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微囊藻毒素对典型水生生物的生态毒理效应及分子致毒机制研究

摘要第9-12页
Abstract第12-15页
缩略词第16-18页
论文的研究特色与创新点第18-19页
第一章 绪论第19-51页
    1 水环境富营养化污染现状第19-20页
    2 微囊藻毒素概况第20-24页
        2.1 微囊藻毒素的产生及理化性质第20-21页
        2.2 微囊藻毒素的迁移转化第21-22页
        2.3 微囊藻毒素的污染现状第22-24页
            2.3.1 我国天然及水库水体的微囊藻毒素污染第22-23页
            2.3.2 饮用水的微囊藻毒素污染第23页
            2.3.3 水产品中的微囊藻毒素累积及健康风险第23-24页
    3 微囊藻毒素的分子致毒机理第24-27页
        3.1 蛋白磷酸酶抑制途径第24-25页
        3.2 活性氧途径第25-26页
        3.3 其他途径第26-27页
    4 微囊藻毒素对水生生物的生态毒理学研究进展第27-30页
        4.1 微囊藻毒素的毒性特点及典型毒理学效应第27页
        4.2 微囊藻毒素对水生植物的生态毒理学研究进展第27-28页
        4.3 微囊藻毒素对鱼类的生态毒理学研究进展第28-30页
    5 水生生态毒理学中分子生物标志物研究及其进展第30-41页
        5.1 生态毒理学研究进展第30-32页
        5.2 生物标志物定义、分类及功能第32-33页
        5.3 水环境毒理学中常见生物标志物及其研究进展第33-38页
            5.3.1 活性氧及抗氧化防御系统指标的研究第33-37页
            5.3.2 应激蛋白HSP70的研究第37-38页
            5.3.3 细胞色素P450的研究第38页
        5.4 应用蛋白质组学研究敏感生物标志物第38-41页
    6 研究思路第41-45页
        6.1 选题依据第41-42页
        6.2 研究目的及其意义第42-43页
        6.3 研究内容与技术路线第43-45页
    参考文献第45-51页
第二章 MC-LR在苦草叶部的累积及其对苦草的生态毒理效应第51-75页
    1 引言第51-52页
    2 材料和方法第52-56页
        2.1 主要试剂第52页
        2.2 实验苦草及暴露处理第52页
        2.3 MC-LR的提取和测定第52-53页
            2.3.1 水中MC-LR的提取和测定第53页
            2.3.2 苦草叶片中MC-LR提取和测定第53页
        2.4 苦草超氧阴离子和过氧化氢自由基测定第53-54页
        2.5 苦草叶片抗氧化系统指标测定第54页
        2.6 苦草叶片谷胱甘肽含量测定第54-55页
        2.7 苦草叶片脂质过氧化水平测定第55页
        2.8 苦草叶片叶绿素含量测定第55页
        2.9 扫描电镜和投射电镜观察第55-56页
        2.10 数据分析第56页
    3 结果第56-67页
        3.1 暴露期水中MC-LR浓度的监测第56-57页
        3.2 苦草对MC-LR的吸收和累积第57-58页
        3.3 MC-LR暴露对苦草叶片自由基水平的影响第58-59页
            3.3.1 MC-LR暴露对苦草叶片O_2~(·-)水平的影响第58-59页
            3.3.2 MC-LR暴露对苦草叶片H_2O_2水平的影响第59页
        3.4 MC-LR暴露对苦草叶片抗氧化系统酶活性的影响第59-60页
        3.5 MC-LR暴露对苦草叶片谷胱甘肽含量的影响第60-62页
        3.7 MC-LR暴露对苦草叶片MDA含量的影响第62页
        3.8 MC-LR暴露对苦草叶片可溶性蛋白和叶绿素含量的影响第62-63页
        3.9 MC-LR暴露对苦草叶片超显微结构的影响第63-67页
    4 讨论第67-71页
    本章小结第71-72页
    参考文献第72-75页
第三章 MC-LR对鲤鱼的生态毒理效应研究第75-131页
    引言第75-77页
    第一节 亚致死剂量MC-LR对鲤鱼的生态毒理效应研究第77-98页
        1 材料与方法第77-82页
            1.1 仪器与试剂第77页
            1.2 实验鲤鱼及暴露处理第77页
            1.3 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定第77-78页
            1.4 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定第78页
            1.5 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定第78页
            1.6 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定第78-79页
            1.7 鲤鱼肝脏显微结构观察第79页
            1.8 肝脏组织HSP70蛋白免疫组织化学观察第79页
            1.9 肝脏组织切片免疫共聚焦显微镜观察第79页
            1.10 实时荧光定量PCR第79-81页
            1.11 流式细胞仪检测第81页
            1.12 数据分析第81-82页
        2 结果第82-93页
            2.1 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响第82-83页
            2.2 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏关键酶活性的影响第83-84页
            2.3 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏谷胱甘肽系统的影响第84-85页
            2.4 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏MDA含量的影响第85-86页
            2.5 致死剂量MC-LR暴露下鲤鱼肝脏组织病理学观察第86-88页
