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黄瓜“mango”突变体分析与基因功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-20页
    1.1 研究背景第12-14页
        1.1.1 黄瓜的生物学特性第12页
        1.1.2 黄瓜突变体研究进展第12-14页
            1.1.2.1 黄瓜突变体的获得第12-13页
            1.1.2.2 黄瓜突变体的主要类型第13-14页
    1.2 “mango”突变体候选基因的图位克隆第14-15页
        1.2.1 “mango”突变体的来源及表型特征第14-15页
        1.2.2 “mango”突变体基因的图位克隆第15页
    1.3 WOX转录因子家族研究进展第15-19页
        1.3.1 WOX转录因子结构特点第15-16页
        1.3.2 WOX转录因子研究进展第16-19页
    1.4 本研究的目的意义和主要内容第19-20页
        1.4.1 本研究的目的和意义第19页
        1.4.2 本研究的主要内容第19-20页
第二章 黄瓜CsWOX1基因的克隆及功能分析第20-42页
    2.1 材料与方法第20-25页
        2.1.1 试验材料第20-21页
            2.1.1.1 植物材料第20页
            2.1.1.2 质粒和菌株第20页
            2.1.1.3 主要试剂与仪器第20页
            2.1.1.4 引物第20-21页
        2.1.2 试验方法第21-25页
            2.1.2.1 黄瓜AM218野生型与突变体植株表型观察与分析第21-22页
            2.1.2.2 CsWOX1基因相关生物信息学分析第22-23页
            2.1.2.3 CsWOX1、Cswox1基因在不同组织的表达分析第23页
            2.1.2.4 CsWOX1、Cswox1原核表达分析第23-25页
            2.1.2.5 CsWOX1、Cswox1目标蛋白的亚细胞定位分析第25页
    2.2 数据处理第25页
    2.3 结果与分析第25-40页
        2.3.1 野生型与突变体材组织观察分析第25-31页
            2.3.1.1 突变体与野生型植物学特性观察与分析第26-28页
            2.3.1.2 突变体与野生型叶片组织结构观察与分析第28-29页
            2.3.1.3 雌、雄花芽不同发育时期的石蜡切片观察第29-31页
        2.3.2 CsWOX1基因相关生物信息学分析第31-36页
            2.3.2.1 CsWOX1与拟南芥WOX蛋白家族序列比对第31-33页
            2.3.2.2 黄瓜CsWOX1基因突变位点分析第33页
            2.3.2.3 CsWOX1蛋白理化性质及氨基酸序列分析第33-34页
            2.3.2.4 CsWOX1、Cswox1亚细胞定位分析及蛋白质功能分类第34-36页
        2.3.3 CsWOX1、Cswox1基因在野生型及突变体植株的表达分析第36-37页
        2.3.4 CsWOX1、Cswox1基因编码蛋白的原核表达分析第37-38页
            2.3.4.1 重组质粒的酶切鉴定第37页
            2.3.4.2 CsWOX1、Cswox1原核表达及分析第37-38页
        2.3.5 CsWOX1、Cswox1目标蛋白的亚细胞定位分析第38-40页
            2.3.5.1 P_(35S):: CsWOX1-GFP、P_(35S):: Cswox1-GFP重组载体的鉴定第38-39页
            2.3.5.2 报告基因GFP在洋葱表皮细胞中的分布第39-40页
    2.4 讨论第40-42页
第三章 黄瓜转录因子CsWOX1在拟南芥发育中的功能研究第42-50页
    3.1 材料与方法第42-44页
        3.1.1 材料第42-43页
            3.1.1.1 植物材料第42页
            3.1.1.2 质粒和菌株第42页
            3.1.1.3 试验相关引物第42-43页
        3.1.2 试验方法第43-44页
            3.1.2.1 黄瓜CsWOX1、Cswox1基因CDS序列克隆第43页
            3.1.2.2 P_(35s):: CsWOX1-GUS、P_(35s):: Cswox1-GUS融合载体的构建第43页
            3.1.2.3 黄瓜CsWOX1、Cswox1基因在拟南芥中的过表达第43页
            3.1.2.4 转基因拟南芥植株表型观察与分析第43-44页
    3.2 结果与分析第44-48页
        3.2.1 转基因拟南芥表型观察与分析第44-48页
            3.2.1.1 转基因拟南芥植株表型观察第44-46页
            3.2.1.2 M31、W44 转基因拟南芥花粉畸形率测定第46-47页
            3.2.1.3 转基因拟南芥平均果荚长度及种子量统计分析第47-48页
    3.3 讨论第48-50页
第四章 黄瓜野生型及突变体转录组测序分析第50-59页
    4.1 材料与方法第50-52页
        4.1.1 材料第50页
        4.1.2 试验方法第50页
            4.1.2.1 RNA-Seq测序及分析第50页
            4.1.2.2 子房发育相关基因表达分析第50页
        4.1.3 试验相关引物第50-52页
    4.2 结果与分析第52-58页
        4.2.1 测序结果第52-57页
            4.2.1.1 RNA测序质量评估第52页
            4.2.1.2 转录组数据结果简况第52-53页
            4.2.1.3 RNA-seq差异基因的qPCR验证第53-54页
            4.2.1.4 差异基因的GO富集分析第54-55页
            4.2.1.5 差异基因的KEGG分析第55-56页
            4.2.1.6 差异基因中转录因子家族分析第56-57页
        4.2.2 野生型与突变体子房发育WUS相关基因表达分析第57-58页
    4.3 讨论第58-59页
结论第59-60页
参考文献第60-64页
附录第64-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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