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水稻条纹病毒NSvc2蛋白在本氏烟中的亚细胞定位研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第10-22页
 1 水稻条纹叶枯病的发生情况第10-12页
   ·水稻条纹叶枯病的分布第10页
   ·水稻条纹叶枯病的症状第10-11页
   ·水稻条纹叶枯病的病害流行第11-12页
 2 RSV的生物学特性第12-16页
   ·RSV的粒子形态第13页
   ·RSV基因组及其编码的蛋白第13-16页
     ·RNA1第13-14页
     ·RNA2第14页
     ·RNA3第14-15页
     ·RNA4第15-16页
 3 布尼亚病毒科膜蛋白的研究现状第16-19页
   ·布尼亚病毒的侵入第16-17页
   ·布尼亚病毒的组装及释放第17-18页
   ·布尼亚病毒糖蛋白GP与Gn、Gc第18-19页
 4 布尼亚病毒与RSV糖蛋白亚细胞定位的研究进展第19页
 5 膜蛋白酵母双杂交技术第19-22页
第二章 水稻条纹病毒NSvc2蛋白在本氏烟中的亚细胞定位研究第22-58页
 摘要第22-23页
 ABSTRACT第23-24页
 1 试验材料与试剂、仪器第24-25页
   ·试验材料第24页
   ·主要试验试剂及来源第24-25页
   ·试验仪器第25页
 2 试验方法第25-42页
   ·感受态制备第25页
     ·大肠杆菌DH5α感受态制备第25页
     ·农杆菌C58C1感受态制备第25页
   ·羧基端融合YFP的载体构建第25-31页
     ·PCR扩增片段第26-28页
     ·产物回收第28-29页
     ·酶切第29页
     ·连接第29页
     ·转化第29-30页
     ·筛选阳性克隆第30页
     ·质粒小提第30-31页
     ·测序第31页
     ·序列分析第31页
   ·农杆菌转化第31页
   ·农杆菌浸润第31页
   ·显微观察第31页
   ·总RNA抽提第31-32页
   ·RT-PCR反应第32-33页
   ·蛋白的抽提及分离第33页
   ·Western bolt第33-34页
   ·膜蛋白酵母双杂交第34-37页
   ·水稻原生质体的制备与转化第37-39页
     ·载体构建第37-38页
     ·水稻原生质体的制备第38页
     ·水稻原生质体的转化第38-39页
   ·RSV病毒粒子提取第39页
   ·多克隆抗体制备第39-42页
     ·原核表达载体的构建第39-40页
     ·大肠杆菌Rosetta感受态细胞的制备第40页
     ·转化第40页
     ·原核表达与纯化第40-41页
     ·SDS-PAGE第41页
     ·蛋白透析第41页
     ·多克隆抗体制备第41-42页
 3 结果与分析第42-54页
   ·NSvc2-N蛋白单独表达时定位于高尔基体第42-45页
   ·NSvc2-C蛋白单独表达时定位于内质网第45-46页
   ·NSvc2-N蛋白将NSvc2-C蛋白从内质网召集到高尔基体第46-47页
   ·NSvc2-N蛋白可与NSvc2-C蛋白互作第47-49页
   ·NSvc2糖蛋白从内质网到高尔基体的运动依赖于有功能的COPⅡ分泌途径第49-51页
   ·NSvc2糖蛋白在高尔基体的积累依赖有活性的COP Ⅰ途径第51-53页
   ·RSV NSvc2蛋白在水稻原生质体中的亚细胞定位研究第53-54页
 4 讨论第54-58页
本论文结论及创新点第58-60页
参考文献第60-68页
附录第68-72页
攻读硕士学位期间发表的论文第72-74页
致谢第74页

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