摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 研究背景 | 第12-14页 |
1.1.1 黄瓜的生物学特性 | 第12页 |
1.1.2 黄瓜突变体研究进展 | 第12-14页 |
1.1.2.1 黄瓜突变体的获得 | 第12-13页 |
1.1.2.2 黄瓜突变体的主要类型 | 第13-14页 |
1.2 “mango”突变体候选基因的图位克隆 | 第14-15页 |
1.2.1 “mango”突变体的来源及表型特征 | 第14-15页 |
1.2.2 “mango”突变体基因的图位克隆 | 第15页 |
1.3 WOX转录因子家族研究进展 | 第15-19页 |
1.3.1 WOX转录因子结构特点 | 第15-16页 |
1.3.2 WOX转录因子研究进展 | 第16-19页 |
1.4 本研究的目的意义和主要内容 | 第19-20页 |
1.4.1 本研究的目的和意义 | 第19页 |
1.4.2 本研究的主要内容 | 第19-20页 |
第二章 黄瓜CsWOX1基因的克隆及功能分析 | 第20-42页 |
2.1 材料与方法 | 第20-25页 |
2.1.1 试验材料 | 第20-21页 |
2.1.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.1.2 质粒和菌株 | 第20页 |
2.1.1.3 主要试剂与仪器 | 第20页 |
2.1.1.4 引物 | 第20-21页 |
2.1.2 试验方法 | 第21-25页 |
2.1.2.1 黄瓜AM218野生型与突变体植株表型观察与分析 | 第21-22页 |
2.1.2.2 CsWOX1基因相关生物信息学分析 | 第22-23页 |
2.1.2.3 CsWOX1、Cswox1基因在不同组织的表达分析 | 第23页 |
2.1.2.4 CsWOX1、Cswox1原核表达分析 | 第23-25页 |
2.1.2.5 CsWOX1、Cswox1目标蛋白的亚细胞定位分析 | 第25页 |
2.2 数据处理 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-40页 |
2.3.1 野生型与突变体材组织观察分析 | 第25-31页 |
2.3.1.1 突变体与野生型植物学特性观察与分析 | 第26-28页 |
2.3.1.2 突变体与野生型叶片组织结构观察与分析 | 第28-29页 |
2.3.1.3 雌、雄花芽不同发育时期的石蜡切片观察 | 第29-31页 |
2.3.2 CsWOX1基因相关生物信息学分析 | 第31-36页 |
2.3.2.1 CsWOX1与拟南芥WOX蛋白家族序列比对 | 第31-33页 |
2.3.2.2 黄瓜CsWOX1基因突变位点分析 | 第33页 |
2.3.2.3 CsWOX1蛋白理化性质及氨基酸序列分析 | 第33-34页 |
2.3.2.4 CsWOX1、Cswox1亚细胞定位分析及蛋白质功能分类 | 第34-36页 |
2.3.3 CsWOX1、Cswox1基因在野生型及突变体植株的表达分析 | 第36-37页 |
2.3.4 CsWOX1、Cswox1基因编码蛋白的原核表达分析 | 第37-38页 |
2.3.4.1 重组质粒的酶切鉴定 | 第37页 |
2.3.4.2 CsWOX1、Cswox1原核表达及分析 | 第37-38页 |
2.3.5 CsWOX1、Cswox1目标蛋白的亚细胞定位分析 | 第38-40页 |
2.3.5.1 P_(35S):: CsWOX1-GFP、P_(35S):: Cswox1-GFP重组载体的鉴定 | 第38-39页 |
2.3.5.2 报告基因GFP在洋葱表皮细胞中的分布 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-42页 |
第三章 黄瓜转录因子CsWOX1在拟南芥发育中的功能研究 | 第42-50页 |
3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
3.1.1 材料 | 第42-43页 |
3.1.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.1.1.2 质粒和菌株 | 第42页 |
3.1.1.3 试验相关引物 | 第42-43页 |
3.1.2 试验方法 | 第43-44页 |
3.1.2.1 黄瓜CsWOX1、Cswox1基因CDS序列克隆 | 第43页 |
3.1.2.2 P_(35s):: CsWOX1-GUS、P_(35s):: Cswox1-GUS融合载体的构建 | 第43页 |
3.1.2.3 黄瓜CsWOX1、Cswox1基因在拟南芥中的过表达 | 第43页 |
3.1.2.4 转基因拟南芥植株表型观察与分析 | 第43-44页 |
3.2 结果与分析 | 第44-48页 |
3.2.1 转基因拟南芥表型观察与分析 | 第44-48页 |
3.2.1.1 转基因拟南芥植株表型观察 | 第44-46页 |
3.2.1.2 M31、W44 转基因拟南芥花粉畸形率测定 | 第46-47页 |
3.2.1.3 转基因拟南芥平均果荚长度及种子量统计分析 | 第47-48页 |
3.3 讨论 | 第48-50页 |
第四章 黄瓜野生型及突变体转录组测序分析 | 第50-59页 |
4.1 材料与方法 | 第50-52页 |
4.1.1 材料 | 第50页 |
4.1.2 试验方法 | 第50页 |
4.1.2.1 RNA-Seq测序及分析 | 第50页 |
4.1.2.2 子房发育相关基因表达分析 | 第50页 |
4.1.3 试验相关引物 | 第50-52页 |
4.2 结果与分析 | 第52-58页 |
4.2.1 测序结果 | 第52-57页 |
4.2.1.1 RNA测序质量评估 | 第52页 |
4.2.1.2 转录组数据结果简况 | 第52-53页 |
4.2.1.3 RNA-seq差异基因的qPCR验证 | 第53-54页 |
4.2.1.4 差异基因的GO富集分析 | 第54-55页 |
4.2.1.5 差异基因的KEGG分析 | 第55-56页 |
4.2.1.6 差异基因中转录因子家族分析 | 第56-57页 |
4.2.2 野生型与突变体子房发育WUS相关基因表达分析 | 第57-58页 |
4.3 讨论 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录 | 第64-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |