摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
缩略词 | 第16-18页 |
论文的研究特色与创新点 | 第18-19页 |
第一章 绪论 | 第19-51页 |
1 水环境富营养化污染现状 | 第19-20页 |
2 微囊藻毒素概况 | 第20-24页 |
2.1 微囊藻毒素的产生及理化性质 | 第20-21页 |
2.2 微囊藻毒素的迁移转化 | 第21-22页 |
2.3 微囊藻毒素的污染现状 | 第22-24页 |
2.3.1 我国天然及水库水体的微囊藻毒素污染 | 第22-23页 |
2.3.2 饮用水的微囊藻毒素污染 | 第23页 |
2.3.3 水产品中的微囊藻毒素累积及健康风险 | 第23-24页 |
3 微囊藻毒素的分子致毒机理 | 第24-27页 |
3.1 蛋白磷酸酶抑制途径 | 第24-25页 |
3.2 活性氧途径 | 第25-26页 |
3.3 其他途径 | 第26-27页 |
4 微囊藻毒素对水生生物的生态毒理学研究进展 | 第27-30页 |
4.1 微囊藻毒素的毒性特点及典型毒理学效应 | 第27页 |
4.2 微囊藻毒素对水生植物的生态毒理学研究进展 | 第27-28页 |
4.3 微囊藻毒素对鱼类的生态毒理学研究进展 | 第28-30页 |
5 水生生态毒理学中分子生物标志物研究及其进展 | 第30-41页 |
5.1 生态毒理学研究进展 | 第30-32页 |
5.2 生物标志物定义、分类及功能 | 第32-33页 |
5.3 水环境毒理学中常见生物标志物及其研究进展 | 第33-38页 |
5.3.1 活性氧及抗氧化防御系统指标的研究 | 第33-37页 |
5.3.2 应激蛋白HSP70的研究 | 第37-38页 |
5.3.3 细胞色素P450的研究 | 第38页 |
5.4 应用蛋白质组学研究敏感生物标志物 | 第38-41页 |
6 研究思路 | 第41-45页 |
6.1 选题依据 | 第41-42页 |
6.2 研究目的及其意义 | 第42-43页 |
6.3 研究内容与技术路线 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
第二章 MC-LR在苦草叶部的累积及其对苦草的生态毒理效应 | 第51-75页 |
1 引言 | 第51-52页 |
2 材料和方法 | 第52-56页 |
2.1 主要试剂 | 第52页 |
2.2 实验苦草及暴露处理 | 第52页 |
2.3 MC-LR的提取和测定 | 第52-53页 |
2.3.1 水中MC-LR的提取和测定 | 第53页 |
2.3.2 苦草叶片中MC-LR提取和测定 | 第53页 |
2.4 苦草超氧阴离子和过氧化氢自由基测定 | 第53-54页 |
2.5 苦草叶片抗氧化系统指标测定 | 第54页 |
2.6 苦草叶片谷胱甘肽含量测定 | 第54-55页 |
2.7 苦草叶片脂质过氧化水平测定 | 第55页 |
2.8 苦草叶片叶绿素含量测定 | 第55页 |
2.9 扫描电镜和投射电镜观察 | 第55-56页 |
2.10 数据分析 | 第56页 |
3 结果 | 第56-67页 |
3.1 暴露期水中MC-LR浓度的监测 | 第56-57页 |
3.2 苦草对MC-LR的吸收和累积 | 第57-58页 |
3.3 MC-LR暴露对苦草叶片自由基水平的影响 | 第58-59页 |
3.3.1 MC-LR暴露对苦草叶片O_2~(·-)水平的影响 | 第58-59页 |
3.3.2 MC-LR暴露对苦草叶片H_2O_2水平的影响 | 第59页 |
3.4 MC-LR暴露对苦草叶片抗氧化系统酶活性的影响 | 第59-60页 |
3.5 MC-LR暴露对苦草叶片谷胱甘肽含量的影响 | 第60-62页 |
3.7 MC-LR暴露对苦草叶片MDA含量的影响 | 第62页 |
3.8 MC-LR暴露对苦草叶片可溶性蛋白和叶绿素含量的影响 | 第62-63页 |
3.9 MC-LR暴露对苦草叶片超显微结构的影响 | 第63-67页 |
4 讨论 | 第67-71页 |
本章小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-75页 |
第三章 MC-LR对鲤鱼的生态毒理效应研究 | 第75-131页 |
引言 | 第75-77页 |
第一节 亚致死剂量MC-LR对鲤鱼的生态毒理效应研究 | 第77-98页 |
1 材料与方法 | 第77-82页 |
1.1 仪器与试剂 | 第77页 |
1.2 实验鲤鱼及暴露处理 | 第77页 |
1.3 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定 | 第77-78页 |
1.4 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定 | 第78页 |
1.5 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定 | 第78页 |
1.6 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定 | 第78-79页 |
1.7 鲤鱼肝脏显微结构观察 | 第79页 |
1.8 肝脏组织HSP70蛋白免疫组织化学观察 | 第79页 |
1.9 肝脏组织切片免疫共聚焦显微镜观察 | 第79页 |
1.10 实时荧光定量PCR | 第79-81页 |
1.11 流式细胞仪检测 | 第81页 |
1.12 数据分析 | 第81-82页 |
2 结果 | 第82-93页 |
2.1 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响 | 第82-83页 |
2.2 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏关键酶活性的影响 | 第83-84页 |
2.3 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏谷胱甘肽系统的影响 | 第84-85页 |
