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环糊精延缓动脉粥样硬化形成的作用及其机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第1章 前言第12-25页
    1.1 动脉粥样硬化第12-17页
        1.1.1 动脉粥样硬化的病发进程第12-13页
        1.1.2 动脉粥样硬化的发病机理第13-16页
            1.1.2.1 氧化应激学说第14-15页
            1.1.2.2 炎症反应学说第15-16页
        1.1.3 动脉粥样硬化的预防与治疗第16-17页
    1.2 环糊精第17-21页
        1.2.1 环糊精的结构与性质第17-19页
        1.2.2 环糊精的医药应用第19-21页
            1.2.2.1 增加药物溶解性第19页
            1.2.2.2 提高药物稳定性第19-20页
            1.2.2.3 促进药物的生物利用度第20页
            1.2.2.4 帮助药物透皮吸收第20页
            1.2.2.5 定位给药第20-21页
    1.3 环糊精延缓动脉粥样硬化的可能性第21-23页
        1.3.1 环糊精低毒,用作药物辅料,安全高效第21-22页
        1.3.2 HPβCD是治疗尼曼匹克C型疾病的新药研发热点第22页
        1.3.3 本课题实施后期,Sebastian Zimmer等人报道环糊精促能进AS好转第22-23页
    1.4 本课题的研究内容与意义第23-25页
第2章 动物实验:揭示环糊精延缓AS病发进程的效用第25-45页
    2.1 实验动物与分组第25-26页
        2.1.1 实验动物第25-26页
        2.1.2 实验动物分组第26页
        2.1.3 动物伦理第26页
    2.2 实验材料第26-30页
        2.2.1 实验药物与试剂第26-28页
        2.2.2 实验仪器第28页
        2.2.3 常用实验试剂的配制第28-30页
    2.3 实验方法第30-36页
        2.3.1 复制动脉粥样硬化模型第30页
        2.3.2 给药方法第30页
        2.3.3 制备小鼠血清第30-31页
        2.3.4 动脉的剥离与固定第31-32页
        2.3.5 血清电泳观察脂蛋白氧化情况第32页
        2.3.6 全自动生化仪检测各项血脂指标含量第32-33页
        2.3.7 苏丹Ⅳ染色观察血管动脉粥样硬化斑块第33页
        2.3.8 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清组织中ox-LDL与ox-HDL水平第33-35页
        2.3.9 HE染色大致步骤第35页
        2.3.10 统计学方法第35-36页
    2.4 实验结果第36-43页
        2.4.1 血清电泳观察脂蛋白氧化情况第36-38页
        2.4.2 全自动生化仪检测各项血脂指标含量第38-40页
        2.4.3 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HDL与LDL的氧化程度第40-41页
        2.4.4 苏丹Ⅳ染色观察血管动脉粥样硬化斑块第41-43页
    2.5 实验结论第43-45页
第3章 体外氧化实验:探讨环糊精延缓AS的机制 1-2第45-81页
    3.1 环糊精延缓AS的机制1:环糊精抑制LDL氧化第45-68页
        3.1.1 实验材料第45-49页
            3.1.1.1 实验药物与试剂第45-47页
            3.1.1.2 主要实验仪器第47页
            3.1.1.3 主要实验试剂的配制第47-49页
        3.1.2 实验方法第49-54页
            3.1.2.1 脂蛋白体外氧化实验第49-50页
            3.1.2.2 BCA法测蛋白浓度第50页
            3.1.2.3 琼脂糖凝胶电泳第50-51页
            3.1.2.4 通过检测OD234nm值观测脂质成份前期氧化情况第51页
            3.1.2.5 TBA实验检测脂质氧化产物MDA的含量第51-52页
            3.1.2.6 TNBSA实验检测蛋白质氧化程度第52页
            3.1.2.7 超滤离心管分离脂蛋白与被剔除成份第52页
            3.1.2.8 磷脂含量比例测定第52页
            3.1.2.9 酶标仪测定胆固醇浓度第52-53页
            3.1.2.10 干燥器修饰云母基底第53页
            3.1.2.11 修饰原子力显微镜(AFM)实验的脂蛋白第53-54页
            3.1.2.12 统计学方法第54页
        3.1.3 实验结果第54-68页
