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马铃薯钾离子通道蛋白SKT1的克隆与原核表达

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 引言第9-13页
    1.1 钾素营养第9-10页
        1.1.1 钾素的生理功能第9-10页
        1.1.2 钾素对马铃薯的重要性第10页
    1.2 植物吸收钾素的途径第10-11页
    1.3 钾离子通道蛋白第11-12页
        1.3.1 钾离子通道蛋白简介第11-12页
        1.3.2 钾离子通道蛋白的研究进展第12页
    1.4 本研究的目的和意义第12-13页
2 实验材料和方法第13-28页
    2.1 实验材料第13-17页
        2.1.1 幼苗第13页
        2.1.2 感受态细胞第13页
        2.1.3 质粒第13-14页
        2.1.4 引物第14-15页
        2.1.5 主要试剂与试剂盒第15页
        2.1.6 主要仪器第15页
        2.1.7 培养基第15页
        2.1.8 主要溶液第15-17页
    2.2 实验方法第17-28页
        2.2.1 马铃薯总RNA的提取及浓度和纯度的测定第17-18页
        2.2.2 反转录获得马铃薯的cDNA第18-19页
        2.2.3 SKT1基因的克隆第19-20页
        2.2.4 pET30-TEV/LIC重组载体的构建第20-23页
        2.2.5 诱导表达第23-25页
        2.2.6 SKT1重组蛋白包涵体的变性第25页
        2.2.7 SKT1重组蛋白包涵体的纯化第25页
        2.2.8 SKT1重组蛋白包涵体的复性第25-26页
        2.2.9 SKT1蛋白Western blotting鉴定第26-28页
3 结果与分析第28-34页
    3.1 马铃薯RNA和cDNA的浓度和纯度测定第28页
    3.2 马铃薯SKT1基因的克隆第28-29页
    3.3 SspⅠ酶切pET30载体第29页
    3.4 连接产物转化DH5α第29-30页
    3.5 pET30-SKT1重组质粒双酶切鉴定第30-31页
    3.6 重组质粒转化BL21(DE3)第31页
    3.7 马铃薯SKT1基因在大肠杆菌中的表达第31-32页
    3.8 SKT1重组蛋白包涵体的纯化与复性第32-33页
    3.9 SKT1蛋白的Western Blotting鉴定第33-34页
4 结论与讨论第34-35页
    4.1 结论第34页
    4.2 讨论第34-35页
致谢第35-36页
参考文献第36-39页
作者简介第39页

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