| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中文文摘 | 第6-10页 |
| 绪论 | 第10-20页 |
| 一. 乳腺癌概述 | 第10页 |
| 二. 表观遗传学简介 | 第10-14页 |
| 2.1 DNA甲基化 | 第11-12页 |
| 2.2 组蛋白共价修饰 | 第12-13页 |
| 2.3 染色质重塑 | 第13页 |
| 2.4 RNA编辑 | 第13-14页 |
| 三. DAPK及其相关研究 | 第14-17页 |
| 3.1 DAPK的简介及生物学功能 | 第14页 |
| 3.2 癌症中DAPK的甲基化情况 | 第14-17页 |
| 四. 课题研究思路和意义 | 第17-20页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第20-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 1.1.1 病人样本 | 第20页 |
| 1.1.2 菌株、载体与细胞 | 第20页 |
| 1.1.3 实验主要仪器与耗材 | 第20-21页 |
| 1.1.4 实验试剂 | 第21-22页 |
| 1.1.5 试剂配制 | 第22-23页 |
| 1.1.6 引物 | 第23页 |
| 1.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 1.2.1 感受态细胞的制备 | 第23-25页 |
| 1.2.2 基因组DNA的提取 | 第25页 |
| 1.2.3 PCR扩增目的基因 | 第25-26页 |
| 1.2.4 酶切反应 | 第26-27页 |
| 1.2.5 琼脂糖凝胶电泳及纯化回收 | 第27-28页 |
| 1.2.6 连接反应及转化 | 第28页 |
| 1.2.7 重组子的鉴定 | 第28页 |
| 1.2.8 组织中总RNA的提取 | 第28-30页 |
| 1.2.9 RT-PCR及Real-time PCR反应 | 第30页 |
| 1.2.10 基因组DNA的甲基化修饰及检测 | 第30-32页 |
| 1.2.11 细胞培养及相关实验 | 第32-36页 |
| 第二章 实验结果 | 第36-50页 |
| 2.1 乳腺细胞系和样本中检测DAPK mRNA的表达 | 第36-38页 |
| 2.2 DAPK的mRNA表达与病理数据的相关性分析 | 第38-40页 |
| 2.3 乳腺细胞系和样本中检测DAPK启动子的甲基化 | 第40-44页 |
| 2.4 DAPK启动子调控EGFP表达的报告体系建立 | 第44-50页 |
| 第三章 分析与讨论 | 第50-56页 |
| 3.1 DAPK mRNA表达的检测及病理数据分析 | 第50-53页 |
| 3.2 DAPK启动子甲基化表达的分析 | 第53-54页 |
| 3.3 表达载体pDp-EGFP及其稳定细胞系的构建 | 第54-56页 |
| 第四章 实验结论 | 第56-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 索引 | 第70-72页 |
| 个人简历 | 第72-74页 |
