上的防效第50-51页
    3.4 讨论第51-53页
第四章 全文结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
作者简历第62页

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