2.4 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏MDA含量的影响 | 第85-86页 |
2.5 致死剂量MC-LR暴露下鲤鱼肝脏组织病理学观察 | 第86-88页 |
2.6 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏HSP70蛋白表达水平的影响 | 第88-89页 |
2.7 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏细胞骨架的影响 | 第89-91页 |
2.8 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏mRNA表达的影响 | 第91-92页 |
2.9 致死剂量MC-LR暴露对鲤鱼肝脏细胞凋亡的影响 | 第92-93页 |
3 讨论 | 第93-97页 |
4 结论 | 第97-98页 |
第二节 环境浓度MC-LR动态暴露对鲤鱼的氧化应激研究 | 第98-106页 |
1 材料与方法 | 第98-99页 |
1.1 仪器与试剂 | 第98页 |
1.2 实验鲤鱼及暴露处理 | 第98页 |
1.3 水中MC-LR的提取和测定 | 第98页 |
1.4 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定 | 第98页 |
1.5 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定 | 第98页 |
1.6 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定 | 第98页 |
1.7 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定 | 第98页 |
1.8 数据分析 | 第98-99页 |
2 结果 | 第99-103页 |
2.1 暴露期水中MC-LR浓度的监测 | 第99页 |
2.2 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响 | 第99-100页 |
2.3 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏CAT GST活性的影响 | 第100-101页 |
2.4 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏谷胱甘肽的影响 | 第101-102页 |
2.5 MC-LR动态暴露对鲤鱼肝脏MDA含量的影响 | 第102-103页 |
3 讨论 | 第103-105页 |
4 结论 | 第105-106页 |
第三节 环境浓度MC-LR静态暴露对鲤鱼的生态毒理效应研究 | 第106-125页 |
1. 材料与方法 | 第106-109页 |
1.1 仪器与试剂 | 第106页 |
1.2 实验鲤鱼及暴露处理 | 第106页 |
1.3 MC-LR的提取和测定 | 第106-107页 |
1.4 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定 | 第107页 |
1.5 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定 | 第107页 |
1.6 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定 | 第107页 |
1.7 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定 | 第107页 |
1.8 鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性测定 | 第107页 |
1.9 鲤鱼肝脏HSP70和β-tubulin蛋白免疫组织化学观察 | 第107-108页 |
1.10 鲤鱼肝脏显微结构光镜观察 | 第108页 |
1.11 扫描电镜和投射电镜观察 | 第108页 |
1.12 流式细胞仪检测 | 第108页 |
1.13 数据分析 | 第108-109页 |
2 结果 | 第109-121页 |
2.1 暴露期水中MC-LR浓度的监测 | 第109页 |
2.2 MC-LR在鲤鱼不同器官/组织中的累积 | 第109-111页 |
2.3 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响 | 第111-112页 |
2.4 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏抗氧化系统指标的影响 | 第112-113页 |
2.5 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏MDA含量的影响 | 第113页 |
2.6 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性的影响 | 第113页 |
2.7 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏HSP70蛋白表达的影响 | 第113-115页 |
2.8 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏β-tubulin蛋白表达的影响 | 第115-118页 |
2.9 MC-LR静态暴露下鲤鱼肝脏组织病理学观察 | 第118-119页 |
2.10 MC-LR静态暴露下鲤鱼鳃组织病理学观察 | 第119-120页 |
2.11 MC-LR静态暴露对鲤鱼肝脏细胞凋亡的影响 | 第120-121页 |
3 讨论 | 第121-124页 |
4 结论 | 第124-125页 |
本章小结 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-131页 |