            3.1.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测环糊精对LDL成份的影响第55-57页
            3.1.3.2 MβCD剔除LDL脂质的百分比第57-58页
            3.1.3.3 AFM检测MβCD对低密度脂蛋白形貌的影响作用第58-59页
            3.1.3.4 琼脂糖凝胶电泳检测环糊精对Cu~(2+)诱导的LDL氧化的影响第59-61页
            3.1.3.5 环糊精对Cu~(2+)氧化LDL过程中共轭双烯产物的影响第61-64页
            3.1.3.6 TBA实验检测环糊精对Cu2+氧化LDL的丙二醛产物量的影响第64-65页
            3.1.3.7 TNBSA实验检测环糊精对Cu~(2+)氧化LDL中氨基酸的影响第65-67页
            3.1.3.8 MβCD对Cu~(2+)氧化磷脂(PC)单体的影响第67-68页
        3.1.4 实验结论第68页
    3.2 环糊精延缓AS的机制 2:环糊精抑制HDL氧化第68-81页
        3.2.1 实验材料第68-69页
            3.2.1.1 实验药物与试剂第68页
            3.2.1.2 主要实验仪器第68页
            3.2.1.3 主要实验试剂的配制第68-69页
        3.2.2 实验方法第69页
        3.2.3 实验结果第69-80页
            3.2.3.1 环糊精剔除HDL脂质的百分比第69-71页
            3.2.3.2 琼脂糖凝胶电泳检测环糊精对HDL成份的影响第71-72页
            3.2.3.3 琼脂糖凝胶电泳检测环糊精对Cu~(2+)诱导的HDL氧化的影响第72-76页
            3.2.3.4 环糊精对Cu~(2+)氧化HDL过程中共轭双烯产物的影响第76-77页
            3.2.3.5 TBA检测环糊精对Cu~(2+)氧化HDL的丙二醛产物量的影响第77-79页
            3.2.3.6 TNBSA实验检测环糊精对Cu~(2+)氧化HDL中氨基酸的影响第79-80页
        3.2.4 实验结论第80-81页
第4章 体外细胞与分子实验:探讨环糊精延缓AS的机制 3第81-102页
    4.1 环糊精延缓AS机制 3:环糊精抑制单核细胞与内皮细胞的黏附第81-102页
        4.1.1 实验材料第81-83页
            4.1.1.1 实验药物与试剂第81-82页
            4.1.1.2 主要实验仪器第82页
            4.1.1.3 主要实验试剂的配制第82-83页
        4.1.2 实验方法第83-89页
            4.1.2.1 细胞培养第83-84页
            4.1.2.2 MTT实验第84页
            4.1.2.3 单核细胞黏附实验第84-85页
            4.1.2.4 原子力显微镜(AFM)检测黏附力第85-86页
            4.1.2.5 激光激光共聚焦显微镜的样品制备第86-87页
            4.1.2.6 流式细胞仪的样品制备第87-88页
            4.1.2.7 细胞骨架的成像与定量方法第88-89页
            4.1.2.8 细胞凋亡染色方法第89页
            4.1.2.9 统计学方法第89页
        4.1.3 实验结果第89-100页
            4.1.3.1 MTT实验检测MβCD对内皮细胞活性的影响第90-91页
            4.1.3.2 MβCD影响单核细胞对血管内皮细胞的黏附第91-93页
            4.1.3.3 AFM检测MβCD对HUVEC黏附力的影响第93-94页
            4.1.3.4 流式细胞仪检测MβCD对内皮细胞黏附分子的影响第94-96页
            4.1.3.5 流式细胞仪检测MβCD对内皮细胞Caveolin-1 分子的影响第96-97页
            4.1.3.6 激光激光共聚焦显微镜检测MβCD对Caveolin-1 分子的影响第97-98页
            4.1.3.7 流式细胞仪检测MβCD对内皮细胞PIP2分子的影响第98-99页
            4.1.3.8 激光激光共聚焦显微镜检测MβCD对内皮细胞PIP2分子的影响第99-100页
            4.1.3.9 MβCD对HUVEC细胞骨架的影响第100页
        4.1.4 实验结论第100-102页
第五部分 讨论与展望第102-105页
    5.1 环糊精作用于动脉粥硬化的研究价值第102页
    5.2 环糊精延缓AS的作用效果第102-103页
    5.3 环糊精延缓AS的可能作用机制第103页
    5.4 展望第103-105页
参考文献第105-113页
附录 英文缩略语第113-114页
博士学位攻读期间课题与论文情况第114-116页
    一、课题研究第114-115页
    二、论文发表第115-116页
致谢第116页

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