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水稻系统获得抗性基因OsSRT2的克隆及功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1. 文献综述第10-18页
   ·植物抗病相关的研究进展第10页
   ·植物免疫系统第10-12页
     ·植物初级免疫反应第10-11页
     ·植物次级免疫反应第11-12页
   ·抗性机制和信号转导第12-14页
     ·R基因的结构第12-13页
     ·信号转导机制第13-14页
   ·植物病程相关蛋白第14页
   ·植物抗病反应中的信号分子第14-15页
     ·水杨酸在抗病反应中作用第14页
     ·乙烯在抗病反应中作用第14-15页
     ·茉莉酸在抗病反应中作用第15页
   ·广谱抗病基因研究现状第15-16页
     ·水稻SAR抗病途径的特殊性第15-16页
     ·抗病反应与核孔运输第16页
   ·生物信息学研究SAR相关基因第16-18页
     ·生物信息学的基本应用第16-17页
     ·PRISM预测SAR途径蛋白的相互作用第17-18页
2. 引言第18-21页
   ·研究价值和理论意义第18-20页
   ·实验技术路线第20-21页
3. 材料和方法第21-37页
   ·实验材料第21页
     ·植物材料第21页
     ·载体和菌类第21页
     ·实验试剂及器材第21页
   ·培养基以及溶液的配置第21-22页
     ·大肠杆菌培养基第21页
     ·农杆菌培养基第21-22页
     ·蛋白相关溶液第22页
     ·白叶枯病培养基第22页
   ·OsSRT2基因的扩增第22-27页
     ·PCR引物设计第22-23页
     ·水稻叶片总RNA提取第23-24页
     ·反转录第24页
     ·OsSRT2基因的PCR扩增第24-25页
     ·干涉片段的扩增第25页
     ·PCR产物切胶回收第25-26页
     ·连入PMD-18T克隆载体和转化扩繁第26页
     ·质粒的提取第26-27页
   ·OsSRT2的生物信息学分析第27页
     ·OsSRT2蛋白组成分析第27页
     ·OsSRT2蛋白结构域分析第27页
     ·OsSRT2蛋白相关同源序列的进化树分析第27页
   ·OsSRT2相关载体的构建第27-32页
     ·过表达载体的构建第27-29页
     ·构建CBP-2i干涉载体第29-31页
     ·p1302-OsSRT2-GFP亚细胞融合表达载体的构建第31-32页
     ·带有C端标签原核表达载体的构建第32页
   ·OsSRT2的亚细胞定位第32-33页
   ·转化EHA105农杆菌第33-34页
     ·制取感受态第33页
     ·转化第33页
     ·菌落PCR鉴定阳性克隆第33-34页
   ·水稻的遗传转化第34页
     ·诱导第34页
     ·侵染第34页
     ·选择第34页
     ·分化第34页
     ·生根第34页
     ·炼苗及移栽田地第34页
   ·水稻转基因植株的鉴定第34-36页
     ·提取水稻基因组(CTAB法)第34-35页
     ·PCR检测潮霉素筛选标记第35页
     ·转基因植株OsSRT2的荧光定量分析第35-36页
   ·OsSRT2的重组蛋白的表达第36页
   ·转基因水稻的抗病性检测第36-37页
     ·水稻活体接种白叶枯病及鉴定第36页
     ·自由态水杨酸的HPLC测定第36-37页
4. 结果与分析第37-44页
   ·OsSRT2的获得第37页
   ·酶切验证构建的载体第37-38页
   ·重组蛋白的表达第38-39页
   ·转基因植株检测第39-40页
   ·OsSRT2的亚细胞定位第40-41页
   ·OsSRT2的表达模式第41-42页
   ·自由态水杨酸的HPLC测定第42-43页
   ·鉴定白叶枯病抗性第43-44页
5. 讨论第44-46页
6. 结论第46-47页
参考文献第47-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页
硕士期间发表的论文情况第56页

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