第四章 太湖蓝藻水华对鲤鱼生态毒理效应的原位研究及其早期预警初探 | 第131-173页 |
引言 | 第131-134页 |
第一节 太湖蓝藻水华对鲤鱼氧化应激的原位研究及其用作分子标志物的潜力 | 第134-149页 |
1 材料与方法 | 第134-136页 |
1.1 仪器与试剂 | 第134页 |
1.2 实验鲤鱼及原位实验 | 第134-135页 |
1.3 水体监测指标 | 第135-136页 |
1.4 鱼体组织中MC-LR的提取和测定 | 第136页 |
1.5 肝脏羟自由基含量测定 | 第136页 |
1.6 肝脏抗氧化系统指标测定 | 第136页 |
1.7 肝脏谷胱甘肽含量测定 | 第136页 |
1.8 肝脏脂质过氧化水平测定 | 第136页 |
1.9 数据分析 | 第136页 |
2 结果 | 第136-144页 |
2.1 原位实验水环境状况 | 第136-137页 |
2.2 MC在鱼体不同器官/组织中的累积 | 第137-138页 |
2.3 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼肝脏活性氧水平的影响 | 第138-139页 |
2.4 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼肝脏抗氧化酶活性的影响 | 第139-140页 |
2.5 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼谷胱甘肽系统的影响 | 第140-143页 |
2.6 原位蓝藻水华暴露对鲤鱼肝脏脂质过氧化和蛋白过氧化的影响 | 第143-144页 |
3 讨论 | 第144-148页 |
4 结论 | 第148-149页 |
第二节 原位蓝藻水华衍生污染物对鲤鱼肝脏毒性效应的比较蛋白组学分析 | 第149-168页 |
1 材料与方法 | 第149-156页 |
1.1 蛋白质组学相关试剂 | 第149页 |
1.2 实验点设置、受试生物及实验处理 | 第149页 |
1.3 蛋白提取及定量 | 第149-150页 |
1.4 荧光差异双向电泳(2D-DIGE)方法 | 第150-155页 |
1.5 质谱技术 | 第155-156页 |
1.6 Western Blotting分析 | 第156页 |
1.7 实时荧光定量PCR | 第156页 |
2 结果 | 第156-162页 |
2.1 DIGE蛋白表达谱差异分析 | 第156-159页 |
2.2 差异蛋白的生物学功能 | 第159-160页 |
2.3 实时荧光定量PCR验证DIGE定量结果 | 第160-161页 |
2.4 Western blotting验证DIGE定量结果 | 第161-162页 |
3 讨论 | 第162-167页 |
4 结论 | 第167-168页 |
本章小结 | 第168-170页 |
参考文献 | 第170-173页 |
第五章 微囊藻毒素和阿特拉津复合污染对鲤鱼的生态毒理效应初探 | 第173-187页 |
1 引言 | 第173-174页 |
2 材料和方法 | 第174-176页 |
2.1 仪器与试剂 | 第174页 |
2.2 实验鲤鱼及暴露处理 | 第174-175页 |
2.3 水中MC-LR和阿特拉津的提取和测定 | 第175页 |
2.4 鲤鱼肝脏羟自由基含量测定 | 第175页 |
2.5 鲤鱼肝脏抗氧化系统指标测定 | 第175-176页 |
2.6 鲤鱼肝脏谷胱甘肽含量测定 | 第176页 |
2.7 鲤鱼肝脏脂质过氧化水平测定 | 第176页 |
2.8 鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性测定 | 第176页 |
2.9 鲤鱼肝脏显微结构光镜观察 | 第176页 |
2.10 扫描电镜观察 | 第176页 |
2.11 流式细胞仪检测 | 第176页 |
2.12 数据分析 | 第176页 |
3 结果 | 第176-182页 |
3.1 暴露期水中MC-LR和阿特拉津浓度的监测 | 第176页 |
3.2 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏羟自由基的影响 | 第176-177页 |
3.3 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏抗氧化系统的影响 | 第177-178页 |
3.4 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏脂质过氧化的影响 | 第178页 |
3.5 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏蛋白磷酸酶活性的影响 | 第178页 |
3.6 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏和鳃组织病理学的影响 | 第178-181页 |
3.7 MC-LR和阿特拉津对鲤鱼肝脏细胞凋亡的影响 | 第181-182页 |
4 讨论 | 第182-185页 |
本章小结 | 第185-186页 |
参考文献 | 第186-187页 |
第六章 结论与展望 | 第187-192页 |
附录 | 第192-210页 |
附录1 LC-ESI-MS定性检测苦草叶片中MC-LR | 第192-194页 |
附录2 变形梯度凝胶电泳检测实验检测部分样品结果 | 第194-195页 |
附录3 梅梁湾水域原位暴露相关信息 | 第195-196页 |
附录4 LC-ESI-MS定性检测原位实验SI点位經鱼肌肉中MC | 第196-198页 |
附录5 部分重要试剂配制方法 | 第198-202页 |
附录6 复合污染实验期间水体MC-LR和阿特拉津的浓度数据 | 第202-203页 |
附录7 原位蓝藻水华暴露14 d鲤鱼肝脏差异表达蛋白鉴定列表(共57个蛋白) | 第203-209页 |
附录8 受试生物中MDA含量与内源性ROS强度的相关关系 | 第209-210页 |
博士在读期间的科研成果 | 第210-212页 |
致谢 | 第212-213页 |