            2.6 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏HSP70蛋白表达水平的影响第88-89页
            2.7 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏细胞骨架的影响第89-91页
            2.8 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏mRNA表达的影响第91-92页
            2.9 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏细胞凋亡的影响第92-93页
        3 讨论第93-97页
        4 结论第97-98页
    第二节 环境浓度MC-LR动态暴露对鲤鱼的氧化应激研究第98-106页
        1 材料与方法第98-99页
            1.1 仪器与试剂第98页
            1.2 实验鲤鱼及暴露处理第98页
            1.3 水中MC-LR的提取和测定第98页
            1.4 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定第98页
            1.5 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定第98页
            1.6 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定第98页
            1.7 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定第98页
            1.8 数据分析第98-99页
        2 结果第99-103页
            2.1 暴露期水中MC-LR浓度的监测第99页
            2.2 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响第99-100页
            2.3 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏CAT GST活性的影响第100-101页
            2.4 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏谷胱甘肽的影响第101-102页
            2.5 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏MDA含量的影响第102-103页
        3 讨论第103-105页
        4 结论第105-106页
    第三节 环境浓度MC-LR静态暴露对鲤鱼的生态毒理效应研究第106-125页
        1. 材料与方法第106-109页
            1.1 仪器与试剂第106页
            1.2 实验鲤鱼及暴露处理第106页
            1.3 MC-LR的提取和测定第106-107页
            1.4 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定第107页
            1.5 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定第107页
            1.6 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定第107页
            1.7 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定第107页
            1.8 鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性测定第107页
            1.9 鲤鱼肝脏HSP70和β-tubulin蛋白免疫组织化学观察第107-108页
            1.10 鲤鱼肝脏显微结构光镜观察第108页
            1.11 扫描电镜和投射电镜观察第108页
            1.12 流式细胞仪检测第108页
            1.13 数据分析第108-109页
        2 结果第109-121页
            2.1 暴露期水中MC-LR浓度的监测第109页
            2.2 MC-LR在鲤鱼不同器官/组织中的累积第109-111页
            2.3 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响第111-112页
            2.4 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏抗氧化系统指标的影响第112-113页
            2.5 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏MDA含量的影响第113页
            2.6 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性的影响第113页
            2.7 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏HSP70蛋白表达的影响第113-115页
            2.8 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏β-tubulin蛋白表达的影响第115-118页
            2.9 MC-LR静态暴露下鲤鱼肝脏组织病理学观察第118-119页
            2.10 MC-LR静态暴露下鲤鱼鳃组织病理学观察第119-120页
            2.11 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏细胞凋亡的影响第120-121页
        3 讨论第121-124页
        4 结论第124-125页
    本章小结第125-127页
    参考文献第127-131页
第四章 太湖蓝藻水华对鲤鱼生态毒理效应的原位研究及其早期预警初探第131-173页
    引言第131-134页
    第一节 太湖蓝藻水华对鲤鱼氧化应激的原位研究及其用作分子标志物的潜力第134-149页
        1 材料与方法第134-136页
