| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 1. 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 应激的概念及其作用机制 | 第11-16页 |
| 1.1.1 应激的基本概念 | 第11页 |
| 1.1.2 应激及相关激素的调控 | 第11-14页 |
| 1.1.2.1 HPA轴活性的调控 | 第11-12页 |
| 1.1.2.2 应激中CRH的作用 | 第12-13页 |
| 1.1.2.3 应激中糖皮质激素的作用 | 第13-14页 |
| 1.1.3 应激对雌性生殖的作用 | 第14-16页 |
| 1.2 心理应激对雌性生殖系统的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.1 心理应激对卵巢、胚胎及配子的影响 | 第16页 |
| 1.2.2 心理应激模型的选择与建立 | 第16-17页 |
| 1.3 氧化应激对雌性生殖系统的影响 | 第17-24页 |
| 1.3.1 活性氧物质及其与雌性生殖系统的关系 | 第18-19页 |
| 1.3.2 机体内的抗氧化物 | 第19-21页 |
| 1.3.2.1 酶类抗氧化物 | 第19-20页 |
| 1.3.2.2 非酶类抗氧化物 | 第20-21页 |
| 1.3.3 氧化应激的检测 | 第21页 |
| 1.3.4 氧化应激对雌性生殖系统的作用 | 第21-22页 |
| 1.3.5 氧化应激中细胞因子对雌性生殖的作用 | 第22-23页 |
| 1.3.6 氧化应激与胚胎发育的关系 | 第23-24页 |
| 1.4 本实验的内容、目的及意义 | 第24-25页 |
| 2. 材料方法 | 第25-38页 |
| 2.1 主要试剂及配置 | 第25页 |
| 2.2 动物及其处理方法 | 第25-26页 |
| 2.3 小鼠饮水采食的测定 | 第26页 |
| 2.4 胚胎统计及囊胚细胞数的计数 | 第26页 |
| 2.5 胚胎GSX及GSH的测定 | 第26-27页 |
| 2.6 小鼠血清及输卵管组织的获取 | 第27页 |
| 2.7 血清及输卵管匀浆中皮质醇的检测 | 第27页 |
| 2.8 血清及输卵管匀浆中CRH的检测 | 第27-28页 |
| 2.9 免疫荧光检测及定量不同阶段胚胎中的GR、CRHR1 TNF-R1和活化的caspase-3 | 第28-29页 |
| 2.9.1 胚胎的获取、固定及卵裂球的分离 | 第28页 |
| 2.9.2 CRHR1的染色方法 | 第28页 |
| 2.9.3 GR的染色方法 | 第28-29页 |
| 2.9.4 TNF-R1的染色方法 | 第29页 |
| 2.9.5 活化的caspase-3的染色方法 | 第29页 |
| 2.10 Western Blot检测输卵管上皮中的GR、CRHR1和活化的caspase-3 | 第29-32页 |
| 2.10.1 Western blot相关试剂的制备 | 第29-30页 |
| 2.10.2 上皮蛋白样品的制备 | 第30页 |
| 2.10.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
| 2.10.4 抗原抗体的结合及显色 | 第31-32页 |
| 2.11 血清及输卵管匀浆中TOS、TAS及OSI的检测 | 第32-33页 |
| 2.11.1 样品的制备 | 第32页 |
| 2.11.2 血清及输卵管匀浆中TOS的检测 | 第32页 |
| 2.11.3 血清及输卵管匀浆中TAS的检测 | 第32-33页 |
| 2.11.4 血清及输卵管匀浆中OSI的计算 | 第33页 |
| 2.12 输卵管匀浆中SOD活性的检测 | 第33页 |
| 2.13 输卵管匀浆中过氧化氢酶活性的检测 | 第33-34页 |
| 2.14 输卵管匀浆中FasL的检测 | 第34-35页 |
| 2.15 输卵管匀浆中TNF-α的检测 | 第35页 |
| 2.16 输卵管上皮中IGF-1 mRNA和BDNF mRNA的检测 | 第35-38页 |
| 2.16.1 输卵管上皮中总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.16.2 cDNA的生成 | 第36页 |
| 2.16.3 荧光定量PCR | 第36-38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-48页 |
| 3.1 束缚应激模型的建立 | 第38-40页 |
| 3.1.1 着床前期母体束缚应激对饮水和采食的影响 | 第38页 |
| 3.1.2 着床前期母体束缚应激对胚胎发育的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.3 着床前期母体束缚应激对胚胎中GSX、GSH、GSSG和GSH/GSSG的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 母体束缚应激对相关激素及其受体表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.1 着床前期母体束缚应激48h对血清和输卵管匀浆中皮质醇和CRH的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.2 胚胎中GR和CRHR1表达的情况及应激对胚胎GR表达的影响 | 第41页 |
| 3.2.3 着床前期母体束缚应激48h对输卵管上皮中GR和CRHR1表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.3 母体束缚应激引起的氧化应激 | 第42-44页 |
| 3.3.1 着床前期母体束缚应激48h对血清及输卵管匀浆中TOS、TAS及OSI的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.2 着床前期母体束缚应激48h对输卵管匀浆中SOD和Catalase活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.4 着床前期母体束缚应激48h对胚胎及输卵管上皮凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 3.5 着床前期母体束缚应激对细胞因子的影响 | 第45-48页 |
| 3.5.1 着床前期母体束缚应激48h对输卵管匀浆中FasL及TNF-α水平的影响 | 第45-46页 |
| 3.5.2 胚胎中TNF-R1的表达情况 | 第46页 |
| 3.5.3 着床前期母体束缚应激48h对输卵管上皮中IGF-1和BDNF表达的影响 | 第46-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-54页 |
| 4.1 心理应激模型的建立及有效性 | 第48-49页 |
| 4.2 应激对胚胎发育的影响 | 第49页 |
| 4.3 应激相关激素的调控及其作用 | 第49-50页 |
| 4.4 应激与凋亡的关系 | 第50-51页 |
| 4.5 应激中细胞因子的变化及作用机制 | 第51-52页 |
| 4.6 应激中GR及CRHR1的调控及作用机理 | 第52-54页 |
| 5. 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82页 |
