摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略词 | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 马铃薯病毒概况 | 第11-12页 |
1.2 马铃薯Y病毒的危害 | 第12页 |
1.3 马铃薯Y病毒的致病机理 | 第12-13页 |
1.4 植物病毒检测方法研究进展 | 第13-18页 |
1.4.1 生物学检测方法 | 第14页 |
1.4.2 电子显微镜检测方法 | 第14-15页 |
1.4.3 血清学检测方法 | 第15-16页 |
1.4.3.1 ELISA | 第15页 |
1.4.3.2 组织印记法 | 第15页 |
1.4.3.3 石英晶体微天平免疫传感器法(QCMI) | 第15-16页 |
1.4.4 分子生物学方法 | 第16-18页 |
1.4.4.1 核酸分子杂交技术 | 第16页 |
1.4.4.2 双链RNA电泳技术 | 第16页 |
1.4.4.3 PCR和逆转录PCR | 第16-17页 |
1.4.4.4 实时荧光定量PCR技术 | 第17页 |
1.4.4.5 多重PCR | 第17页 |
1.4.4.6 巢式PCR | 第17-18页 |
1.4.4.7 依赖核酸序列的扩增技术(NASBA) | 第18页 |
1.4.4.8 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第18页 |
1.5 PVY引起马铃薯块茎坏死的研究进展 | 第18-19页 |
1.5.1 PVY引起马铃薯块茎坏死的发现与特征 | 第18-19页 |
1.5.2 PVY引起马铃薯块茎坏死的防治 | 第19页 |
1.6 植物源物质防治植物病毒病 | 第19-21页 |
1.7 抗植物病毒物质的作用机理研究进展 | 第21-23页 |
1.7.1 抑制病毒对寄主的侵染 | 第21页 |
1.7.2 抑制病毒的增殖 | 第21-22页 |
1.7.3 抑制病毒症状的表达 | 第22页 |
1.7.4 增强植物抗病能力 | 第22-23页 |
1.8 植物病毒抑制剂的筛选方法 | 第23页 |
1.9 选题的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 PVY引起马铃薯块茎坏死相关基因研究 | 第24-44页 |
2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
2.1.1 实验材料、仪器与试剂 | 第24页 |
2.1.2 实验设计与研究方法 | 第24-29页 |
2.1.2.1 细胞坏死相关基因的获取 | 第25页 |
2.1.2.2 引物的设计和筛选 | 第25页 |
2.1.2.3 总RNA提取及检测 | 第25-27页 |
2.1.2.4 cDNA合成 | 第27-28页 |
2.1.2.5 RT-PCR扩增目的片段 | 第28页 |
2.1.2.6 测序与分析 | 第28页 |
2.1.2.7 qPCR分析 | 第28-29页 |
2.1.2.8 目标基因编码蛋白的结构分析 | 第29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-41页 |
2.2.1 马铃薯块茎RNA提取及完整性检测 | 第29页 |
2.2.2 PVY单一侵染马铃薯样本检测 | 第29-30页 |
2.2.3 引物筛选结果 | 第30-31页 |
2.2.4 PCR扩增目标基因 | 第31-32页 |
2.2.5 测序与分析 | 第32页 |
2.2.6 RT-q PCR检测目标基因的表达情况 | 第32-37页 |
2.2.6.1 RCCR基因相对定量结果 | 第33-34页 |
2.2.6.2 LSD1基因相对定量结果 | 第34-35页 |
2.2.6.3 StCaM2基因相对定量结果 | 第35-36页 |
2.2.6.4 StCaM3基因相对定量结果 | 第36-37页 |
2.2.7 目标基因编码蛋白的结构分析 | 第37-41页 |
2.2.7.1 RCCR基因编码蛋白的物理性质 | 第38-39页 |
2.2.7.2 LSD1基因编码蛋白的物理性质 | 第39-41页 |
2.3 讨论 | 第41-44页 |
第三章 抗病毒药物筛选实验 | 第44-53页 |
3.1 实验材料 | 第44页 |
3.1.1 供试毒源 | 第44页 |
3.1.2 供试植物 | 第44页 |
3.1.3 供试药剂和浓度 | 第44页 |
3.1.4 试验仪器 | 第44页 |
3.1.5 试剂与药品 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-47页 |
3.2.1 培育无病植株 | 第44-45页 |
3.2.2 马铃薯Y病毒的接种方法 | 第45页 |
3.2.3 马铃薯Y病毒的纯化方法 | 第45页 |
3.2.4 盆栽试验 | 第45-47页 |
3.2.4.1 PVY活体治疗试验 | 第45-46页 |
3.2.4.2 PVY活体钝化试验 | 第46页 |
3.2.4.3 PVY活体保护试验 | 第46页 |
3.2.4.4 药剂对PVY在系统寄主上扩展的影响 | 第46-47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-51页 |
3.3.1 活体治疗结果 | 第47-48页 |
3.3.2 活体钝化结果 | 第48-49页 |
3.3.3 活体保护结果 | 第49-50页 |
3.3.4 药剂对PVY在系统寄主上的防效 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
第四章 全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62页 |