| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 文献综述 | 第10-23页 |
| 1 卵黄抗体概述 | 第10-12页 |
| ·IgY的结构 | 第10页 |
| ·卵黄抗体的性质及特点 | 第10-11页 |
| ·产量高 | 第10-11页 |
| ·性能稳定 | 第11页 |
| ·治疗效果好,安全性高 | 第11页 |
| ·卵黄抗体的应用 | 第11-12页 |
| ·卵黄抗体在诊断方面的应用 | 第11页 |
| ·卵黄抗体在防治疾病方面的应用 | 第11-12页 |
| 2 卵黄抗体饲料添加剂的研究进展 | 第12-13页 |
| 3 猪流行性腹泻概述 | 第13-20页 |
| ·PEDV的病原学特征 | 第13-14页 |
| ·PED的流行病学特征 | 第14-15页 |
| ·PED临床症状和病理变化 | 第15页 |
| ·PEDV基因组结构 | 第15-16页 |
| ·猪流行性腹泻病毒的基因组成 | 第15页 |
| ·S蛋白的功能特性 | 第15-16页 |
| ·M蛋白的功能特性 | 第16页 |
| ·N蛋白的功能特性 | 第16页 |
| ·猪流行性腹泻的诊断与防治 | 第16-20页 |
| ·猪流行性腹泻的诊断 | 第16-18页 |
| ·猪流行性腹泻的防治 | 第18-20页 |
| 4 不同形式免疫原制备抗PEDV卵黄抗体 | 第20-21页 |
| ·PEDV全病毒免疫原制备卵黄抗体 | 第20页 |
| ·重组蛋白抗原制备卵黄抗体 | 第20-21页 |
| 5 PEDV的中和抗原表位研究 | 第21页 |
| 6 病毒蛋白基因的原核表达与真核表达 | 第21-23页 |
| ·原核表达 | 第21页 |
| ·真核表达系统 | 第21-22页 |
| ·毕赤酵母表达系统的应用 | 第22-23页 |
| 1 引言 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·毒株、菌株、质粒、细胞及实验动物 | 第24页 |
| ·PCR扩增引物设计 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-32页 |
| ·猪流行性腹泻病毒PEDVS_(534)和PEDVS COE基因的克隆及原核表达 | 第26-28页 |
| ·PEDVS_(534)和PEDVS COE基因的扩增 | 第26页 |
| ·PEDVS_(534)和COE基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·PEDVS_(534)和COE基因的表达 | 第27页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·表达蛋白的免疫原性分析 | 第28页 |
| ·PEDV COE基因的毕赤酵母表达 | 第28-29页 |
| ·COE基因毕赤酵母表达载体的构建及转化 | 第28页 |
| ·重组酵母菌株的鉴定 | 第28页 |
| ·重组酵母菌株的诱导表达 | 第28页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白免疫小鼠及血清中和试验的测定 | 第29页 |
| ·卵黄抗体的制备 | 第29-31页 |
| ·免疫原的制备 | 第29-30页 |
| ·免疫程序 | 第30页 |
| ·卵黄抗体的提取 | 第30页 |
| ·卵黄抗体中和效价的测定 | 第30-31页 |
| ·卵黄抗体的临床试验 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-39页 |
| ·PEDVS534和PEDVS COE基因的克隆及原核表达 | 第32-34页 |
| ·PEDVS534和PEDVS COE基因的克隆 | 第32页 |
| ·pMD18-T-PEDVS_(534)和pMD18-T-COE酶切鉴定 | 第32页 |
| ·PEDVS_(534)和COE基因重组表达质粒的PCR及双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·PEDVS_(534)及COE重组蛋白的表达及Western blot | 第33-34页 |
| ·COE基因毕赤酵母表达 | 第34-36页 |
| ·毕赤酵母表达重组质粒的构建 | 第34页 |
| ·pPIC9K-COE重组酵母菌株的筛选与鉴定 | 第34-35页 |
| ·COE重组酵母菌株分泌表达蛋白的SDS-PAGE及Western blot | 第35-36页 |
| ·病毒中和试验 | 第36页 |
| ·卵黄抗体纯化效果 | 第36-37页 |
| ·卵黄抗体的纯化效果 | 第36页 |
| ·卵黄抗体的Western blot | 第36-37页 |
| ·卵黄抗体的效价检测 | 第37-39页 |
| ·卵黄抗体的效价测定 | 第37页 |
| ·卵黄抗体的临床试验 | 第37-39页 |
| ·发病猪病料临床检测 | 第37-38页 |
| ·发病猪场临床试验 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·COE基因的毕赤酵母表达研究 | 第39页 |
| ·不同免疫原制备的卵黄抗体中和效力比较 | 第39-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 在读期间论文发表情况 | 第56页 |
