摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-22页 |
1 水稻条纹叶枯病的发生情况 | 第10-12页 |
·水稻条纹叶枯病的分布 | 第10页 |
·水稻条纹叶枯病的症状 | 第10-11页 |
·水稻条纹叶枯病的病害流行 | 第11-12页 |
2 RSV的生物学特性 | 第12-16页 |
·RSV的粒子形态 | 第13页 |
·RSV基因组及其编码的蛋白 | 第13-16页 |
·RNA1 | 第13-14页 |
·RNA2 | 第14页 |
·RNA3 | 第14-15页 |
·RNA4 | 第15-16页 |
3 布尼亚病毒科膜蛋白的研究现状 | 第16-19页 |
·布尼亚病毒的侵入 | 第16-17页 |
·布尼亚病毒的组装及释放 | 第17-18页 |
·布尼亚病毒糖蛋白GP与Gn、Gc | 第18-19页 |
4 布尼亚病毒与RSV糖蛋白亚细胞定位的研究进展 | 第19页 |
5 膜蛋白酵母双杂交技术 | 第19-22页 |
第二章 水稻条纹病毒NSvc2蛋白在本氏烟中的亚细胞定位研究 | 第22-58页 |
摘要 | 第22-23页 |
ABSTRACT | 第23-24页 |
1 试验材料与试剂、仪器 | 第24-25页 |
·试验材料 | 第24页 |
·主要试验试剂及来源 | 第24-25页 |
·试验仪器 | 第25页 |
2 试验方法 | 第25-42页 |
·感受态制备 | 第25页 |
·大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第25页 |
·农杆菌C58C1感受态制备 | 第25页 |
·羧基端融合YFP的载体构建 | 第25-31页 |
·PCR扩增片段 | 第26-28页 |
·产物回收 | 第28-29页 |
·酶切 | 第29页 |
·连接 | 第29页 |
·转化 | 第29-30页 |
·筛选阳性克隆 | 第30页 |
·质粒小提 | 第30-31页 |
·测序 | 第31页 |
·序列分析 | 第31页 |
·农杆菌转化 | 第31页 |
·农杆菌浸润 | 第31页 |
·显微观察 | 第31页 |
·总RNA抽提 | 第31-32页 |
·RT-PCR反应 | 第32-33页 |
·蛋白的抽提及分离 | 第33页 |
·Western bolt | 第33-34页 |
·膜蛋白酵母双杂交 | 第34-37页 |
·水稻原生质体的制备与转化 | 第37-39页 |
·载体构建 | 第37-38页 |
·水稻原生质体的制备 | 第38页 |
·水稻原生质体的转化 | 第38-39页 |
·RSV病毒粒子提取 | 第39页 |
·多克隆抗体制备 | 第39-42页 |
·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
·大肠杆菌Rosetta感受态细胞的制备 | 第40页 |
·转化 | 第40页 |
·原核表达与纯化 | 第40-41页 |
·SDS-PAGE | 第41页 |
·蛋白透析 | 第41页 |
·多克隆抗体制备 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-54页 |
·NSvc2-N蛋白单独表达时定位于高尔基体 | 第42-45页 |
·NSvc2-C蛋白单独表达时定位于内质网 | 第45-46页 |
·NSvc2-N蛋白将NSvc2-C蛋白从内质网召集到高尔基体 | 第46-47页 |
·NSvc2-N蛋白可与NSvc2-C蛋白互作 | 第47-49页 |
·NSvc2糖蛋白从内质网到高尔基体的运动依赖于有功能的COPⅡ分泌途径 | 第49-51页 |
·NSvc2糖蛋白在高尔基体的积累依赖有活性的COP Ⅰ途径 | 第51-53页 |
·RSV NSvc2蛋白在水稻原生质体中的亚细胞定位研究 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-58页 |
本论文结论及创新点 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
附录 | 第68-72页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |