| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-30页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| 1 鸡传染性支气管炎 | 第14-22页 |
| ·IBV病原学 | 第14-20页 |
| ·IBV流行病学研究进展p | 第20-22页 |
| 2 B细胞抗原表位的研究 | 第22-28页 |
| ·B细胞抗原表位预测研究方法 | 第23-27页 |
| ·蛋白质结构预测技术p | 第23页 |
| ·肽探针扫描技术(Pepscan技术) | 第23-24页 |
| ·生物酶解法或化学“切割”法 | 第24页 |
| ·利用抗原抗体反应方法筛选表位 | 第24页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第24-27页 |
| ·IBV B细胞抗原表位研究进展 | 第27-28页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二部分 试验研究 | 第30-90页 |
| 第二章 鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白的原核表达 | 第30-49页 |
| 1 试验材料 | 第30-32页 |
| ·毒株、菌种、血清及载体 | 第30-31页 |
| ·具酶及主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·主要溶液配制 | 第31-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-42页 |
| ·IBV S1基因生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·IBV S1基因的克隆 | 第33-37页 |
| ·pET-32-S1表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·pET-32-S1表达质粒的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白His-S1的纯化 | 第39-41页 |
| ·His-S1蛋白的Western blot | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-47页 |
| ·IBV S1基因生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·表达载体pET-32-S1的构建 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白His-S1的诱导表达 | 第44-46页 |
| ·重组蛋白His-S1纯化 | 第46页 |
| ·His-S1蛋白的Western blot | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 Sczy3 S1蛋白中和性单克隆抗体的制备 | 第49-74页 |
| 1 实验材料 | 第49-52页 |
| ·毒株、细胞及实验动物 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·主要溶液配制 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-61页 |
| ·抗原制备 | 第52页 |
| ·动物免疫 | 第52-53页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第53-54页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第54-57页 |
| ·S1蛋白杂交瘤细胞的筛选 | 第57页 |
| ·单克隆抗体亚型的鉴定 | 第57-58页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第58页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第59-60页 |
| ·S1蛋白中和性单克隆抗体的筛选 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-71页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第61-63页 |
| ·免疫BALB/c鼠血清效价测定 | 第63-64页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第64页 |
| ·S1蛋白杂交瘤细胞株的筛选 | 第64-65页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第65页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第65-66页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第66-68页 |
| ·单克隆抗体中和性检测 | 第68-71页 |
| 4 讨论 | 第71-74页 |
| 第四章 Sczy3 S1蛋白中和性抗原表位的定位 | 第74-90页 |
| 1. 材料 | 第74-76页 |
| ·肽库、菌株和质粒 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74-75页 |
| ·主要仪器设备 | 第75页 |
| ·溶液配制 | 第75-76页 |
| 2. 方法 | 第76-82页 |
| ·肽库的生物筛选 | 第76页 |
| ·噬菌体滴度测定 | 第76-77页 |
| ·噬菌体扩增 | 第77-78页 |
| ·噬菌体ELISA | 第78-79页 |
| ·序列测定 | 第79-80页 |
| ·短肽序列的推导及表位分析 | 第80-81页 |
| ·抗原表位的鉴定 | 第81-82页 |
| 3. 结果 | 第82-87页 |
| ·肽库的生物淘选 | 第82页 |
| ·噬菌体ELISA检测结果 | 第82-83页 |
| ·噬菌体DNA序列测定及表位分析 | 第83-85页 |
| ·抗原表位的鉴定 | 第85-87页 |
| 4. 讨论 | 第87-90页 |
| 第三部分 结论 | 第90-91页 |
| 第四部分 参考文献 | 第91-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第107页 |