            1.1 仪器与试剂第134页
            1.2 实验鲤鱼及原位实验第134-135页
            1.3 水体监测指标第135-136页
            1.4 鱼体组织中MC-LR的提取和测定第136页
            1.5 肝脏羟自由基含量测定第136页
            1.6 肝脏抗氧化系统指标测定第136页
            1.7 肝脏谷胱甘肽含量测定第136页
            1.8 肝脏脂质过氧化水平测定第136页
            1.9 数据分析第136页
        2 结果第136-144页
            2.1 原位实验水环境状况第136-137页
            2.2 MC在鱼体不同器官/组织中的累积第137-138页
            2.3 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响第138-139页
            2.4 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼肝脏抗氧化酶活性的影响第139-140页
            2.5 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼谷胱甘肽系统的影响第140-143页
            2.6 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼肝脏脂质过氧化和蛋白过氧化的影响第143-144页
        3 讨论第144-148页
        4 结论第148-149页
    第二节 原位蓝藻水华衍生污染物对鲤鱼肝脏毒性效应的比较蛋白组学分析第149-168页
        1 材料与方法第149-156页
            1.1 蛋白质组学相关试剂第149页
            1.2 实验点设置、受试生物及实验处理第149页
            1.3 蛋白提取及定量第149-150页
            1.4 荧光差异双向电泳(2D-DIGE)方法第150-155页
            1.5 质谱技术第155-156页
            1.6 Western Blotting分析第156页
            1.7 实时荧光定量PCR第156页
        2 结果第156-162页
            2.1 DIGE蛋白表达谱差异分析第156-159页
            2.2 差异蛋白的生物学功能第159-160页
            2.3 实时荧光定量PCR验证DIGE定量结果第160-161页
            2.4 Western blotting验证DIGE定量结果第161-162页
        3 讨论第162-167页
        4 结论第167-168页
    本章小结第168-170页
    参考文献第170-173页
第五章 微囊藻毒素和阿特拉津复合污染对鲤鱼的生态毒理效应初探第173-187页
    1 引言第173-174页
    2 材料和方法第174-176页
        2.1 仪器与试剂第174页
        2.2 实验鲤鱼及暴露处理第174-175页
        2.3 水中MC-LR和阿特拉津的提取和测定第175页
        2.4 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定第175页
        2.5 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定第175-176页
        2.6 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定第176页
        2.7 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定第176页
        2.8 鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性测定第176页
        2.9 鲤鱼肝脏显微结构光镜观察第176页
        2.10 扫描电镜观察第176页
        2.11 流式细胞仪检测第176页
        2.12 数据分析第176页
    3 结果第176-182页
        3.1 暴露期水中MC-LR和阿特拉津浓度的监测第176页
        3.2 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏羟自由基的影响第176-177页
        3.3 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏抗氧化系统的影响第177-178页
        3.4 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏脂质过氧化的影响第178页
        3.5 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性的影响第178页
        3.6 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏和鳃组织病理学的影响第178-181页
        3.7 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏细胞凋亡的影响第181-182页
    4 讨论第182-185页
    本章小结第185-186页
    参考文献第186-187页
第六章 结论与展望第187-192页
附录第192-210页
    附录1 LC-ESI-MS定性检测苦草叶片中MC-LR第192-194页
    附录2 变形梯度凝胶电泳检测实验检测部分样品结果第194-195页
    附录3 梅梁湾水域原位暴露相关信息第195-196页
    附录4 LC-ESI-MS定性检测原位实验SI点位經鱼肌肉中MC第196-198页
    附录5 部分重要试剂配制方法第198-202页
    附录6 复合污染实验期间水体MC-LR和阿特拉津的浓度数据第202-203页
    附录7 原位蓝藻水华暴露14 d鲤鱼肝脏差异表达蛋白鉴定列表(共57个蛋白)第203-209页
    附录8 受试生物中MDA含量与内源性ROS强度的相关关系第209-210页
博士在读期间的科研成果第210-212页
致谢第212-213页

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