| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 一、前言 | 第11-19页 |
| 1. 病原菌和寄主植物的互作机制 | 第11-13页 |
| 1.1 辣椒疫霉菌形态和生活史 | 第11-12页 |
| 1.2 基因对基因假说 | 第12页 |
| 1.3 Zigzag理论 | 第12-13页 |
| 1.4 激发子-受体模式 | 第13页 |
| 2. 椒疫霉中发现的效应分子 | 第13-16页 |
| 2.1. 病原物-植物效应分子 | 第13-14页 |
| 2.2 卵菌效应分子 | 第14页 |
| 2.3 酶抑制剂 | 第14页 |
| 2.4 坏死和乙烯诱导蛋白近似蛋白(NLPs) | 第14页 |
| 2.5 纤维素结合、激发子及类植物凝集素CBEL(Cellulose BindingElicitor,and Lectin-like) | 第14-15页 |
| 2.6 CRN效应分子 | 第15页 |
| 2.7 RxLR效应分子家族 | 第15-16页 |
| 3. RxLR效应分子研究进展 | 第16-18页 |
| 3.1. RxLR效应分子结构 | 第16页 |
| 3.2. C端功能域 | 第16页 |
| 3.3. N端保守结构域 | 第16-17页 |
| 3.4. RxLR效应分子的毒性 | 第17页 |
| 3.5. RxLR效应分子的转运机制 | 第17-18页 |
| 3.6 其它RxLR效应分子研究进展 | 第18页 |
| 4. 实验的研究意义 | 第18-19页 |
| 二、实验材料与方法 | 第19-29页 |
| 1. 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 1.2 培养基和培养条件 | 第19页 |
| 1.3 质粒和载体 | 第19-20页 |
| 1.4 本实验中所使用的试剂 | 第20页 |
| 1.5 实验中所需要的植物材料 | 第20页 |
| 2. 实验方法 | 第20-29页 |
| 2.1 核酸制备 | 第20-23页 |
| 2.1.1 DNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.1.2 RNA的提取和cDNA的反转录 | 第21-22页 |
| 2.1.3 质粒DNA的提取 | 第22页 |
| 2.1.4 PCR产物纯化 | 第22-23页 |
| 2.1.5 PCR产物胶回收 | 第23页 |
| 2.2 目的基因的扩增和载体构建 | 第23页 |
| 2.3 大肠杆菌的转化 | 第23-24页 |
| 2.4 农杆菌转化 | 第24页 |
| 2.5 瞬时表达 | 第24-25页 |
| 2.6 相对毒力检测 | 第25页 |
| 2.7 沉默表达载体构建 | 第25-26页 |
| 2.8 辣椒疫霉PEG法原生质体制备和转化 | 第26-27页 |
| 2.9 转化子的半定量验证 | 第27页 |
| 2.10 转化子的定量验证 | 第27页 |
| 2.11 突变体菌落生长速率的测定 | 第27-28页 |
| 2.12 致病性分析 | 第28-29页 |
| 三、结果与分析 | 第29-43页 |
| 1. RxLR效应分子的筛选 | 第29-38页 |
| 2. Avhl21在辣椒疫霉生活史的不同阶段的表达 | 第38-39页 |
| 3. Avh121 RNAi沉默突变体的获得 | 第39-40页 |
| 4. Avh121的突变体菌落生长速率测定 | 第40-41页 |
| 5. Avh121突变体菌丝形态分析 | 第41页 |
| 6. Avh121突变体的致病情况 | 第41-43页 |
| 四、总结与讨论 | 第43-46页 |
| 1. Avh108、Avh110和Avh121的生物信息学分析 | 第43页 |
| 2. Avh108、Avh110和Avh121的瞬时表达 | 第43-44页 |
| 3. Avh121突变体形态分析 | 第44-45页 |
| 4. Avh121对辣椒疫霉菌的致病性的影响 | 第45-46页 |
| 附录 | 第46-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
