| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第13-32页 |
| 1.1 病毒的病原学 | 第14-16页 |
| 1.1.1 DHAV病原学分类 | 第14页 |
| 1.1.2 DHAV的形态学 | 第14页 |
| 1.1.3 DHAV病毒的抵抗力 | 第14-15页 |
| 1.1.4 DHAV的生物学特性 | 第15页 |
| 1.1.5 病毒的致病力和致病机理 | 第15-16页 |
| 1.2 鸭肝炎病毒的流行病学 | 第16-17页 |
| 1.2.1 病毒的宿主 | 第17页 |
| 1.2.2 病毒的传播途径 | 第17页 |
| 1.3 鸭肝炎病毒的临床症状和病理变化 | 第17-18页 |
| 1.4 DHAV的分子生物学研究 | 第18-20页 |
| 1.4.1 病毒基因组结构特点 | 第18-19页 |
| 1.4.2 DHAV的变异性 | 第19-20页 |
| 1.5 VP1蛋白 | 第20-21页 |
| 1.6 鸭甲肝病毒的增殖培养和纯化 | 第21-23页 |
| 1.6.1 胚胎培养 | 第21页 |
| 1.6.2 细胞增殖培养 | 第21-23页 |
| 1.6.3 DHAV的纯化 | 第23页 |
| 1.7 鸭甲肝病毒的诊断方法 | 第23-29页 |
| 1.7.1 病毒的分离 | 第23-24页 |
| 1.7.2 病毒的鉴定 | 第24页 |
| 1.7.3 临床诊断 | 第24-25页 |
| 1.7.4 分子生物学诊断 | 第25页 |
| 1.7.5 血清学检测手段 | 第25-29页 |
| 1.7.5.1 血清中和试验（Virus-neutralization test, VN） | 第25-26页 |
| 1.7.5.2 琼脂免疫扩散试验 | 第26页 |
| 1.7.5.3 间接血凝试验 | 第26-27页 |
| 1.7.5.4 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第27-28页 |
| 1.7.5.5 免疫组化技术 | 第28-29页 |
| 1.7.5.5 其他血清学诊断方法 | 第29页 |
| 1.8 DHAV的预防和治疗 | 第29-30页 |
| 1.9 本研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-41页 |
| 2.1 材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 病料和菌株 | 第32页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第32页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第32页 |
| 2.1.5 实验所用溶液配制 | 第32-33页 |
| 2.1.6 引物设计和合成 | 第33-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-41页 |
| 2.2.1 DHAV-35 株毒在SPF鸡胚上的传代试验 | 第34页 |
| 2.2.2 各毒株各代次鸡胚传代毒VP1基因的测序 | 第34-41页 |
| 2.2.2.1 病毒RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.2.2 病毒的RT-PCR鉴定 | 第35页 |
| 2.2.2.3 PCR扩增 | 第35-36页 |
| 2.2.2.4 PCR产物的回收 | 第36-37页 |
| 2.2.2.5 连接 | 第37页 |
| 2.2.2.6 DH5a大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.2.7 转化 | 第38页 |
| 2.2.2.8 质粒DNA的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.2.9 重组质粒的双酶切鉴定 | 第39页 |
| 2.2.2.10 阳性克隆序列测定 | 第39页 |
| 2.2.2.11 VP1序列分析 | 第39-40页 |
| 2.2.2.12 动物回归试验 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-57页 |
| 3.1 传代后胚体死亡规律 | 第41-42页 |
| 3.2 DHAV-3 鸡胚传代毒的VP1序列测定 | 第42页 |
| 3.3 阳性质粒的双酶切鉴定结果 | 第42-43页 |
| 3.4 5株DHAV-3 病毒传代后各代次VP1蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第43-57页 |
| 3.4.1 1C传代后各代次VP1蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第43-45页 |
| 3.4.2 2C传代后各代次VP1蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第45-47页 |
| 3.4.3 3C传代后各代次VP1蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第47-49页 |
| 3.4.4 4C传代后各代次VP1蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第49-51页 |
| 3.4.5 5C传代后各代次VP1蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析 | 第51-53页 |
| 3.4.6 5株病毒之间变异情况的比较 | 第53-55页 |
| 3.4.7 动物回归试验结果 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-69页 |
| 7 致谢 | 第69页 |
